胃泌素促进胃癌细胞增殖和血管生成拟态形成

目的 探讨胃泌素对胃癌细胞血管生成拟态(VM)的作用及其分子机制.方法 应用免疫细胞化学检测SGC-7901、AGS细胞中胃泌素受体(CCK-BR);用终质量浓度为10、100 nmol/L胃泌素处理SGC-7901和AGS 72 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达、酶联免疫吸附实验检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)的分泌水平;三维培养SGC-7901和AGS,用10、100 nmol/L胃泌素处理,显微镜下观察24、48、72 h VM形成,计数72 h VM形成数;软琼脂克隆形成实验检测细胞培养3周的克隆形成率.结果 SGC-7901和AGS细胞表达CCK-BR;经10、100 nmol/L的胃泌素处理后,SGC-7901和AGS的细胞增殖率和克隆形成率高于对照组,细胞的环形、半环形VM形成数也高于对照组(P＜0.01);细胞中HIF-1α的表达量比对照组上调了5.39、11.00(SGC-7901)、4.12和6.06倍(AGS);分泌性VEGF的浓度也比对照组增高[298、339 μg/mg蛋白(SGC-7901)及168和281 μg/mg蛋白(AGS),p＜0.01].结论 通过胃泌素-CCK-BR-HIF-1 α-VEGF构成的信号传递链,胃泌素促进胃癌细胞的体外增殖及VM的形成.     

标本因素对血清前列腺特异抗原检测结果的影响

用ＥＬＩＳＡ法检测了２０例溶血前后血清标本，２０例Ｃ℃存放１周前后血清标本及２０例一２０℃存放１月前后血清标本中前列腺特异抗原含量，结果表明，标本溶血及－２０℃存放１月对检测结果无影响（Ｐ〉０．０５），而４℃存放１周可使检测结果增高（Ｐ〈０．００１）。因此，建议血清ＰＳＡ的检测应立即分离血清，－２０℃存放，１月内检测。     

血清肌酸激酶同功酶BB和神经元特异性烯醇酶用于小细胞肺癌的临床价值

用层析荧光法和ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测了２０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ），３０例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ），２５例良性肺疾病和３０例正常对照者血清中肌酸激酶同功酶ＢＢ（ＣＫ－ＢＢ）和神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）。结果表明：ＳＣＬＣ组血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ含量高于其它３组（Ｐ＜０．００１）；４组血清的ＣＫ－ＢＢ均值分别为３０．２、８．４、６．３和４．３ＩＵ／Ｌ，ＮＳＥ分别为５２．２、１２．７、１０．３、和９．２ｎｇ／ｍｌ．以９．５ＩＵ／Ｌ（ＣＫ－ＢＢ）和２０．８ｎｇ／ｍｌ（ＮＳＥ）为正常值上限，ＳＣＬＣ组的阳性率分别是７０％（ＣＫ－ＢＢ）和８０％（ＮＳＥ），高于ＮＳＣＬＣ组（Ｐ＜０．００５）。ＳＣＬＣ血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ显著相关（ｒ＝０．７９３４，Ｐ＜０．００１），联合检测可使敏感性提高到９０％，特异性提高到９４％。因此，作者认为血清ＣＫ－ＢＢ和ＮＳＥ可以作为ＳＣＬＣ的诊断指标，联合检测可提高临床应用价值。     

幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠胃组织NLRP3炎症小体相关因子和自噬相关蛋白表达分析

目的 探究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染对蒙古沙鼠胃组织中NLRP3炎症小体相关因子和自噬相关蛋白表达的影响。方法 采用Hp国际标准株11637灌胃处理蒙古沙鼠,隔天一次,共5次,以相同体积无菌脑心浸液肉汤灌胃的沙鼠作为对照组。于感染第3、6、12和24个月后处死沙鼠,取胃黏膜组织并切片,HE染色后作病理学检查;免疫组织化学染色观察Hp定植;试剂盒法检测胃组织NLRP3炎症小体及其相关因子IL-18、IL-β和自噬相关蛋白P62、LC3的表达。结果 Hp感染蒙古沙鼠胃组织检测到Hp的定植,HE染色检查显示不同时间感染组沙鼠胃黏膜均出现糜烂黏膜下层组织水肿、黏膜局部浅表糜烂和淋巴浆细胞浸润等不同程度的慢性胃炎病理改变,感染24月部分区域出现非典型增生甚至癌变。对照组沙鼠均无Hp定植及组织学病变。与未感染对照组比较,Hp感染蒙古沙鼠胃组织中NLRP3、IL-18、IL-1β和LC3、P62的表达水平均显著升高(均P<0.05);其中NLRP3、IL-18、LC3表达3到12个月随着Hp感染时间的延长呈升趋势,12到24个月呈下降趋势。IL-1β表达无显...     

胃泌素对胃癌细胞EMT和Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响

目的探讨高表达胃泌素(gastrin)对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响及可能机制。方法用gastrin过表达质粒pcDNA3-gastrin及空载体pcDNA3.1转染胃癌细胞SGC-7901、MKN45,48 h后收集细胞蛋白,Western印迹检测鉴定gastrin表达,检测EMT相关标志物E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin、Snail及wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路相关基因wnt3α、β-catenin、c-myc的蛋白表达变化。结果在SGC-7901、MKN45细胞中成功过表达gastrin。与pcDNA3.1空载体转染组相比,pcDNA3.1-gastrin转染SGC-7901、MKN45细胞中上皮标志蛋白E-cadherin表达下调,间质标志蛋白N-cadherin、Snail表达上调,差异有统计学意义(P<0.05);同时Wnt/β-catenin通路蛋白相关蛋白wnt3α、β-catenin及其下游基因c-myc的表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达gastrin能够激活Wnt/β-catenin信号通路和促进胃癌细胞SGC-7901和MKN45发生EMT。     

