结核分枝杆菌furB基因的克隆、表达和纯化

目的: 从H37Rv基因组中扩增furB并高效表达和纯化. 方法: 用PCR技术从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增furB序列,将其与pGEM-T-Easy载体连接转化E.coli DH5α,构建重组克隆载体pGEM-T-Easy/furB,测序正确后将目的基因片断克隆入pQE-80L原核表达载体并转化E.coli DH5α,IPTG诱导目的蛋白表达. 经Western blot鉴定目的基因与(His)6融合表达,将已表达的蛋白质通过Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化. 结果: PCR得到结核分枝杆菌furB,测序结果与Genbank中报道的完全一致. SDS-PAGE显示,在Mr为15.0×103处有相应的蛋白质表达条带,Western blot鉴定为(His)6融合表达蛋白. 经Ni2 -NTA亲和色谱柱进行纯化后可得到纯化的蛋白. 结论: 成功克隆了铁调节蛋白基因furB序列,并在E.coli DH5α高效表达,亲和层析后获得了纯化目的蛋白.     

中国南方一起甲型H1N1流感暴发疫情的紧急控制与应对未来重大传染病暴发流行的思考

目的根据2009年中国南方某单位一起新型甲型H1N1流感暴发,分析控制疫情成功中所采取的具体措施,探讨未来应对重大传染病流行的对策。方法疫情暴发经过;紧急启动疫情控制组;realtime RT-PCR法进行新型流感H1N1病毒核酸测定;控制措施：发热患者隔离救治,密切接触者医学观察和预防性服药,流行病学调查,住房及驻地周围消毒,健康防病知识宣教,心理恐慌治疗等。结果经12d成功控制暴发性流感疫情,202例发热患者治愈,保证友邻各单位的施工顺利完成。结论及时的报告、高效有力的指挥和各部通力的合作是控制疫情的关键;建立和完善高素质的传染病防治队伍是及时诊治和治愈病情的保证;制订合理长途转运、科学管理和演练计划是防止疫情发生和复燃的前提。     

ICP-MS测定雄黄中砷对小鼠大脑中12种内源性元素的影响

目的建立多元素含量的分析方法,探究雄黄内As对大脑组织内源性元素水平的影响。方法建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定小鼠大脑组织中Na、Mg、K、Ca、Fe、Cu、Zn、Cr、Mn、Co、Ni、Se和As元素含量分析方法,并将所建方法应用到雄黄染毒大脑组织中上述元素的含量测定。该方法使用标准曲线法计算含量,内标法改善基体效应。结果相关系数(r)大于0.9915(K为0.9365);检出限范围为0.0025~22.8344μg/L;仪器精密度RSD小于1.96%;方法重复性RSD小于3.51%;添加不同浓度的混合标准溶液,加标回收率为81.66%~117.05%(K为62.90%),RSD小于5.17%。结论该方法检出限低,干扰少,灵敏度高;雄黄内As可通过血脑屏障在脑组织中蓄积,引起大脑组织内Na、K、Ca、Zn、Cr、Mn、Co、Ni和Se水平的变化,对Mg、Fe和Cu水平的影响不明显。     

ICP-MS测定雄黄中砷对小鼠肝脏中12种内源性元素的影响

目的:建立多元素含量的分析方法,探究雄黄内As对肝脏内源性元素水平的影响。方法:建立电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定小鼠肝脏中Na、Mg、K、Ca、Fe、Cu、Zn、Cr、Mn、Co、Ni、Se和As元素含量的分析方法,并将所建方法应用到雄黄染毒肝脏中上述元素的含量测定。使用内标法改善基体效应,标准曲线法计算含量。结果:相关系数(r)0.992 3(钾为0.966 6,铁为0.946 1);检出限范围为0.001 5~6.608 2μg/L;仪器精密度RSD1.75%;方法重复性RSD4.69%;添加不同浓度的混合标准溶液,加标回收率为82.70%~108.13%(钾为53.48%,铁为50.51%),RSD5.69%。结论:建立的研究方法检测速度快,检出限低,灵敏度高;雄黄内As能引起肝脏内Mg、Ca、Fe、Cu、Zn、Cr、Mn、Co、Ni和Se水平的变化,对Na和K水平的影响不明显。     

小儿病毒性脑炎55例脑电图分析

目的 探讨脑电图(EEG)在小儿病毒性脑炎诊断中的应用价值.方法 回顾性分析55例病毒性脑炎患儿的临床表现以及EEG资料.结果 患儿EEG阳性率为94.55%.结论 EEG为早期诊断病毒性脑炎重要的客观指标,其异常程度与大脑病变的严重程度有相关性,对病情的判断、指导治疗具有重要价值.     

