酶竞争性抑制剂对固定化青霉素酰化酶的影响

利用酶竞争性抑制剂与酶活性中心具有特异性亲和作用，将青霉素酰化酶和一定浓度苯乙酸混合，投入表面修饰环氧基团的磁性微球进行酶固定化。结果表明，在碱性缓冲液系统中，磁性微球带负电荷；加入苯乙酸后，固定化酶活力比对照组提高了13．6％。溶液酶Km为1．188×10^-5mol／L，固定化酶Km＇为5．879×10^-4mol／L，苯乙酸竞争性Ki为2.685×10^-4mol／L。     

益康唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究

目的为了研究益康唑(Econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI-3凋亡的机制。方法利用Annexin-V/PI双染实验测定细胞凋亡,Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i),并抽取WEHI-3 细胞内质网部分蛋白,利用Western blot测定Caspase-7、Caspase-12的蛋白表达。结果Econazole作用后WEHI-3出现典型的凋亡改变。细胞内游离[Ca2 ]i较对照明显升高,Western blot结果显示随着细胞内钙离子浓度的提高,Caspase-12和Caspase-7表达逐渐增加。结论Econazole能诱导WEHI-3细胞凋亡,Caspase-12在此过程中起重要作用。     

树突状细胞与细胞因子诱导的杀伤细胞共培养细胞过继免疫治疗儿童急性白血病

目的观察树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养细胞(DC-CIK)过继免疫治疗儿童急性白血病的作用及安全性。方法回顾分析2005年5月-2011年5月本院确诊经联合化疗后达完全缓解的47例急性白血病患儿临床资料,观察DC-CIK过继免疫治疗过程中细胞采集、细胞培养、细胞回输的安全性,随访过程中通过定期检测其血常规、肝肾功能、心电图等来评估其远期安全性;DC-CIK过继免疫治疗后通过定期进行患儿骨髓细胞学、微小残留病(MRD)检测,初步评判其疗效。结果47例患儿接受DC-CIK治疗后44例患儿持续完全缓解(CCR),CCR率达93.62%;治疗前MRD阳性的9例患儿,8例治疗后转阴。47例患儿共接受DC-CIK过继免疫治疗61例次,不良反应轻微,单个核细胞采集术后局部有轻微疼痛,且均在术后2 h左右自行缓解。细胞培养过程中进行3次病原体检测,仅1例次培养出毛霉菌。细胞回输过程中23例次出现发热,10例次出现皮疹。中位随访41(5～72)个月未见心、肝、肾等重要器官功能损害,未见感染性疾病、第二肿瘤等的发生。结论 DC-CIK过继免疫治疗儿童急性白血病操作流程简便易行、安全性好,获得了满意疗效。