硼酸钠活化p53诱导人肝癌细胞HepG2凋亡

目的观察硼酸钠(Borax)对人肝癌细胞株Hep G2的生长抑制和诱导凋亡的作用,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度硼酸钠对Hep G2活力的影响,DAPI染色荧光显微镜及Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测硼酸钠诱导细胞凋亡的情况。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测硼酸钠对肿瘤抑制因子p53及其下游基因Bcl-2、Bax、Noxa、Puma mRNA表达的影响。结果与对照组比较,硼酸钠各剂量组均能抑制Hep G2的活力(P<0.01);硼酸钠诱导Hep G2细胞凋亡,不同浓度硼酸钠(0、1.0、2.0、4.0 mmol/L)处理24 h后,晚期凋亡细胞百分比从2.57%分别增加至8.13%、10.4%、15.24%,差异有统计学意义(P<0.01);硼酸钠(4.0 mmol/L)分别作用6、12、24 h后,均可不同程度上调肿瘤抑制因子p53及促凋亡基因Bax、Noxa、Puma mRNA表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论硼酸钠抑制人肝癌细胞Hep G2的生长活性并诱导凋亡,其机制与p53的活化及其下游Bax、Noxa、Puma基因表达上调,以及Bcl-2表达下调有关。     

粘质沙雷菌苗治疗支气管哮喘的实验研究

目的:探讨粘质沙雷菌苗对支气管哮喘的免疫调节作用.方法:雄性大鼠40只,随机分为正常对照组(A组)、免疫组(B组)、哮喘模型组(C组)、常规哮喘模型组(D组),每组10只.A组仅注射PBS液,B、C、D组在皮内注射粘质沙雷菌苗.8周后,B组用PBS液代替,C组使用BCG免疫、D组未使用BCG免疫建立哮喘模型.对各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及细胞因子进行检测,并行方差分析.结果:B、C、D组在BALF中淋巴细胞多于正常对照组.B、C组较D组Th2型IL-4、IL-5分泌减少,细胞因子向Th1型明显偏移.肺组织HE染色后,C组见支气管狭窄较B组减轻.结论:粘质沙雷菌苗可明显促进Th1型IFN-γ的分泌,具有预防及治疗支气管哮喘的前景.     

经沉默免疫负调控基因技术处理的树突状细胞联同细胞毒性T淋巴细胞对HepG2细胞移植瘤的抑制作用

目的观察经沉默免疫负调控基因(iAPA)技术处理的树突状细胞(DC)联同细胞毒性T淋巴细胞(CTL)(iAPA-DC/CTL)对HepG2细胞移植瘤的抑制作用。方法利用人肝癌细胞系HepG2建立裸鼠皮下移植瘤模型,将12只裸鼠随机分为2组:生理盐水对照组(C组)和iAPA-DC/CTL组(DC组),每组6只,行iAPA-DC/CTL治疗4次(1周/次)后处死。实验期间观察各组裸鼠的肿瘤生长,测量肿瘤长短径并描绘肿瘤生长曲线,称量瘤重并计算抑瘤率,病理检测。两组间均数比较采用成组t检验。结果造模成功率为92.31%。C组和DC组肿瘤体积分别为:(697.69±143.99)、(485.64±188.75)mm3,DC组生长相对缓慢(t=2.28,P0.05);C组和DC组肿瘤重量分别为:(0.32±0.07)、(0.22±0.08)g,DC组肿瘤重量小于对照组(t=2.31,P0.05),抑瘤率为30.39%。肿瘤免疫组化染色后T淋巴细胞计数分别为:C组未见、DC组(39.74±5.11)个/高倍视野,DC组肿瘤内T细胞数多于对照组(t=19.05,P0.05)。结论 iAPA-DC/CTL能够有效抑制HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。     

甲状腺乳头状癌伴咽后淋巴结转移1例报道

<正>临床资料患者,男,20岁。7年前因甲状腺结节行右叶甲状腺大部切除术,病检为"甲状腺乳头状癌"。4年前发现右颈部数个肿物,切除较大者,病检为"甲状腺癌伴颈淋巴结转移",后其余肿物逐渐增大,伴吞咽困难、声音改变,发育未受影响。查体:咽右后壁见广基隆起,右颈下段见一肿物,大小约4 cm×2 cm,活动性差,甲状腺未及明显结节。颈部彩超、增强MR(图1)、CT(图2)提示:右叶甲状腺术后     

RNA干扰Oct4的表达对肝癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin在人肝癌组织及肝癌细胞系中的相互作用.方法 PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及其他相关基因在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织的表达差异.使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4的表达,实时荧光定量PCR法检测Wnt/β-catenin基因表达.检测RNAi后细胞迁移以及克隆形成能力.结果 肝癌患者的上述组织中,Oct4和β-catenin在癌内表达最高,癌旁次之,正常肝最低.使用SiRNA-Oct4沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b表现为与Oct4表达呈正相关,TCF3表达与Oct4呈负相关.RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降.结论 Oct4在肝癌组织内高表达而在正常肝细胞中的表达极低.RNAi后HepG2细胞的迁移能力、克隆形成能力均下降可能与Wnt/β-catenin通路功能减弱有关.