汉坦病毒感染致血小板减少的机制

汉坦病毒主要感染血管内皮细胞,引起两种人类疾病,即肾综合征出血热和汉坦病毒心肺综合征,它们的共同特点是毛细血管广泛损伤,通透性升高.汉坦病毒感染者血小板数量严重减少,不仅与"外周破坏增加"有关,而且还可能与"血小板生成和功能障碍"有关.尽管汉坦病毒感染引起血小板减少的机制尚不完全明确,但近年也取得了一些重要进展.本文主...     

INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征60例对比观察

目的:探讨INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征的临床效果。方法:将早产儿呼吸窘迫综合征患者60例根据治疗方法的不同分为治疗组30例与对照组30例,对照组单独应用持续正压通气治疗,治疗组应用INSURE技术治疗。结果:两组治疗后的PO2、PO2/FiO2值较治疗前有明显上升(P<0.05),PCO2较治疗前有明显下降(P<0.05),两组PO2、PO2/FiO2、PCO2在治疗后各个时间点与治疗前比较无显著性差异(P>0.05)。治疗组死亡1例,对照组死亡4例,两组患者病死率对比具有显著性差异(P<0.05),治疗组患者并发症发生率明显少于对照组(P<0.05)。结论:INSURE技术治疗早产儿呼吸窘迫综合征能有效保持动脉血气的稳定,降低早产儿并发症的发生率,其机制可能与减轻气道阻力、减轻肺水肿有关。     

不同类型新型冠状病毒肺炎临床特征分析

目的:回顾性分析不同类型新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的临床资料,探讨COVID-19的临床特征。方法:收集2020年2月10日至11日武汉火神山医院119例非危重症和30例危重症COVID-19患者人口学基本特征、基础疾病、临床表现以及重要检验指标,对2组患者数据进行统计学处理。结果:2组间性别差异无统计学意义,危重症患者以高龄者居多,临床表现大多是数个症状共同或先后出现。COVID-19常伴有基础疾病,其中最多为高血压,其次是冠心病及2型糖尿病。51.3%～63.3%患者同时患高血压病、冠心病及2型糖尿病等多种疾病。此外,危重型COVID-19患者的淋巴细胞计数、淋巴细胞百分比明显低于非危重型患者,而白细胞计数、白细胞百分比、C-反应蛋白(C-reactive protein, CRP)和降钙素原(procalcitonin, PCT)、肌酸激酶(creatine kinase, CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme, CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)及α-羟丁酸脱氢酶(α-hydroxybutyrate dehydrogenase,α-HBDH)等指标,危重症患者则明显高于非危重症患者。LDH及α-HBDH存在明显的分层分布差别(P0.001),且α-HBDH的曲线下的面积(AUC)高达0.936,高于CK-MB的0.775。结论:与非危重型COVID-19患者相比,危重型COVID-19患者年龄更大,临床表现和基础疾病更多、程度更重,炎性反应更明显。α-HBDH是判断COVID-19患者危重程度及心肌损伤的重要参考指标。     

维生素A与新生儿呼吸系统疾病关系的研究进展

维生素A是一种脂溶性维生素,它参与广泛的生理过程,如胚胎发育,视觉发育以及细胞分化和增殖.视黄酸(RA)是维生素A主要的活性形式,它调节着多个器官的发育过程.在早期肺发育形成过程中需要足够的维生素A.慢性维生素A缺乏与肺的组织病理学变化有关,这种变化会破坏正常的肺生理,从而导致严重呼吸系统疾病.本文主要对维生素A与新生...     

汉滩病毒G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk的体外相互作用

目的研究汉滩病毒（HTNV）G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk的体外相互作用。方法通过体外激酶共沉淀和免疫印迹分析,获取G1ITAM样基序在体外可以与Syk相互作用的证据。结果体外激酶共沉淀一免疫印迹分析证明,在体外HTNVG1 ITAM样基序可以与Syk相互作用。结论HTNVGI蛋白胞质区高度保守ITAM样基序在体外可以与Syk相互作用,为进一步探讨G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用及其与血管内皮损伤的关系奠定了基础。