sDR5抑制SAH后DR5-Trail介导的神经细胞凋亡并改善长期神经功能缺损

目的探讨死亡受体5(DR5)在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中的作用及分子机制, 以及可溶性DR5(sDR5)对SAH的神经保护作用。方法实验1:将SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、SAH组(通过颈动脉穿刺法构建SAH模型), 其中SAH组进一步分为SAH后6 h组、SAH后12 h组、SAH后24 h组、SAH后48 h组、SAH后72 h组, 每组6只, 通过Western blotting实验检测每组大鼠相应时间点肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和DR5表达情况, 通过免疫荧光双染DR5与神经元核抗原(NeuN)判断DR5在神经元的表达情况。实验2:将SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、SAH组、Trail组(注射Dordaviprone)和Trail+sDR5组(注射Dordaviprone+sDR5), 每组6只。于SAH模型构建成功后第24小时行Western blotting实验检测caspase家族蛋白水平、tBid表达水平, 同时行Tunel染色及DR5、caspase-3免疫荧光双染。实验3:大鼠分组同实验2, 于SAH模型构建成功后第5、7、1...     

低氧预适应刺激脑海马区内源性神经干细胞的增殖**

背景：缺血/缺氧/低氧等刺激均能导致内源性神经干细胞的增殖和分化,起到脑组织修复作用,但低氧预适应能否影响内源性神经干细胞的增殖尚不清楚。 目的：探讨低氧预适应对小鼠脑海马区内源性神经干细胞增殖的影响。 方法：清洁级Balb/c近交系小鼠随机分为3组,低氧对照组小鼠放入广口瓶内,立即用橡皮塞封紧,以动物出现第1次喘呼吸为低氧耐受极限的标志,完成低氧暴露1次;低氧预适应组小鼠按此法重复操作4次;正常对照组小鼠不进行低氧暴露。通过免疫荧光和激光共聚焦显微镜等技术,测定海马BrdU阳性细胞数和荧光强度。 结果与结论：与低氧对照组比较,低氧预适应组小鼠耐受时间显著延长(P < 0.01)。正常对照组海马区BrdU标记的内源性神经干细胞荧光强度微弱,海马区可见少量BrdU阳性细胞;低氧对照组、低氧预适应组荧光强度及BrdU阳性细胞数均明显增加(P < 0.01),且低氧预适应组增加幅度大于低氧对照组(P < 0.01)。证实在低氧预适应过程中,海马区内源性神经干细胞明显增殖,可能参与低氧预适应脑保护机制。     

脑淋巴引流阻滞后蛛网膜下腔出血兔脑脊液对PC12细胞的损伤作用

目的:探讨脑淋巴引流阻滞(CLB)后蛛网膜下腔出血(SAH)兔脑脊液对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)的损伤作用。方法:建立兔SAH及CLB模型,于SAH模型建立后5d抽取脑脊液加入PC12细胞培养基中,随机将PC12细胞分为空白对照组(无血清F12培养基)、正常脑脊液组、SAH脑脊液组、SAH+CLB脑脊液组,分别于培养0.5h、1h、2h、4h后,通过四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测细胞存活率并测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫组化法检测细胞凋亡蛋白Bax及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果:MTT、LDH结果显示,与正常脑脊液组比较,SAH脑脊液组和SAH+CLB脑脊液组脑脊液使PC12细胞存活率降低,LDH释放率增加,以后组更为显著;正常脑脊液对PC12细胞无明显损伤作用。在SAH脑脊液组和SAH+CLB脑脊液组均发现PC12细胞Bax及HSP70蛋白表达;Bax蛋白表达后组大于前组,且呈时间依赖性增强;在0.5h和1h,SAH+CLB脑脊液组HSP70蛋白表达强于SAH脑脊液组,而在2h和4h则表达减弱。结论:脑淋巴引流阻滞可加重SAH兔脑脊液对PC12细胞的损伤,表明脑淋巴引流通路在SAH后可能起到内源性保护作用。     

L-精氨酸改善实验性蛛网膜下腔出血后脑组织血供

目的探讨L -精氨酸 (L -arginine,L -Arg)对蛛网膜下腔出血 (subarachnoidhemorrhage,SAH)后脑组织血液供应和血清一氧化氮 (nitricoxide,NO)及血浆内皮素 -1(endithelin -1,ET -1)的影响。方法应用脑底动脉环血管内穿刺法建立接近于人类SAH的大鼠模型 ,将动物随机分为假手术组 (SO组 ,进行相似的手术操作但不刺破脑底动脉环 )、SAH组和SAH +L -Arg组。L -Arg(Sigma)于术前30min按0.5g/kg腹腔注射 ,每隔6h以同样的剂量追加1次。应用激光多普勒血流计动态检测24h内大脑顶叶皮层局部脑血流量 (regionalcerebralbloodflow,rCBF) ,动物断头取血后采用铜离子活化镉还原法测定不同时间点血清NO(NO2-/NO3-)水平 ,放射免疫分析法测定不同时间点血浆ET-1含量 ,同时股动脉插管监测平均动脉血压和血气指标。结果各组大鼠生理指标均未发生明显改变 ,假手术对rCBF、NO、ET-1无显著影响。SAH组术后rCBF迅速降低 ,1h达最低值 ,24h内无明显恢复 ;SAH组血清NO水平于术后1h开始下降 ,持续24h ;在术后1～24h,SAH组血浆ET -1水平均显著高于SO组。与SAH组比较 ,SAH +L -Arg组rCBF下降的速度减慢 ,下降的程度减轻 ;血清NO水平下降的幅度减小 ,血浆ET -1增加的程度减轻。结论血中NO下降和ET -1增加可能通过引起脑血管收缩和微循     

