4种病原体感染后儿童外周血T淋巴细胞活化状态检测

目的 检测EB病毒(EBv)、巨细胞病毒(CMV)、肺炎支原体(MP)和柯萨奇病毒(COX)4种病原体感染后患儿T淋巴细胞亚群和活化T淋巴细胞亚群表达情况,探讨不同病原体感染后的变化特点.方法 采用流式细胞术检测病原体感染后患儿急性期外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD3+ HLA-DR+、CD3+ CD25+、CD8+ HLA-DR+、CD8+ CD38+和CD4+ CD25+T淋巴细胞表达情况,并与健康儿童对照比较.结果 EB感染后,患儿急性期CD3+、CD8+、CD3+ HLA-DR+、CD8+ HLA-DR+和CD8+ CD38+T细胞比例明显增高;CD4+、CD4 +/CD8+和CD4+ CD25+T细胞亚群显著降低;CD3+ HLA-DR+、CD8+ HLA-DR+、CD8+ CD38+细胞比例与患儿体温呈负相关,CD3+ CD25+与患儿的发热时间呈正相关;其他病原体感染中,CMV感染患儿CD4+细胞比例显著高于MP、COX感染患儿和正常儿童,CD4+/CD8+显著高于MP感染患儿和正常儿童,CD8+ CD38+细胞比例显著高于MP感染患儿和正常儿童;MP感染患儿急性期淋巴细胞CD3+细胞比例显著低于正常儿童,CD8+ CD38+细胞比例显著低于COX感染息儿.结论 4种病原体感染后患儿体内呈免疫活化和失衡状态;不同病原感染后,患儿T细胞免疫改变各具特点;检测患儿T淋巴细胞亚群和活化T淋巴细胞亚群可作为一种鉴别和监测手段,为临床区别该4种病原体感染和掌握患儿病情提供重要参考依据.     

β淀粉样多肽人源性抗体的筛选与鉴定

目的：制备β淀粉样多肽(Aβ)人源性抗体并进行鉴定。方法：以Aβ1-42为抗原，利用噬菌体抗体库技术，通过“吸附-洗脱-扩增”的富集反应，筛选出阳性克隆，进行ELISA检测。将单克隆噬菌粒转化大肠杆菌HB2151，诱导表达可溶性单链抗体(scFv)。结果：经过4轮筛选，获得56个能与AB结合的ELISA阳性克隆。经蛋白印迹检测(western blot)，表达的可溶性scFv抗体片段能够特异性地与A131-42结合，而与牛血清白蛋白(BSA)没有交叉反应。结论：该技术便捷有效，可不经免疫制备出高特异性的人源性抗体，为开展阿尔茨海默病的免疫疗法奠定了基础。     

运用间接法建立杭州地区血清钾、钠、氯、钙、镁、磷的参考区间

目的运用间接法建立杭州地区血清钾、钠、氯、钙、镁、磷的参考区间,与行业标准推荐的参考区间进行比较,探究间接法的可靠性,并为地区人群参考区间的建立提供参考。方法选用2016年本院体检人群数据,利用偏度-峰度值检验数据的正态性,若非正态则使用BOX-COX转换成近似正态,四分位距法剔除离群值后用Hoffmann法获得参考区间,计算同直接法的偏差,与各项目参考变化值(RCV)进行比较,并用20例体检结果正常的个体进行参考区间的验证。结果间接法建立6个项目钾、钠、氯、钙、镁、磷的参考区间相对偏差均RCV(13. 13%、2. 87%、4. 17%、8. 16%、11. 99%、23. 50%),通过20例健康个体验证了间接法得到的参考区间。结论运用间接法建立的参考区间同直接法比较差异无统计学意义,具有一定的参考价值,考虑到地区因素,间接法可用于地区实验室对该地区的人群建立适合自身的参考区间。     

大萼香茶菜甲素对白血病细胞株Kasumi-1体外作用的研究

目的：观察大萼香茶菜甲素（macrocalyxin A,MA）体外对Kasumi-1细胞增殖、分化、凋亡的作用。方法：以不同质量浓度的（4、8、12、16μg/mL）MA体外作用于Kasumi-1细胞,运用细胞计数、MTT比色法检测细胞生长抑制率;细胞形态学、细胞免疫表型CD11b、CD13检测研究细胞分化;细胞形态学、Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;DNA亚二倍体及Annexin-V/PI双标记检测细胞凋亡率;质谱分析技术检测用药前后细胞小分子蛋白变化。结果：MA对Kasumi-1细胞有明显的抑制增殖作用,呈现作用时间和剂量的量效关系。较低浓度MA可以诱导细胞分化,CD11b表达明显上升,且有剂量量效关系;高浓度促进细胞凋亡,细胞瑞氏染色后出现典型的凋亡小体,亚G1峰显著增加,Annexin-V＋/PI-表达升高,Hoechst33258荧光染色出现凋亡特征性改变,琼脂糖电泳观察到DNA＂梯状条带＂。质谱分析显示,药物作用组与空白组对照分析出现13个差异蛋白峰,质荷比集中在1053-8581之间。结论：MA能抑制Kasumi-1细胞增殖,促进细胞分化,诱导细胞凋亡的作用。     

慢性硬膜下血肿16例钻孔引流失败原因分析

慢性硬膜下血肿在临床中比较常见,约占颅内血肿的10%,占硬膜下血肿的25%[1].随着对该疾病认识的加深和治疗方法的不断改进,目前钻孔(单孔或双孔)引流已成为治疗慢性硬膜下血肿的首选办法[1].该方法安全、简单,疗效满意,住院日缩短,是一种较可靠的治疗手段.但临床上仍有一部分病人治疗效果不满意,需行开颅术或其他方法补救.我院自1993年9月～1998年9月共收治慢性硬膜下血肿97例,均采用钻孔引流术治疗,其中16例失败,占16.5%.现总结分析失败原因如下.     

