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目的制备HBc-HLA-A * 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A * 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽(乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96)的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A * 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A * 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^+供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A * 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。 相似文献
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目的观察慢性丙型肝炎患者在干扰素抗病毒治疗时,对白细胞介素含量的影响。方法对28例以IFN-a作抗病毒治疗的丙肝患者,采用ELISA法进行血清IL-2、IL-4及IL-12检测。结果三者在治疗前的含量分别为14.06±12.63pg/m1、57.89±61.78pg/m1和230.55±420.56pg/m1。治疗结束(第24周)时IL-2测值不变,IL-4测值下降至30.41±40.73pg/m1,IL-12上升至57.89±61.78pg/m1。随访时(第48周)三者恢复至抗病毒治疗前水平。结论采用外源性IFN-a进行抗病毒治疗时,慢性丙型肝炎患者血清IL-4及IL-12等与T淋巴细胞分化发育相关的细胞因子的含量出现一过性改变,这种变化是外源性IFN调节体内T淋巴细胞分化发育的证据之一。 相似文献
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以牛胶固素建立固相酶联免疫吸咐试验用于检测循环免疫复合物(CIC)。对228份流行性出血热、40份慢性肝炎及30份自身免疫性疾病患者血清标本进行检测,CIC检出率分别为80.26%、80.00%及86.66%,其相对平均含量分别为21.45±5.56mg/L、38.66±7.21mg/L及15.98±4.34mg/L。胶固素用于检测CIC不受DNA、内毒素及肝素等影响,试验方法简便、敏感是其优点。 相似文献
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对一组一年内一次以上ALT升高史的单采浆供者血清中多项乙肝与丙肝病毒感染标志进行了检查,并与本地区无ALT升高史供浆者进行比较。两组检测结果分别为抗HCV:14.03%和6.45%;抗HCV-IgM:3/8和2/13;HBsAg:2.82%和0.46%;抗HBs:32.39%和25.35%;抗HBc:45.07%和33.18%;其检出率前者均高于或显著高于后者,并与ALT升高次数有显著的伴随关系。 相似文献
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肝癌新标志物人宫颈癌基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备 总被引:2,自引:0,他引:2
目的构建表达截短型人宫颈癌基因(HCCR)-1蛋白的质粒,并进行原核表达、多克隆抗体制备。方法用逆转录聚合酶链反应法从HepG2细胞中扩增HCCR-1_(167-360) cDNA,将其克隆到原核表达载体pRSET-B上,在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS内进行诱导表达。用纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并采用酶联免疫吸附试验、Western blot及免疫组织化学检测抗体的灵敏度和特异性。结果成功地构建了表达HCCR-1(167-360)蛋白的质粒,原核表达后纯化得到了分子量约为2.70×10~4的目的蛋白,用之免疫BALB/c小鼠获得了高效价的特异性多克降抗体。结论所获得的重组HCCR-1_(167-360)蛋白纯度高,免疫原性强。获得的抗HCCR-1_(167-360)多克隆抗体有较高的效价和较好的特异性,为HCCR的临床检测和研究奠定了基础。 相似文献
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对60例抗-HCV阳性患者的家庭成员124人进行血清学检测,并收集40例乙肝患者的家庭成员83人为对照.结果丙肝组检出抗-HCV阳性的家庭成员9人,检出率7.3%.除去有供血史的抗-HCV阳性家庭成员,检出率为1.85%(2/108).乙肝组未检出抗-HCV阳性者.在单一丙肝家庭组中,家庭成员的HBV感染率为25.33%,而在HBV/HCV重叠感染和HBV感染组的家庭成员中,HBV的感染率为40.91%,故提示,HCV的家庭内聚集性感染的危险性远低于HBV,且母于垂直传插的危险性更低于夫妻间水平传播. 相似文献