Abstract：

Objective To investigate the expression of Oct4 in liver cancer, and the interrelation of the Oct4 and Wnt/β-catenin genes in hepatocellular carcinoma( HCC) cell line HepG2. Methods RTPCR technique was used to detect the expression of Oct4 and β-Catenin in HCC specimens; RNAi was used to knock-down the expression of Oct4 in HepG2, and the change of Wnt/β-catenin related genes were detected by Real time-PCR. Results In HCC specimens, the expression of Oct4 and β-Catenin in tumor and cirrhotic liver tissues were stronger than normal liver tissues. In SiRNA Oct4 HepG2 cells, the expression of Oct4 was downregulated, and β-catenin as well as Wnt10b were in a positive correlation with Oct4, TCF3 was in negative correlation with Oct4. Clone formation and move ability of the HepG2 were downregulated. Conclusions The expression of Oct4 was higher in tumor tissues than in normal liver tissues. Silencing Oct4 by SiRNA-0ct4 in HepG2 resulted in decreased ability of clone formation and cell movement.     

膝关节镜检术的配合

我院从2002年7月开展关节镜检术以来成功地完成20余例手术治疗,现将手术护理体会介绍如下。1临床资料骨性关节炎16例,膝后交叉韧带撕裂2例,半月板损伤4例,膝关节置换术后关节镜检1例。2术前物品准备2.1常规关节镜器械包,关节镜配套装置包括:监视器、冷光源、转换器、离子刀、刨削系统主机、已熏蒸灭菌的各系统导线。2.2冲洗装置:一次性营养袋(3L),容量3000ml,充满生理盐水后悬挂在一定高度的点滴架上,下端与关节镜冲洗管相接,组成一个密闭的冲洗系统。2.3其他物品:龙胆紫(划线定位时用),驱、止血带,脑科手术贴膜,吸引器管1根,一次性围裙,透…     

从热疗历史探讨中医治疗肿瘤机理

中医用热疗治病历史悠久 ,灸法是其中之一 ,现代热疗应属于中医外治法的一种。通过剖析中西医热疗治肿瘤的历史 ,提出中医热疗治疗肿瘤的理论。并认为肿瘤为寒痰内凝所致 ,根据中医阴阳学说的理论阐述热疗治疗肿瘤的机理     

COPD患者运动康复治疗前后系统性炎症反应的随访研究

目的探讨运动康复对稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者全身炎性反应的影响。方法选择经肺功能测定属于GOLDⅡ～Ⅲ级的确诊COPD病例15例,接受共48周强化及非强化运动训练。在试验前、第一次强化训练后及完成48周运动训练后测定患者相关全身炎性反应指标TNF-α、IL-8、IL-6和IL-10。结果①15例COPD患者全部完成48周运动康复训练;②COPD患者首次强化运动后与运动前比较,血清TNF-α、IL-8、IL-6、IL-10水平无显著变化(P值均>0.05)。③COPD患者经过48周系统运动训练后与运动前比较,血清TNF-α、IL-8水平下降,IL-10水平升高,差异有显著性统计学意义(P值均<0.05﹚;血清IL-6水平无显著变化(P>0.05)。结论①系统运动训练有助于改善COPD患者的全身炎症反应水平;②单次强化运动训练对稳定期中重度COPD患者全身炎症反应无显著影响。     

周文波龙甲系列膏方分型调治中晚期恶性肿瘤

周文波教授认为中晚期癌症系阴阳失衡致正虚、气郁、血瘀、痰结、湿聚、热毒,提出临证宜调整"阴阳和合之势"与"阴阳离绝之势"达到"势均力敌"。强调恶性肿瘤为慢性病,病理变化缓慢、病程长,宜立足长期调理,带瘤生存。周文波教授创立"龙甲膏"系列膏方,攻补兼施,缓效长效,滋味甘美,服用方便,注重增强脾胃功能,更兼补虚之品,并加抗肿瘤中药,以蜂蜜作介质调制成煎膏,彰显膏方特点,适合长期服用。辨审阴阳,据证分5型:脾胃受损-健脾益气,龙甲膏1号;火毒内盛-清热解毒,龙甲膏2号;痰热郁结-清肺消痈,龙甲膏3号;症瘕积聚-软坚散结,龙甲膏4号;气滞胸中-行气开郁,龙甲膏5号。临证即可辨证型使用单一膏方,复杂证型常多膏方合用,有效稳定病灶,缓解临床症状,改善生存质量,延长生存期。附直肠中分化腺癌(累及浆膜层)术后气虚血瘀龙甲膏多膏方合用兼雷火灸调理验案1则。     

干细胞相关基因在肝癌细胞系中的表达

目的 了解Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin、Wnt5b等干细胞相关基因在4株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中的表达情况,并比较不同细胞系中各基因量的差异和对全反式维甲酸(tRA)的反应.方法 逆转录聚合酶链反应测定4株人肝癌细胞系中Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin、Wnt5b mRNA的表达,实时荧光定量PCR比较不同细胞中各基因量的差异以及对tRA的反应.单因素方差分析比较各基因在不同细胞系中的表达差异.结果 干细胞相关基因Oct4、Sox2、Nanog、SMO、β-Catenin和Wnt5b在4株人肝癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、HepG2、MHCC-97和正常人肝脏细胞系L02中有不同程度的表达(P<0.05);人肝癌细胞系HepG2和正常人肝脏细胞系L02对tRA的反应也存在明显差异(P<0.05).结论 干细胞相关基因在人肝癌细胞系中不同程度的表达,不同肝癌细胞系中这些基因表达有一定的差异,可能与其生物学特性不同有关,人肝癌细胞系HepG2中Oct4和Sox2的表达调控不同于胚胎干细胞.在肝癌细胞中可能存在着Oct4对于Wnt/β-catenin信号转导通路的调节作用.