Kartagener`s综合征：附9例报告及文献复习

本文报道9例Kartagener/s 综合征。其X 线特点是全内脏转位,支气管扩张,副鼻窦炎。文中着重讨论了本综合征的病因,认为本征是全身纤毛先天性缺乏轴丝臂引起。     

免疫组化检测Ki-67、 HER-2、 CD44、 CK20在膀胱非浸润性乳头状尿路上皮癌分级中的应用

目的探讨免疫组化检测Ki-67、HER-2、CD44、CK20在鉴别低级别和高级别非浸润性乳头状尿路上皮癌中的有效性。方法收集642例分级明确的乳头状尿路上皮癌及57例分级不确定的乳头状尿路上皮癌,根据有无高级别复发或进展,将分级不确定病例分为高危组及低危组,采用免疫组化EnVision法检测Ki-67、HER-2、CD44、CK20的表达。结果将Ki-67≥30%、HER-2全层表达、CD44表达减弱、CK20全层表达定义为阳性,分级明确病例中,低级别组Ki-67、HER-2、CD44、CK20的阳性率分别为12%、15%、28%、21%,高级别组分别为76%、70%、52%、67%,差异均有显著性(P0.001);分级不确定病例中,低危组Ki-67、HER-2、CD44、CK20的阳性率分别为40%、49%、28%、40%,高危组分别为70%、70%、20%、30%。结论免疫组化检测Ki-67、HER-2、CD44、CK20在低级别和高级别乳头状尿路上皮癌中的表达差异有显著性,可以用于乳头状尿路上皮癌分级的辅助诊断,其中Ki-67和HER-2在鉴别中有重要意义。     

大萼香茶菜甲素A通过抑制蛋白酶体诱导多发性骨髓瘤细胞株U266凋亡

本研究探讨大萼香茶菜甲素A（macrocalyxinA,MA）体外对多发性骨髓瘤细胞株蚤白酶体抑制作用及其诱导凋亡的分子机制。以不同浓度（2、4、8μgm1）的MA体外作用于U266细胞,用Hochest染色法和Annexin V／PI双染色观察MA诱导U266细胞凋亡作用;用Westernblot检测泛素、蛋白酶体19S亚基s6’亚单位和蛋白酶体20S亚基中β1、β1i、β2、β2i、β5、β5i亚单位,以及BAD、BCL-2、FAS、FAS-L、MAPK、PARP、Pro—caspase3、cleaved—caspase3蛋白的表达。结果表明,随着MA作用时间的延长和剂量的增加,Hoechst33258染色的细胞内出现致密颗粒或块状的荧光颗粒,AnnexinV＋／PI。细胞和总凋亡细胞（AnnexinV＋／PI-和AnnexinV＋／PI＋）增加;MA可使U266细胞内泛素化水平增高,抑制20S蛋白酶体亚单位β1i、β2、β5i、和19S蛋白酶体泛素识别亚基s6’表达。与此同时,BCL-2、MAPK、PARP、pro—caspase3表达随着药物作用浓度的增高而下调,BAD、FAS、FAS—L、cleaved—caspase3表达则增加。结论：大萼香茶菜甲素A具有抑制蛋白酶体的作用,线粒体凋亡和死亡受体途径有可能参与MA诱导细胞的凋亡。     

肝硬化合并肝癌及单纯肝癌患者免疫功能检测结果分析

目的探讨肝硬化合并肝癌患者及单纯肝癌患者细胞免疫及体液免疫功能的变化情况。方法选取肝硬化合并肝癌及单纯肝癌患者各40例,同期无肝病诊断史的健康人40名为对照。分别抽取对照者及肝癌患者外周血,以流式细胞术检测细胞免疫水平变化:T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)的值;免疫透射比浊法检测体液免疫(Ig A、Ig G、Ig M)的浓度。结果与对照组相比,两组肝癌患者CD3、CD4、CD4/CD8比值明显降低(P均0.05),而肝硬化合并肝癌CD3、CD4、CD4/CD8比值与单纯肝癌患者相比明显下降(P均0.05)。与对照组相比,两组肝癌患者Ig A、Ig G、Ig M明显上升,而肝硬化合并肝癌较单纯肝癌患者lg A、lg G、lg M值上升更为明显(P均0.05)。结论肝硬化合并肝癌患者免疫功能下降较单纯肝癌患者下降更为明显。因此,改善肝癌患者机体免疫功能,重建机体防御系统是很重要的治疗措施,同时监测机体免疫功能的改变,对估计预后、指导临床治疗有积极作用。