孪生姐妹右室扩张性心肌病

1 临床资料例1:患者女性,18岁。因活动后心悸胸闷12年,突然晕倒、抽搐半天入院。查体:呼吸25次/分,血压0kPa。神志模糊,面部、口唇及肢端发绀。双眼球内聚,瞳孔对光反应存在。颈无抵抗感,双肺呼吸音粗。心界扩大,心率220次/分,律齐。心电图示心室扑动。径吸室、应用利多卡因、多巴胺等治疗12h后心室扑     

自发性食管破裂9例误诊分析

自发性食管破裂自1924年Boerhaav首次报告、1958年Meger首次作出临床上的正确诊断后,误诊率一直较高,常因此而延误治疗,增加其病死率。我们从1978～1990年收治的12例中,初诊误诊者9例,误诊率为75.0％。     

血管内穿刺法制作颅腔闭合的大鼠蛛网膜下腔出血模型

目的　建立颅腔闭合的大鼠蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ） 模型。方法　经颈外动脉或颈总动脉导入玻璃纤维至颈内动脉颅内段,刺破Ｗｉｌｌｉｓ 环而造成大鼠ＳＡＨ。对ＳＡＨ 组和假手术（ＳＯ） 组检测２４小时内局部脑血流量（ｒＣＢＦ） ,并观察基底动脉（ＢＡ） 管径。结果　在ＳＡＨ 模型大鼠的蛛网膜下腔均发现大量血液或血凝块。ＳＡＨ 后ｒＣＢＦ立即下降,并持续２４ 小时,同时ＢＡ 管径缩小。结论　血管内穿刺法能可靠诱导大鼠ＳＡＨ,并可产生脑血管痉挛。     

奥扎格雷加灯盏细辛治疗不稳定型心绞痛

目的观察奥扎格雷加灯盏细辛治疗不稳定型心绞痛疗效。方法选择不稳定型心绞痛病人60例，实验组除常规治疗外给予奥扎格雷加灯盏细辛，对照组则加用复方丹参注射液。观察治疗前后临床、心电图、血小板电泳率及血液流变学变化。结果实验组可明显缓解心绞痛及心电图缺血改变，治疗后血小板电泳率显著增快，血液流变学指标改善。结论奥扎格雷加灯盏细辛能有效治疗不稳定型心绞痛。     

经鼻导入rhG-CSF对脑梗死大鼠皮层FasL和HO-1表达的影响

目的 探讨经鼻靶向中枢导入重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑梗死大鼠皮层Fas配体(FasL)和血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响. 方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、脑梗死组、脑梗死+皮下注射rhG-CSF组、脑梗死+经鼻导入生理盐水组、脑梗死+经鼻导入rhG-CSF组.线栓法制作大鼠可逆性大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,2 h后再灌注.于MCAO模型制作成功后1 d、3 d制备脑组织冠状冰冻切片,用免疫荧光染色检测FasL和HO-1在缺血半暗带皮层的表达,激光共聚焦显微镜采集图像并计数阳性细胞数. 结果正常组和假手术组大鼠脑组织中见极少量FasL和HO-1阳性细胞,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).脑梗死组大鼠FasL和HO-1阳性细胞数明显增加(1 d时较3 d时高),表达区域主要为缺血半暗带皮层,与脑梗死+经鼻导入生理盐水组比较差异无统计学意义(P>0.05).经鼻给予rhG-CSF治疗后脑梗死大鼠脑组织内FasL阳性细胞表达下降,HO-1阳性细胞表达进一步上调,与脑梗死+皮下注射rhG-CSF组大鼠比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论经鼻靶向中枢导入rhG-CSF可以通过降低FasL、上调HO-1表达抑制脑梗死大鼠缺血半暗带皮层神经元凋亡,参与脑保护机制.     

银杏叶提取物促进大鼠蛛网膜下腔出血后血红素氧合酶-1表达

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响。方法实验采用健康Wistar大鼠,将动物随机分入非SAH组、SAH组、溶媒组、EGb1组(低剂量)、EGb2组(高剂量),EGb腹腔注射给予。非SAH组于枕大池注入0.3ml生理盐水;其余各组于枕大池注入自体动脉血溶血物0.3ml诱导SAH。将动物处死后取脑,用RT-PCR方法检测术后24h、72h皮层HO-1 mRNA,用免疫组化法检测术后72h海马HO-1蛋白的表达。结果在非SAH组大脑皮层未见HO-1 mR-NA表达;SAH组大鼠在诱导SAH后24h,大脑皮层HO-1 mRNA表达增加,72h进一步增加;在EGb1组和EGb2组,大脑皮层HO-1 mRNA表达更加明显,其中EGb2组的表达强度又高于EGb1组。非SAH组未见海马HO-1蛋白表达;SAH组在诱导SAH后72h海马可见HO-1蛋白明显表达;EGb1组和EGb2组海马HO-1阳性细胞和表达强度增加,以EGb2组更加明显。结论EGb对SAH后脑组织HO-1表达具有促进作用。