酪氨酸激酶抑制剂达沙替尼抗黑色素瘤的体外研究

目的 探讨达沙替尼对小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外增殖、迁移和凋亡的影响.方法 采用MTT法检测不同浓度(3.125、6.250、12.500、25.000、50.000 μg/mL)达沙替尼在24、48 h对B16F10细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验和Transwell体外迁移实验检测达沙替尼对B16F10细胞迁移能力的影响;DAPI染色法观察给药后细胞核形态的变化;流式细胞仪检测达沙替尼对B16F10细胞凋亡率和细胞周期的影响;荧光显微镜观察达沙替尼对B16F10细胞线粒体膜电位的影响,并用荧光分光光度计检测Caspase 3和Caspase 9的活化程度.结果 达沙替尼对B16F10细胞的增殖有抑制作用,并呈浓度和时间依赖性.细胞划痕实验及Transwell体外迁移实验结果表明:达沙替尼能够有效地抑制B16F10细胞的迁移.分别以低、中、高3个浓度(6.250、12.500、25.000 μg/mL)的达沙替尼作用于B16F10细胞24 h后,细胞形态发生明显改变,核裂解,形成多个凋亡小体,凋亡率分别为(34.06±0.83)％、(50.24±1.66)％和(88.91±0.96)％,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).达沙替尼对B16F10细胞周期的影响较小,其中对G1期有微弱的阻滞作用.中浓度(12.500μg/mL)达沙替尼组能够引起B16F10细胞线粒体膜电位的降低,Caspase 3和Caspase 9活性的增加,表明达沙替尼可能是通过线粒体介导的Caspase通路引起细胞凋亡.结论 达沙替尼能有效地抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外增殖与迁移,诱导细胞凋亡,有望成为一种有效的抗黑色素瘤药物.     

新生儿多项免疫功能的观察

新生儿对病原微生物易感,且在感染后易扩散成败血症,一般归因于新生儿免疫系统成熟不足功能低下或先天免疫缺陷。为了研究新生儿感染的防治,我们检测32名正常足月新生儿静脉血,共检13     

低氧条件下RNA干扰阻断Notch3通路对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的 观察低氧条件下RNA干扰阻断Notch3对人肺腺癌A549细胞增殖的影响.方法 低氧条件下(1％O2)培养人肺腺癌A549细胞,以Notch3 siRNA转染A549细胞(Notch3 siRNA组),RT-PCR和Western blotting法分别检测A549细胞内Notch3及其信号通路下游基因HES1 mRNA和蛋白表达,MTT法检测转染24、48、72 h A549细胞的细胞活力;另设阴性对照组和空白对照组.结果 Notch3 siRNA转染A549细胞后,Notch3、HES1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P＜0.05);Notch3 siRNA转染后时间依赖性抑制A549细胞生长,Notch3 siRNA组转染48、72 h细胞活力与阴性对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 低氧条件下Notch3 siRNA转染人肺腺癌A549细胞可有效抑制Notch3及其下游靶基因HES1的表达,并抑制A549细胞生长.     

腹腔镜下广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术与传统开腹手术在早期子宫恶性肿瘤治疗中的比较

目的对比分析腹腔镜下广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术与传统开腹手术治疗子宫恶性肿瘤的近期效果及应用价值。方法对襄阳市中心医院2010年6月~2013年3月收治的43例早期子宫恶性肿瘤患者进行腹腔镜下广泛性全子宫切除术+盆腔淋巴结清扫术(腹腔镜组),并和同期43例经腹行广泛性全子宫切除术+盆腔淋巴结清扫术的早期子宫恶性肿瘤患者(开腹组)进行对照,比较两种术式的手术时间、术中出血量、清扫淋巴结数目、术中及术后并发症等。结果与开腹组相比,43例腹腔镜组的患者术中失血量少[(336.28±240.49)mL比(479.07±317.02)mL,P<0.05]、清除淋巴结数目多[(18.95±3.87)个比(17.02±3.89)个,P<0.05]、术后肛门排气时间短[(1.43±0.40)d比(2.29±0.44)d,P<0.05]、术后住院天数少[(9.63±1.93)d比(11.14±3.36)d,P<0.05]以及输血比例低[(16.28%)比(41.86%),P<0.05],差异有统计学意义;手术时间较开腹组长,但差异无统计学意义[(231.04±64.33)min比(209.30±45.07)min,P>0.05]。结论在早期子宫恶性肿瘤的手术方式中,与传统开腹手术相比,腹腔镜组具有同样的有效性和安全性,同时减少了术中出血量及术后并发症,减少了手术创伤,缩短了住院时间,术后患者恢复快,为妇科恶性肿瘤应用微创手术治疗提供了良好的应用前景。     

