原发性IgA肾病与HLA-DQA1、-DQB1等位基因相关性研究

原发性ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）的发病率及临床表现在世界各地存在较大的地域性差异,从１９７８年起人们相继对ＩｇＡＮ患者的ＨＬＡ多态性进行了研究,试图从免疫遗传学角度来探讨该病的病因学及其所显示的发病率、临床表现等方面的地域性与种族性差异。 本实验采用ＰＣＲ－序列特异性引物（ＰＣＲ－ＳＳＰ）基因分型方法分析原发性ＩｇＡＮ患者的 ＨＬＡ－ＤＱＡ１及－ＤＱＢ１等位基因多态性,旨在探索中国人群中ＩｇＡＮ与ＨＬＡ系统的疾病相关性,以期寻找ＩｇＡＮ的易感基因或抵抗基因的部位,从而为该病的病因及发病机理研究提供免疫…     

强直性脊椎炎病人HLA B27等位基因与HLA A、B 抗原关系分析

目的　调查强直性脊椎炎（ Ａ Ｓ） 病人中 Ｂ２７ 等位基因与其它 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原之间的关系,为 Ａ Ｓ 与 Ｂ２７ 关联机理提供线索。方法　 Ｈ Ｌ Ａ Ａ、 Ｂ 抗原分型采用 Ｎ Ｉ Ｈ 标准微量淋巴细胞毒方法, Ｂ２７ 等位基因的检测采用聚合酶链反应／ 顺序特异的寡核苷酸探针方法。对上海地区６８ 例 Ａ Ｓ 病人和３１８ 例正常对照进行调查。结果　 Ａ Ｓ 病人根据其所检定的 Ｂ２７ 等位基因主要可分为 Ｂ２７０４和 Ｂ２７０５ 二大组, Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 的频率在 Ｂ２７０４ Ａ Ｓ 组要比正常对照组显著增高（ Ｐ＝ ００００ ９８ , Ｐｃ＜ ０ ．０１） ,在 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组则比正常对照组稍低（ Ｐ＞ ０ ．０５） , Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ Ａ Ｓ 组之间差异也有统计学意义（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。结论　上海地区携带 Ｂ２７０４ 的 Ａ Ｓ病人与 Ｈ Ｌ Ａ Ａ１１ 抗原相关,提示 Ｂ２７０４ 与 Ｂ２７０５ 在 Ａ Ｓ 发病中的具体作用可能有所差异,或 Ｂ２７０４ 与 Ａ１１ 之间存在连锁不平衡。     

西双版纳傣族及上海汉族群体HLA－DR2相关的DR／DQ单倍型分析

对４４名西双版纳傣族和９名上海地区汉族ＤＫ２阳性个体进行了与其相关的ＤＲ／ＤＱ单倍型组合的分析。傣族群体中ＤＲＢＩ－ＤＲ２亚型分布以＊１６０２与＊１５０２为最常见，其等位基因频率分别为４３．６％与，４０．０％和汉族群体中以＊１５０１为主明显不同。傣族群体中共检出１０种与ＤＲ２相关联的ＤＲ／ＤＱ单倍型；最常见的是ＤＲＢ１＊１６０２、ＤＲＢ５＊０１０１、ＤＱＡ１＊０１０２、ＤＱＢ１＊０５０２（３４．５％）与汉族及其他群体明显不同，本研究表明傣族不仅具有高频率的ＤＲ２，而且与ＤＲ２相关联的ＤＲＢ１、ＤＲＢ５、ＤＱＡ１、ＤＱＢ１单倍型组合有其独特性。     

正常妊娠和原因不明习惯性流产者HLA-G基因14 bp缺失多态性研究

为研究HLA-G基因3’非翻译区14 bp缺失多态性在习惯性流产患者和正常妊娠妇女中的差异,分别提取患者蜕膜和正常女性外周血DNA。PCR扩增HLA-G基因第8外显子,产物经9%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并经EB染色后在凝胶成像仪下观察。显著性检验用SAS软件包进行四格表χ2分析。结果显示:(1)-14 bp和+14 bp等位基因频率在两组间无显著性差异;(2)与正常对照组相比,RSA患者组中-14 bp/+14 bp杂合子的比例显著升高(χ2=4.7690,P=0.0290)。结果提示,中国人群HLA-G 14 bp缺失多态性在维持正常的妊娠中可能有重要作用。     

MICA基因第2、3和4外显子多态性与血清阴性脊柱关节病关联研究

目的：探讨MICA基因外显子2，3和4的多态性与血清阴性脊柱关节病（SpA)的发生是否存在关联。方法：采用地高辛标记的寡核苷酸探针杂交技术（PCR－SSOP），调查上海地区199例B27（＋）SpA患者MICA外显子2，3和4的多态性，结果：SpA病例组中MICA*007的频率比随机对照组显著升高（RR＝3．04，Pc＝0.000045），但比较B27（＋）病例组与B27（＋）正常对照组差异无显著性（P＞0．05），结论：MICA*007等位基因与SpA的发生可能无直接的关联，MICA＊007的频率在SpA病例组中显著升高可能由于和HLA－B27基因存在连锁不平衡所致。     

HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体的克隆及鉴定分析

目的 构建人HLA-C和HLA-G基因真核细胞双表达载体。方法 用RT-PCR从孕妇蜕膜组织有核细胞总mRNA中逆转录扩增全长HLA-C和HLA-G cDNA，首先将HLA-G经BamHⅠ和ClaⅠ双酶切，HLA-C经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后，分别定向插入真核细胞双顺反子载体pVITRO2的多克隆位点1(mes1)和2(mes2)中，然后经酶切和测序鉴定，确定已建立pVITRO2的单表达质粒pVITRO2-HLA-G和pVITRO2-HLA-C，再将HLA-CcDNA经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切，定向插入单表达质粒pVITRO2-HLA-G的多克隆位点2(mes2)中，经PCR反应初筛，再经双酶切鉴定。结果 限制性内切酶和测序分析表明已成功构建了HLA-Cw*0103和HIA-G*0101的单表达质粒pVITRO2-HLA-C和pVITRO2-HLA-G以及双表达质粒pVITRO2-HLA-CG。结论 本研究成功构建了真核细胞双顺反子载体pVITRO2的双表达质粒pVITRO2-HLA-CG，以及单表达质粒pVITRO2-HLA-C和pVITRO2-HLA-G。     

ELISA测定血清可溶性HLA—Ⅰ类抗原

目的　建立定量测定可溶性HLA I类抗原的ELISA方法。方法　测定上海地区汉族正常人群血清可溶性HLA I类抗原的含量 ,并进一步研究可能影响这一含量的因素。结果　测得 116例上海地区汉族正常个体血清可溶性HLA I类抗原的含量为 5 2 9 3 2±2 82 88ng/ml。结论　性别和常见HLA A位点抗原型别对血清可溶性HLA I类抗原的含量未造成显著影响。     

血清阴性脊柱关节病与HLA-DRB1基因相关性研究

为探讨HLA DRB1基因与血清阴性脊柱关节病 (SpA )的相关性 ,我们采用PCR/SSO方法对上海地区 2 14例SpA患者及 15 0例随机正常对照、 13例B2 7阳性正常对照进行HLA DRB1基因分型。结果发现HLA DR12在病人组中明显高与正常对照组及B2 7阳性正常对照组 ,Pc =0 0 0 19,RR =1 988。DR6明显低于B2 7阳性对照组 ,P <0 0 0 5 ;DR6在B2 7阳性对照组中高于随机对照组 ,P <0 0 0 5。提示 ,上海地区SpA患者其DR12基因与B2 7之间可能存在连锁不平衡 ,并可能增加对SpA的易感性 ;而DR6则可能对SpA的易感有保护作用。     

血清封闭抗体及HLA抗体与妊高征发病关系探讨

目的 :探讨封闭抗体及人类白细胞抗原 (HLA)抗体与妊娠高血压综合征 (妊高征 )发病的关系。方法 :应用微量淋巴细胞毒试验 ,检测 5 4例妊高征患者 (妊高征组 ) (其中轻度 12例、中度 15例、重度 2 7例 )及 40例正常妊娠妇女 (对照组 )血清封闭抗体及HLA抗体水平。结果 :封闭抗体阳性率妊高征组 (特别是中、重度妊高征组 )极显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;与对照组相比 ,重度妊高征组HLA Ⅰ、Ⅱ类抗体阳性率均极明显降低 (P <0 .0 1、P <0 .0 0 1) ,中度妊高征组HLA Ⅰ类抗体阳性率无显著差异 ,而HLA Ⅱ类抗体阳性率下降有显著差异 (P <0 .0 5 )。上述抗体在妊高征各组间比较 ,仅发现轻 重度妊高征组间封闭抗体阳性率有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :封闭抗体及HLA抗体 (尤其是HLA Ⅱ类抗体 )下降或缺乏可能在妊高征的发病及病情进展中起着较重要的作用。     

上海地区汉族群体HLA-E基因多态性分析

目的调查上海地区汉族人群HLA-E等位基因的分布情况及与HLA-A、-B抗原之间的连锁不平衡关系,为探讨HLA-E基因多态性与疾病的关联奠定基础.方法HLA-A、-B抗原分型采用NIH标准微量细胞毒方法;HLA-E等位基因检测采用聚合酶链反应/序列特异的寡核苷酸探针杂交方法,对201名上海地区汉族正常人进行了调查.结果HLA-E的5个等位基因在这一人群中共检测到3个,其中E*0101的频率最高,为42.29%,其次为E