南通地区乙型肝炎病毒基因型分布特点

目的了解南通地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布情况及其临床特点。方法选取南通地区HBV感染者共125例,其中无症状携带者(ASC)31例,慢性乙型肝炎(CHB)46例,乙型肝炎肝硬化(HLC)23例,原发性肝细胞癌(HCC)25例。应用实时荧光PCR试剂盒进行血清HBV基因分型测定。结果对HBV-DNA阳性的116例标本进行HBV基因分型,其中B基因型35例(30.17%),C基因型76例(65.52%),B+C混合基因型5例(4.31%),未检出非B非C型。其中ASC组HBV-DNA定量阳性患者中以B型为主(86.36%);而其余3组感染者中以C型基因居多:CHB患者中C型为80.43%,HLC患者中C型为69.57%,HCC患者中C型为80%。结论南通地区HBV基因型主要以C型为主,其次为B型。HBV基因C型与B型各有显著的临床特点,可为临床诊断及指导临床抗乙肝病毒药物治疗提供依据。     

丙型肝炎病毒血清型基因型与抗HCV抗体类别的关系

采用EIA法检测丙型肝炎患者血清IgG、IgM、IgA类抗HCV抗体;以丙型肝炎病毒核心区2个型特异性合成多肽对抗HCV进行血清学分型,对已确定血清型的血清进行5′非编码区逆转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR)和限制性片段长度多态性(RFlp)分析以确定基因型.结果:23例HCV RNA阳性的丙型肝炎患者中19例抗HCV阳性(IgG、IgM、IgA三者中至少一种阳性);12例可行血清学分型,其中1型8例,2型2例,1、2混合型2例;11例未能分型.12例已知血清型的HCV中,基因型Ⅰ型9例,Ⅱ型2例,Ⅰ、Ⅱ混合型1例.两种分型方法一致率为91.7%(11/12).提示:血清学分型具有一定应用价值,联合IgA、IgM抗HCV检测可提高血清学分型的检出率.     

57例糖尿病足患者的临床分析

[目的]探讨糖尿病足的治疗方法。[方法]对海南医学院附属医院内分泌科收治的57例糖尿病足患者的临床资料进行回顾性分析。[结果]57例患者给予良好的血糖控制、抗感染、改善循环、营养神经、积极有效的局部处理和对症支持等治疗,13例愈合,41例好转(其中3例干性坏疽、1例骨髓炎转骨科行截肢或截趾术),3例未愈。[结论]糖尿病足治疗是综合性治疗,全身治疗的同时配合积极的局部处理效果明显。     

2型糖尿病大血管病变患者脂代谢紊乱与ApoE基因多态性及中医证候的研究

目的:研究2型糖尿病大血管病变患者脂质谱与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性及中医证候的相关性。方法:60例T2DM大血管病变患者按中医证候分为阴虚燥热、气阴两虚、阴阳两虚3组,每组20例,另设正常对照组20例,用PCR-RFLP对ApoE进行分析,并对患者脂质谱进行分析。结果:糖尿病各组患者血脂较正常对照组均显著改变(P<0.01),其中气阴两虚组患者的TC、LDL-C较阴虚燥热、阴阳两虚组有极显著升高(P<0.05,P<0.01)。等位基因E2组的TG较E3、E4组有极显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:2型糖尿病大血管病变患者的血脂随着病情的加重和病程的延长存在不同程度的异常,各种中医证候之间脂代谢的差异与ApoE基因的多态性有一定关系。     

2型糖尿病大血管病变患者中医证候特点的研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)大血管并发症患者中医证候特点。方法将60例T2DM大血管病变患者按中医证候分为阴虚燥热、气阴两虚、阴阳两虚3组,观察舌象和脉象以及病程和中医证候之间的关系。结果 T2DM大血管病变患者发病年龄50~70岁以阴虚燥热者为多,70岁以上以阴阳两虚为主。病程各组之间无显著性差异,3~5 a者居多。阴虚燥热组以舌红、苔黄燥、脉弦数为主,气阴两虚组以舌红、苔少、脉濡细数为主,阴阳两虚组以舌淡胖、苔白腻、沉迟脉细为主。结论 T2DM大血管病变患者的舌象脉象均符合中医基础理论对证候的认识。用客观的方法分析中医证候之间的区别与联系,可以更好地认识中医证候的本质。     