浙江省1999--2010年乙型流感病毒血凝素 和神经氨酸酶基因变化特征分析

目的 分析1999-2010年浙江省乙型流感病毒主要抗原基因血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的分子变异特征.方法 采集浙江省流感暴发疫情和哨点监测医院的流感样患者呼吸道标本,荧光定量RT-PCR快速检测和病毒分离,选取乙型流感病毒分离代表株进行HA和NA基因测序,采用生物信息学软件分析变异和进化.结果 共分析浙江省乙型流感病毒分离株34株,其中Victoria系20株,Yamagata系14株;1999-2010年间Victoria系毒株的HA1基因变异率4.5%,Yamagata系毒株为3.4%;2004年后分离的Victoria系毒株均为基因重配株,HA属于Victoria 系,而NA属于Yamagata系;2010年新型甲型HINI流感流行高峰过后,浙江省仍以乙型流感病毒流行为主,分离株与2009-2010年流感疫苗株B/Brisbane/60/2008接近,与往年乙型流感毒株相比HA和NA发生多个氨基酸位点变异.结论 1999-2010年浙江省乙型流感病毒流行株发生明显变异,基因重配和抗原漂移是病毒发生变异的主要机制.

Abstract：

Objective To Characterize the genetic diversity of hemagglutinin(HA)and neuraminidase(NA)of influenza B viruses isolated in Zhejiang province during 1999-2010.Methods Respiratory specimens were collected from patients with flu-like syndrome during the influenza outbreaks or from the hospitals which carrying out influenza surveillance project in Zhejiang province.Samples were detected by real-time RT-PCR and isolated for influenza virus.HA1 and NA genes of influenza B virus isolates were amplified and sequenced.Phylogenetic comparison and genetic diversity analysis were performed using the bioinformation software.Results A total of 34 influenza B viruses were evolved in this study including Victoria-like and Yamagata-like strains according to the results of the HI test.The mutation rate of Victoria-like HA1 gene was 4.5% and Yamagata-like HA1 gene was 3.4%,respectively.The Victoria-like influenza B isolates had appeared to be all re-assortants having a Victoria lincage HA and Yamagata lineage NA since 2004.The predominant type of influenza virus isolates in 2010 was also influenza B virus after the H1N1 flu pandemic in Zhejiang province.The isolated strains were antigenicaily and genetically similar to B/Brisbane/60/2008--the vaccine strain proposed for 2009-2010.Many difierences of HA1 and NA amino acids existed in the current isolates when compared to previous influenza B strains.Conclusion Significant diversity was generated among influcnza B virus isolated from 1999 to 2010 in Zhejiang province.Genetic re-assortment and antigenic drift seemed the main evolutionary mechanism on influenza B virus.     

兰州城区孕妇碘营养状况分析

目的：调查兰州城区孕妇碘营养状况,为这一地区孕妇科学补碘提供依据。方法随机选择2014年6月至2016年2月自愿在甘肃省妇幼保健院进行围产保健,并长期居住在兰州市城区的孕妇1127例,测定其空腹尿碘水平,并且分析尿碘水平是否受孕妇年龄、孕期及孕妇孕前体重指数的影响。结果兰州城区孕妇缺碘情况严重,缺碘率达70．19％。不同年龄孕妇的轻度碘缺乏率、碘充足率以及碘超足量率之间比较没有统计学差异（χ2值分别为1．05、0．69、3．93,均P＞0．05）。不同孕期孕妇的轻度碘缺乏率、碘充足率以及碘超足量率之间比较无统计学差异（χ2值分别为0．18、0．43、1．08,均P＞0．05）。不同孕前体重指数孕妇的轻度碘缺乏率、碘充足率以及碘超足量率之间比较无统计学差异（χ2值分别为1．89、0．57、7．93,均P＞0．05）。结论应当加强这一地区孕妇的碘营养状况监测及科学补碘,以提高人口质量。     

创新型实验中心建设在护理教学中的作用探讨

目的：探讨创新型实验中心的建设以及在护理教学中的作用。方法：分析传统护理学实验室基础条件、教育理念以及管理体系现状,根据护理学专业发展的特点,结合临床实际需求,提出创新型实验中心建设的方法和途径。结果：创新型实验中心的建设应从护理学实验中心的硬件设施、管理体系、实验项目、教学方法及师资队伍等方面进行改革、创新。结论：创新型实验中心的建设使护理学实验教学质量提高,可以促进护理教学的发展。     

