布洛芬在损伤后原代培养大鼠肝细胞中代谢的研究

在多种肝病(包括炎症/免疫介导细胞损伤、酒精性肝损伤和缺血再灌注性肝损伤等)的肝细胞中氧化应激是它们共同损伤机制.     

绵萆薢对去卵巢大鼠股骨生物力学及骨形态计量学的影响

目的探讨绵萆薢水煎液对雌性大鼠去卵巢后股骨生物力学及骨计量学指标的影响.方法雌性未孕大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、绵萆薢高(4 g/kg·d)、中(2 g/kg·d)、低(1 g/kg·d)剂量组,每组均为5只.连续给药12周后,三点弯曲法测量股骨生物力学指标,并分别进行HE染色、Von Kossa染色及四环素荧光标记观察,以骨计量学方法分别测定骨小梁体积百分比TBV(%)、骨小梁类骨质表面TOS(%)、类骨质宽度MOSW(μm)、四环素单标表面MdS(%)、四环素双标表面DMds(%)、双/单标表面比DMds/MdS(%)、骨形成表面百分比TFS(%)、骨吸收表面百分比TRS(%)、骨矿化沉积率MAR(μm/d)、骨矿化延迟时间MLT(d).结果大鼠去卵巢3个月后股骨的最大载荷、挠度、最大应变分别为125.78±15.48(N)、1.87±0.22(mm)和9.34±1.10(%),均明显低于假手术组(P＜0.05,P＜0.01);各剂量绵萆薢可以不同程度地减少其最大载荷、最大应力的降低.去卵巢3个月后大鼠股骨骨体积较假手术组明显降低(P＜0.01),四环素单标表面、双标表面、双单标比及类骨质表面、类骨质宽度、破骨表面、矿化率均明显增加(P＜0.01);绵萆薢中、高剂量组的骨体积均明显高于模型组(P＜0.05),四环素单标表面、双标表面、双/单标比、骨吸收表面、类骨质表面、类骨质宽度、矿化沉积率均明显低于模型组(P＜0.05),骨矿化延迟时间稍短于模型组(P＞0.05).结论绵萆薢在一定程度上可以增加去卵巢大鼠股骨的骨小梁体积,降低骨转换率,改善部分生物力学指标.     

无创性肢体缺血预适应对大鼠心脏的保护作用

目的研究无创性肢体缺血预适应(RIP)对大鼠缺血/再灌后心脏损伤的影响。方法采用无创性后肢缺血预适应的方法,观察其对心肌缺血/再灌后心脏生理学(HR、MAP、ST段)、室性心律失常的出现时间和持续时间的影响以及其对心肌缺血/再灌后梗死面积和形态学改变的影响。结果与对照组比较,处理组对心肌缺血/再灌后HR和MAP的影响差异无显著性,但是RIP能明显降低ST段的抬高幅度,推迟室性心律失常出现的时间,缩短持续时间,并且能减少心肌梗死面积,降低心肌细胞的肿胀、减少间质出血和炎性细胞的浸润。结论RIP对心肌损伤具有保护作用。     

高效液相色谱法测定家兔血浆中腺苷浓度

目的:建立血浆中腺苷(adenosine,AD)浓度的HPLC测定方法,辅助某些药物作用机制的研究及疗效的评价,并考察腺苷在血浆中的稳定性。方法:采用反相高效液相色谱-紫外检测法测定家兔血浆腺苷含量,色谱柱为YWG-C18柱(10μm,250mm×4.6mm),流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇(80∶20,pH5.9),流速为1mL·min-1,检测波长:254nm,柱温:35℃。结果:腺苷的线性范围为0.50~40.00mg·L-1(r=0.9980),检测限为0.50mg·L-1。结论:腺苷可被血液成分摄取和灭活,应用本实验建立的采样方法以及立即进行预处理可以显著减少这一过程,保证了结果的可靠性,而且检测方法灵敏度高,特异性强,操作简单,测定周期短,以此为契机推广到人体,可以为辅助药物作用机制的研究提供一种优良方法。     

薯蓣皂甙对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察薯蓣皂甙对大鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的保护作用。方法健康雄性Wistar大鼠48只,随机分为IR组、高剂量组(DH)、低剂量组(DL)。IR组0.9%生理盐水10m.lkg-1.d-1灌胃,高剂量组薯蓣皂甙300mg·kg-1.d-1灌胃,低剂量组150mg·kg-1.d-1灌胃,共7d。末次给药24h后,复制大鼠心肌IR损伤模型,观察心脏生理学指标(HR、BP、ST段变化),心律失常评分,心肌梗死面积,心肌形态学指标的变化。结果与IR组心律失常评分3.75±0.45相比,给药组(DH组2.25±1.18,DL组2.44±1.09)明显下降,心肌梗死面积明显缩小,心功能明显改善。结论薯蓣皂甙对大鼠心肌IR损伤具有保护作用。     