实时荧光定量PCR测定TRAIL mRNA质粒标准品的构建

目的 构建pGEM-T-TRAIL重组质粒标准品为临床检测TRAIL mRNA水平奠定基础.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,提取血清HBV DNA阳性乙肝患者的外周血单个核细胞总RNA,逆转录合成cDNA,扩增目的 片断,纯化PCR产物与pGEM-T Easy载体连接,转化感受态菌DH - 5α,经蓝白斑筛选,PCR鉴定阳性克隆,并进一步测序分析.提取重组质粒测定DNA浓度后,10倍倍比稀释,建立TRAIL质粒标准品.结果 扩增目的 片段长度为110 bp,测序结果证实所构建的质粒序列与NCBI基因库TRAIL序列性一致.结论 成功构建了实时荧光定量PCR 测定TRAIL mRNA质粒标准品.     

应用磁珠法和巢式PCR检测血清HIV1RNA的临床研究

目的探讨磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1RNA在HIV感染诊断中的应用价值。方法对HIV1 2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1 2抗体阳性的AIDS患者、HIV携带者、健康体验者采用上述方法检测血清HIV1RNA。结果24例HIV1 2抗体阴性者血清中未检出HIV1RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1RNA呈阳性,2例健康体检者血清中未检出HIV1RNA。结论磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1RNA及排除假阳性。     

慢性乙型肝炎患者外周血中共价闭合环状DNA的检测

目的 研究慢性乙型肝炎患者外周血中HBVcccDNA的存在状况.方法 采用荧光聚合酶链反应(PCR)法、PCR-微流芯片法对22例慢性乙型肝炎患者外周血血清、白细胞中HBVcccDNA进行平行检测,同时检测其血清HBV DNA含量、HBV M并进行相关性分析,以2例急性戊型肝炎、2例慢性丙型肝炎为对照.结果 22例慢性乙型肝炎患者外周血血清、白细胞中HBVcccDNA分别检出10例和7例,其中2例阳性PCR产物经基因测序得到验证;血清HBV DNA阳性者16例;HBVcccDNA阳性者血清HBV DNA均阳性;对照组上述指标均阴性.结论 慢性乙型肝炎患者外周血血清、白细胞中存在HBVcccDNA;外周血HBVcccDNA与血清HBV DNA存在一定关联.     

竞争PCR-微流芯片法检测血清HBV-DNA含量

目的 评价微流芯片法检测乙型肝炎病毒(HBV)基因的竞争PCR扩增产物含量的准确性.方法 通过竞争PCR-微流芯片法的重复性试验、稀释试验及与竞争PCR-微孔板杂交法、荧光PCR法的比较,判断HBV-DNA检测的准确性.结果 竞争PCR-微流芯片法重复性、稀释试验的线性相关性较好;检测线性范围高于竞争PCR-微孔板杂交法,竞争PCR内对照的含量对检测结果有一定影响;与荧光PCR法检测有较好的一致性.结论 竞争PCR-微流芯片法是临床检测HBV-DNA含量可行的一种方法.     

两种检测血清HIV1 RNA方法的对比研究

目的 探讨Magene磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1 RNA在诊断人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中的应用价值.方法 对HIV1 2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1 2抗体阳性的艾滋病(AIDS)患者、HIV携带者、健康体检者采用上述方法检测血清HIV1 RNA.结果 32例HIV1 2抗体阴性者血清中未检出HIV1 RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1 RNA呈阳性,2例单一酶联免疫吸附试验检测血清中HIV1 2抗体阳性者和10例健康体检者未检出HIV1 RNA.结论 磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1 RNA及排除假阳性.