浙江省近年来流感病毒株的抗原性及人群免疫状况分析

目的 为了解1998－1999年浙江省分离的流感病毒株的抗原性以及杭州市区人群对各类流感病毒的体液免疫力。方法 我们采用常规大量半加敏双向血凝抑制（HI）试验检测相应毒株的交叉HI滴度并计算相应的抗原比。用微量半加敏HI试验检测人群流感HI抗体滴度。结果 浙江省近2年来共分离到12株流感病毒代表株,其中11株为甲3（H3N2）亚型,1株为乙型。A3／浙防／10／98毒株与A3／汉防／359／95、A3悉尼／5／97、A3／沪防／1／98毒株的抗原比分别为1．4、4．0和16．0;A3／浙防／7／99毒株与上述3种标准毒株的抗原比分别为22．6、2．0和1．4。B／浙防／31／99毒株与B／京防／172／97和B／深防／12／97毒株的单向HI滴度分别为≥10240和40。杭州市区人群各型流感HI抗体阳性率为62．4％－100．0％,GMT在11．67－275．49之间。提示,除A3／浙防／10／98毒株抗原性类似于A3／汉防/359/95外,其余甲3亚型毒株的抗原性均类似于A3／沪防／1／98病毒。B型毒株抗原性属于巴拿马类病毒。结论 杭州市区人群对甲3亚型和B型巴拿马类毒株普遍具有HI抗体免疫力。     

SARS病毒分离与病原学研究

目的 从浙江省首发的3例临床诊断SARS患者样本中分离SAPS病毒，并进行病毒核酸、免疫学检测和形态学观察。方法 采集3例SARS患者发病期的含漱液，接种Veto、Veto-E6、RD、Hep-2、MK单层细胞，观察细胞病变、免疫荧光法检测病毒抗原和RT-PCR法检测病毒核酸。抗原阳性的培养物作电镜形态学观察。结果 从3例患者的2份含漱液中分离到2株SAPS病毒，并发现Vero和RD两种细胞对SARS病毒敏感。在接种病毒后的3天左右可出现典型的细胞病变，两株病毒已在Vero和RD细胞上传代5代；在电镜下观察到SAPS病毒颗粒。结论 分离的2株病毒确定为SARS冠状病毒。并能在Veto细胞上稳定传代；建立的间接免疫荧光技术可用于SAPS实验室诊断及流行病学调查等。     

兰州城区孕妇甲状腺功能现况调查

目的：了解兰州城区孕妇甲状腺功能的现状及其影响因素。方法随机选择2014年6月至2016年2月自愿在甘肃省妇幼保健院进行围产保健,并长期居住在兰州市城区的不同孕期孕妇1127例,测定其空腹静脉血甲状腺功能,包括促甲状腺激素（TSH）、游离甲状腺素（FT4）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）水平及空腹尿碘值。分析甲状腺功能与孕妇年龄、孕周及孕前体质量指数的关系,以及尿碘值与甲状腺功能是否存在联系,各项甲状腺功能指标之间是否存在联系。结果不同年龄孕妇的TSH值之间比较有统计学差异（F＝3．202,P＝0．007）,FT4值之间比较有统计学差异（F＝2．508,P＝0．029）,TPOAb值之间比较无统计学差异（H＝2．268,P＝0．811）。不同孕期孕妇的TSH值之间比较有统计学差异（F＝4．173,P＝0．016）,FT4值之间比较有统计学差异（F＝20．290,P＝0．000）,TPOAb值之间比较无统计学差异（H＝0．136,P＝0．934）。不同孕前体重指数孕妇的TSH值之间比较没有统计学差异（F＝0．936,P＝0．423）,FT4值之间比较无统计学差异（F＝2．309,P＝0．075）,TPOAb值之间比较有统计学差异（H＝12．333,P＝0．006）。尿碘值与TSH值负相关（r＝－0．070,P＝0．016）;尿碘值与FT4值正相关（r＝0．187, P＝0．000）;尿碘值与TPOAb值负相关（r＝－0．066,P＝0．020）。 TSH值与TPOAb值之间正相关（r＝0．073,P＝0．014）,FT4值与TPOAb值之间无相关性（r＝－0．016,P＝0．597）。结论兰州城区孕妇的甲状腺功能与妊娠年龄、孕期、孕前体重指数、碘营养状况之间存在联系。应当加强这一地区孕妇尿碘及甲状腺功能指标的监测,为提高人口质量提拱了新的思路。