无创性肢体缺血预适应对大鼠缺血再灌注损伤心肌基质金属蛋白酶的影响

目的观察大鼠无创性肢体缺血预适应(LIP)对心肌缺血再灌注损伤后心肌形态学、梗死面积和心肌MMP-2、MMP-9和TIMP-1的影响。方法通过连续3 d每天1次3个循环的下肢无创性5 min缺血、5 min再灌建立LIP模型。大鼠随机分成3组,心肌缺血再灌注组(I/R)、心肌缺血预适应组(CIP)和LIP组。以HE染色法观察心肌形态学改变;红四氮唑染色法确定心肌梗死范围,IS=IA/AAR×100%;免疫组化法测定心肌MMP-2、MMP-9和TIMP-1水平。结果缺血30 min再灌注120 min后,I/R组IS为(44.5±8.1)%;与I/R组比较,CIP和LIP均能明显改善心肌损伤的形态学改变,降低心肌细胞的肿胀、减少间质出血和炎性细胞的浸润。CIP使IS降低35.7%,缺血区心肌MMP-2降低42.1%,MMP-9降低43.3%,TIMP-1水平增加40.0%;LIP使IS降低42.9%,缺血区心肌MMP-2降低41.2%,MMP-9降低46.6%,TIMP-1水平增加53.8%。结论LIP不仅能改善缺血再灌注损伤大鼠心肌形态学改变、减少心肌梗死面积,而且能降低心肌细胞基质的损伤,起到保护心肌的作用。     

吡那地尔、美托洛尔、谷氨酰胺、胰岛素单独及联合使用对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制

目的 研究吡那地尔(pinacidil,Pin)、美托洛尔(metoprolol,Met)、谷氨酰胺(glutamine,Glu)、胰岛素(insulin,Ins)四药联用对缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)所致H9c2心肌细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法 将培养的H9c2心肌细胞随机分为7组,即①正常对照(Con)组;②H/R组;③Pin组;④Met组;⑤Glu组;⑥Ins组;⑦四药联用(PMGI)组。测定各组H9c2心肌细胞的存活率;收集培养液测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western印迹法检测保护性蛋白热休克蛋白70 (heat shock protein 70,HSP70)的表达情况。结果 对于H/R损伤的H9c2心肌细胞,四药联用组与药物单用组或H/R组相比能明显提高细胞存活率,保护细胞膜,减少LDH渗漏;增加抗氧化能力,提高SOD含量;增加HSP70的表达。结论 联合用药组与药物单用组相比保护作用增强。     

有限采样法评价肝脏CYP3A代谢活性的实验研究

目的:以细胞色素P450(CYP)3A探针药物咪哒唑仑(MDZ)的系统清除率(Cls)为指标,评价有限采样法(LSS)预测肝脏CYP3A抑制状态下代谢活性的可行性。方法:采用系列剂量的CYP3A选择性抑制剂酮康唑预处理大鼠,静脉注射MDZ后在若干时间点收集血浆样品并检测MDZ浓度,经逐步回归分析和Jack-knife验证建立LSS模型。对经相同处理的另一随机群体进行验证分析,评价该LSS模型方程的准确性和重现性。结果:由两点(60、90min)或三点(30、60、90min或30、60、120min)血浆药物浓度建立的LSS预测模型所得到的Cls估计值(Clest)与实际计算值(Clobs)之间具有良好的相关性,误差小,特别是两点LSS模型则更为简便。结论:本研究结果表明,以MDZCls为指标,采用LSS评价大鼠肝脏CYP3A抑制状态下的代谢活性是一种准确而简便的方法,为今后推广到临床评价肝脏代谢功能从而制定和调整治疗药物的给药方案提供了理论依据和实验室证据。     

卡铂注射液的含量测定及其临床使用稳定性研究

目的:建立测定卡铂注射液含量的方法,并考察溶媒、温度和光照对卡铂含量结果的影响。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为KromasilC18,流动相为甲醇-水(5∶95),流速为1mL·min-1,检测波长为229nm。在上述色谱条件下分别测定卡铂注射液在不同溶媒中(5%葡萄糖注射液、0.9%氯化钠注射液)、在不同温度(37、42、60℃)及在自然光照射下(5%葡糖糖注射液、蒸馏水)不同时间(8h内)时的含量变化。结果:卡铂检测浓度线性范围为4.2～33.6μg·mL-1(r=0.9999),平均回收率为99.72%(n=9)。8h内卡铂在2种溶液中含量百分比RSD分别为0.56%和0.27%;卡铂在3种温度下含量百分比RSD分别为1.15%、0.98%和1.60%;在自然光照射下2种溶液中含量百分比RSD分别为1.52%和0.45%。结论:所建立的卡铂制剂含量测定方法操作简便,结果准确;卡铂制剂在各种临床使用条件下含量均相对较稳定。     

缺血缺氧预适应对抗脑缺血缺氧损伤的机制研究进展

缺血缺氧预适应现象最初见于心脏,一经发现即引起了学术界的广泛关注,随后研究者分别从不同层面证实了大脑同样具有预适应现象,并进行了大量的研究,成为抗脑缺血缺氧研究的热点.脑缺血缺氧预适应(cerebral ischemia/hypoxia preconditioning,CIP)可以通过多种信号传导途径,减少细胞凋亡,提...