胃泌素促进胃癌细胞的迁移和侵袭

 目的：研究胃泌素在胃癌细胞迁移和侵袭中的作用。方法：用细胞划痕实验、Transwell小室迁移和侵袭实验检测10 nmol/L和100 nmol/L胃泌素处理后胃癌细胞AGS和SGC-7901迁移和侵袭能力的变化, MTT法检测细胞增殖能力, ELISA法检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2（MMP-2）的含量。结果：10 nmol/L和100 nmol/L胃泌素处理胃癌细胞后,细胞迁移和侵袭能力增强。对照组、10 nmol/L和100 nmol/L胃泌素组AGS细胞平均迁移数分别为56.0、88.1和106.4 /view,SGC-7901细胞平均迁移数分别为52.8、91.0和113.3 /view, AGS细胞平均侵袭数分别为78.4、118.7和141.6 /view,SGC-7901细胞平均侵袭数分别为87.3、124.6和147.4/view（均P<0.01）;100 nmol/L胃泌素组细胞迁移和侵袭能力均高于10 nmol/L组（P<0.05）;胃泌素处理后细胞的增殖率及MMP-2的分泌量也显著增加（P<0.05）。结论：胃泌素通过促进MMP-2的分泌以剂量依赖的方式增强胃癌细胞的迁移和侵袭能力,可能是体内胃癌细胞增殖、侵袭和转移的重要机制之一。     

幽门螺杆菌NCTC11637、NCTC11639毒素相关基因A的克隆、序列分析及真核表达载体的构建

[摘要]目的：克隆幽门螺杆菌毒素相关基因A（cytotoxin-associated gene A,CagA）全长序列并进行序列分析,构建表达CagA的真核表达载体,研究CagA调控胃泌素基因的表达。     

transgelin基因在幽门螺杆菌感染胃癌细胞及人胃癌组织中的表达

目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染胃癌细胞及人胃癌、淋巴结组织中转凝蛋白基因(transgelin)的表达水平,探讨HP感染、transgelin基因与胃癌发生、发展的相关机制。方法用HP感染胃癌细胞系AGS和SGC-7901,同时收集胃癌患者手术切除的胃癌组织、切缘组织和淋巴结组织,提取及纯化总RNA。实时荧光定量PCR检测transgelin mRNA的表达水平,分析其与临床病理参数的关系。结果 transgelin mRNA在HP感染的AGS、SGC-7901细胞中的表达量增加,分别为对照细胞的11.39倍(t=30.025,P=0.000)、3.41倍(t=5.677,P=0.005);transgelin mRNA在胃癌组织、淋巴结组织中的表达增加,分别是切缘组织的6.48倍(t=2.290,P=0.026)、2.64倍(t=2.043,P=0.046);Ⅳ期胃癌组织transgelin mRNA表达量增加,是Ⅰ~Ⅱ期的2.32倍(t=2.111,P=0.049);淋巴结转移组是无淋巴结转移组的2.93倍(t=2.123,P=0.043)。结论HP可上调transgelin基因的表达,transgelin基因可能参与胃癌的发生、发展,且与p TNM分期及淋巴结转移相关。     

血清神经原特异性烯醇酶和胃泌素用于肺癌的临床价值

 目的 探讨血清神经原特异性烯醇酶（NSE） 和胃泌素用于肺癌的临床价值。方法 采用ABC-ELISA 和放免法检测30 例正常对照、25 例良性肺疾病、55 例非小细胞肺癌（NSCLC） 和15 例小细胞肺癌（SCLC） 血清NSE和胃泌素浓度。结果 血清NSE和胃泌素浓度在4 组间有显着性差异（ P< 0-001）.NSE 诊断SCLC 的敏感性、特异性和准确性是80 、88 和86 % ;胃泌素诊断NSCLC分别是69 、65 和60 % 治疗后,SCLC 组血清NSE 和胃泌素均显着下降（ P< 0-001） ,而NSCLC组仅有胃泌素降低（ P< 0-001）。结论 NSE 主要用于SCLC 的辅助诊断、术前组织学分型及疗效监测,而胃泌素用于NSCLC。     

血清神经元特异性烯醇酶和胃泌素用于肺癌的临床价值

检测３０例正常对照、２５例良性肺疾病、５５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）和１５例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）患者血清神经元特异性烯醇酶（ＮＳＥ）和胃泌素及其在治疗前后的动态变化，结果显示，血清ＮＳＥ和胃泌素在４组间差异有极显著性（Ｐ＜０００１），ＮＳＥ均值分别为８２２、１０８４、１４６４和３２００μｇ／Ｌ，胃泌素均值分别为５９４７、８２００、２２１５３和３５６８６ｎｇ／Ｌ。以２０３μｇ／Ｌ（ＮＳＥ）和８１４ｎｇ／Ｌ（胃泌素）为正常参考值上限，ＮＳＥ阳性率分别是８０％（ＳＣＬＣ）和１４５４％（ＮＳＣＬＣ），胃泌素分别是８０％（ＳＣＬＣ）和６３６３％（ＮＳＣＬＣ）。肺癌治疗后血清ＮＳＥ和胃泌素在ＳＣＬＣ组均显著下降（Ｐ＜０００１），而ＮＳＣＬＣ组仅有胃泌素降低（Ｐ＜０００１）。因此，ＮＳＥ主要用于ＳＣＬＣ的诊断、组织学分型及疗效监测，而胃泌素可以用于各型肺癌，两者联合可以提高临床应用价值。