排序方式: 共有33条查询结果,搜索用时 203 毫秒
11.
【目的】研究人锌指蛋白新基因ZNF580过表达对人脐静脉内皮细胞株EA.hy926血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及增殖能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】重组质粒pEGFP-ZNF580经LipofectamineTM2000脂质体转染法转染EA.hy926细胞,48h后荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在内皮细胞中的表达情况;应用半定量RT-PCR、Western blotting及ELISE法检测转染前后内皮细胞ZNF580和VEGFmRNA、蛋白表达的变化;运用MTT实验检测转染前后内皮细胞增殖能力的改变。【结果】荧光显微镜下示融合蛋白ZNF580-EGFP在EA.hy926细胞核中表达;ZNF580基因过表达后,内皮细胞VEGFmRNA及蛋白的表达均上调(P<0.05),且其增殖能力显著升高(P<0.01)。【结论】ZNF580可以调控EA.hy926细胞VEGF的表达,且ZNF580在内皮细胞增殖过程中具有重要的调节作用。 相似文献
12.
13.
转化生长因子β(the transforming growth factor beta,TGF-β)是一类多功能的细胞因子,它参与调节细胞的增殖、分化、凋亡等多种生命活动。TGF-β在调控肿瘤细胞凋亡中的作用是复杂的。TGF-β/Smad信号转导通路和MAPK信号转导通路是TGF-β介导细胞凋亡的两条重要的下游信号转导途径。本文重点就TGF-β启动激活Smad信号转导途径和(或)MAPK信号转导途径介导肿瘤细胞凋亡的机制和作用展开探讨。 相似文献
14.
目的:观察miR-486基因修饰脐带间充质干细胞外泌体的生物学特性,评价其对大鼠H9c-2心肌细胞生物学特性的影响。方法:分离并扩增人脐带间充质干细胞(UC-MSC),并鉴定其免疫表型和成骨及成脂分化能力;用电子显微镜观测外泌体的形态结构;应用Transwell细胞迁移实验观察外泌体对细胞迁移特性的影响。用重组腺病毒载体介导间充质干细胞高表达miR-486,应用qRT-PCR确定高表达miR-486的UC-MSC。收集培养上清,通过超速离心获得外泌体,应用qRT-PCR检测UC-MSC外泌体miR-486表达量。用Dye670标记评价外泌体对心肌细胞增殖的影响;在H2O2诱导的心肌细胞凋亡模型中通过AnnexinV/PI双标记流式细胞术检测外泌体对心肌细胞凋亡的影响。结果:UC-MSC分泌外泌体直径均在40-100 nm之间,且具有双膜结构。重组腺病毒能够有效介导miR-486在间充质干细胞表达,miR-486基因修饰UC-MSC分泌的外泌体中miR-486的表达显著增高。高表达miR-486的外泌体对心肌细胞有促增殖、促迁移作用及抑制心肌细胞凋亡的作用。结论:脐带间充质干细胞来源的且高表达miR-486的外泌体对心肌细胞有促增殖及抑制细胞凋亡作用。 相似文献
15.
【目的】观察ZNF580基因沉默后内皮细胞MMP-2的表达及迁移和侵袭能力的变化,为探讨ZNF580基因功能提供科学依据。【方法】针对ZNF580基因不同部位设计并化学合成3对不同靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染EA.hy926内皮细胞;应用半定量RT-PCR、Western blotting及明胶酶谱检测转染前后内皮细胞ZNF580和MMP-2 mRNA、蛋白的表达及活性变化;运用划痕愈合实验和Transwell小室模型检测转染前后内皮细胞迁移和侵袭能力的改变。【结果】筛选出最佳干扰序列siRNA序列3;下调ZNF580基因表达后,MMP-2 mRNA的表达及明胶酶的活性均下调(P<0.05),且内皮细胞体外迁移和侵袭能力显著降低(P<0.01)。【结论】ZNF580在内皮细胞运动转移过程中具有重要作用,可能成为肿瘤基因治疗的一个新靶点。 相似文献
16.
目的探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法用20个感染复数的p LKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和p PIG-U6-随机序列(scramble)-GFP对照慢病毒(GFP-SC对照组)感染HUVEC。病毒感染HUVEC 48 h后,用流式细胞仪检测慢病毒的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western蛋白质印迹法检测HUVEC内SENP1基因和蛋白表达水平。用CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果 GFP-SC对照组和SENP1干涉组感染效率均>97%。与GFP-SC对照组比较,SENP1干涉组HUVEC SENP1基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。CCK8法测定结果表明,SENP1干涉组HUVEC增殖能力较GFP-SC对照组明显降低(P<0.01)。SENP1干涉组细胞迁移过Transwell小室的细胞数量明显低于GFP-SC对照组(P<0.01)。用低浓度血清(含2%胎牛血清)培养基诱导细胞凋亡24 h,SENP1干涉组细胞凋亡率即已升高到GFP-SC对照组的2倍左右(P<0.05);诱导凋亡至48 h,SENP1干涉组细胞凋亡率升高到对照组的3.2倍左右(P<0.05)。结论 HUVEC内SENP1表达水平的降低不仅可以显著抑制细胞增殖和迁移能力,亦可促进细胞凋亡。 相似文献
17.
目的研究重离子对人外周血T淋巴细胞增殖、凋亡等生物学性能的影响并探讨其机制,为肿瘤放射治疗的辐射防护提供实验依据和基础。方法 Ficoll分离法分离人外周血T淋巴细胞,采用12C重离子束坪区照射,照射样品能量为70 MeV、LET=29 keV/μm,照射剂量为1.0和2.0 Gy,剂量率为0.5 Gy/min。分别于照射后12、24h,RT-PCR检测凋亡相关基因Bcl-2,Bax,Caspase3,Caspase8和Caspase9的表达;于照射后24、48 h,CCK8法检测细胞增殖能力;于照射后24、48 h,采用AnnexinV-PE/7-AAD、AnnexinV-FITC/PI法检测凋亡发生,并采用RT-PCR检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase3的表达。结果重离子照射可明显抑制人外周血T淋巴细胞的增殖,随着剂量增大,抑制作用更加明显。同时,重离子照射可促进T淋巴细胞的凋亡,特别是对于晚期凋亡的诱导作用(P〈0.01)。RT-PCR检测结果显示,重离子辐射可抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进促凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达(P〈0.01)。结论重离子辐射可显著影响抑制T淋巴细胞的增殖并促进其凋亡。 相似文献
18.
20.
【目的】比较四种家兔实验性呼吸衰竭模型,寻找适合于临床医学本科生实验教学且效果好、易重复的建造模型的方法。【方法】将30只家兔随机分为对照组、不全窒息组、气胸组、油酸性肺水肿组和肾上腺素性肺水肿组。通过检测各组动物呼吸、血压、血气的变化,比较不同方法建造的呼吸衰竭模型的特点。【结果】家兔在不全窒息后呼吸频率、血压出现先升高后抑制的表现,PaO2下降,而PaCO2升高(P〈0.05);气胸组家兔呼吸频率也出现先升高后抑制的表现,但血压变化不明显,PaO2下降,而PaCO2升高(P〈0.05);油酸或肾上腺素静脉注射使家兔形成肺水肿后,呼吸改变以抑制为主,PaO2下降(P〈0.05),而PaCO2变化不明显(P〉0.05)。【结论】在不全窒息所诱导的呼吸衰竭模型上,可检测到呼吸、血压、血气的典型变化,且操作简单,是适宜于呼吸衰竭实验教学的造模方法。 相似文献