乳腺癌组织IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2的表达与相关性

目的:研究胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ, IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(insuline-like growth factor-Ⅰ receptor, IGF-ⅠR)和胰岛素样生长因子结合蛋白-2(insulin-like growth factor binding protein-2, IGFBP-2)在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌临床病理学特征的关系及其在乳腺癌发病过程中的作用机制.方法:免疫组织化学SP法检测42例乳腺癌患者肿瘤组织和42例癌旁3 cm外正常乳腺组织中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2的表达水平.结果:IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2在乳腺癌组织中的表达率显著高于在正常乳腺组织中的表达,P＜0.05.IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2原发灶≤2 cm的乳腺癌中的表达均低于原发灶＞2 cm的肿瘤,P＜0.05;在有淋巴结转移乳腺癌中的表达显著高于无淋巴结转移乳腺癌,P＜0.05.IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2在乳腺癌组织中的表达相互具有明显正相关性,P＜0.01.结论:IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR和IGFBP-2的过度表达在乳腺癌原发灶的发展和侵袭转移可能起重要作用,IGFBP-2水平升高可能增强IGF-Ⅰ与IGF-ⅠR的结合产生活性促进肿瘤细胞的增殖从而与乳腺癌发生的生物学行为和浸润转移有关.

Abstract：

OBJECTIVE:To study the expressions of IGF-Ⅰ, IGF-ⅠR and IGFBP-2 in breast cancer tissues and the correlation among them and with the clinical pathological characteristics, and explore the mechanisms of development of breast cancer. METHODS: The expressions of IGF-Ⅰ, IGF-ⅠR and IGFBP-2 in each of the 42 cases of breast carcinomas as well as normal tissues 3 cm off the tumor region were determined by the immunohistochemical technique (SP method). RESULTS: The positive expression rate of IGFBP-2 in breast carcinomas was significantly higher than that in normal breast tissues, P＜0.05. When breast cancers with primary sized ≤2 cm compared with that of ＞2 cm, the positive percentages of IGF-Ⅰ, IGF-ⅠR and IGFBP-2 in the former were significantly lower than those in the latter, P＜0.05. In addition, the positive percentages of them in breast cancers with metastasis in lymph node were higher than those of absence of metastasis in lymph node, P＜0.05. The expressions of IGF-Ⅰ, IGF-ⅠR and IGFBP-2 in breast tumor tissues showed a significant positive correlation (P<0.01). CONCLUSIONS: The excessive expressions of IGF-Ⅰ, IGF-ⅠR and IGFBP-2 may be the vital role in primary lesion development, invasion and metastasis of breast cancer. The increased IGFBP-2 level can import IGF-Ⅰ into IGF-ⅠR to promote tumor cell proliferation, which suggests that the three factors may cause biological actions and infiltration and metastasis of breast cancer.     

中国北京市区健康人群白细胞介素6基因启动子区基因的多态性及与亚裔和高加索人群的比较

目的:动脉硬化、老年痴呆、糖尿病、骨质疏松等均有循环中炎症介质持续升高的表现。观察北京市区健康人循环中炎症介质白细胞介素6启动子区基因多态性与循环中白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原的关系,并评价白细胞介素6基因多态性的种族差异。方法:采用随机整群抽样的方法于2003-03/2004-03筛选中国北京地区30岁以上自我评价健康的汉族居民662人,男365人,女297人。通过身体检查及血液学及血生化学检测,了解调查对象健康状况;测定入选人群白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原;检测白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A),572(G/C)基因多态性,观察其与循环中炎症指标白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原的关系。结果:按意向处理分析,进入结果分析662人。①入选健康成人662人,174位均为GG型,未发现GC和CC型;597位GG型占99.24%,仅有5人为GA型,未发现CC型;572位存在GG,CC,GC3种基因型,G和C等位基因频率分别为0.22和0.78,基因型和等位基因频率均无性别差异。②G等位基因(GG+GC型)携带者循环中白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原水平明显高于CC基因型犤(2.91±2.21)ng/L,(2.43±2.31)mg/L,(3.05±0.71)g/L;(2.44±1.47)ng/L,(1.41±1.57)mg/L,(2.70±0.64)g/L,P=0.03,0.01,0.01犦。③中国北京地区汉族人群白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A)、572(G/C)的基因型分布与日本、韩国亚裔人群相似(174位和597位几乎均为GG型,572位G等位基因频率分别为0.28,0.23,0.25,P>0.05),而明显不同于德国、瑞典高加索人群(174位存在GG,GC,CC,597位存在GG,GA,AA3种基因型,572位G等位基因频率分别为0.95,0.93,P<0.01)。结论:白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A),572(G/C)基因多态性存在种族差异,亚裔人群不存在174(G/C),597(G/A)基因多态性,572位基因型频率也明显不同于高加索人群。572(G/C)位存在基因多态性并影响循环中白细胞介素6的表达从而影响机体炎症状态,G等位基因为少见基因,其携带者白细胞介素6和超敏C反应蛋白水平明显高于CC型个体。     

中药蛇床子的粉末X衍射分析

对３种及不同产地１２个样品的中药蛇床子进行了粉末Ｘ衍射分析,结果表明：不同产地蛇床子的衍射图说 其几何拓扑性质大致可分为４类相似衍射模糊图形,与ＴＬＣ分析的基本一致,为中药鉴别提供了新的谱学分析依据。     

正交试验优选鲜地黄提取工艺

目的:采用正交试验法,以梓醇、地黄苷D、益母草苷及固形物含量为评价指标,优选地黄提取物最佳提取工艺.方法:采用单因素平行比较试验与正交试验相结合的方法进行提取工艺的优选.采用RP-HPLC法进行含量测定.结果:确定了最佳提取工艺.即6倍量20%乙醇与地黄破碎浸提3次.结论:优选出的工艺综合全面、科学合理.     

心力衰竭大鼠肺脏α_(1A)及β_1、β_2肾上腺素受体表达的改变

目的研究慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)时肺脏α1A-肾上腺素受体(α1A-AR)和β1、β2肾上腺素受体(β-AR)表达水平的变化。方法结扎Wistar大鼠左冠状动脉前降支制作心肌梗死后心力衰竭模型,模型成功后采用数字表法随机分为正常对照组、假手术组和心力衰竭模型组。取大鼠肺组织,采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分别测定3组的α1A-AR和β1、β2-AR蛋白表达水平。结果心力衰竭模型组与假手术组相比,α1A-AR、β1-AR的蛋白表达水平显著下调(P<0.01或P<0.05),β2-AR的蛋白表达水平显著上调(P<0.05),正常对照组α1A-AR、β1-AR和β2-AR的蛋白表达水平与假手术组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CHF大鼠肺循环淤血,α1A-AR下调,有利于肺血管舒张,抑制平滑肌增生以代偿这种病理改变。肺脏β2-AR表达水平上调可能与β2-AR激动可以舒张血管和支气管平滑肌作用,开放钠离子通道等机制促进肺水肿液的清除、并能改善心力衰竭条件下肺脏微血管的通透性有关。心力衰竭时肺脏β1-AR的下调一方面与CHF时交感肾上腺素系统激活产生的负反馈调节有关,另一面可能与代偿性拮抗β2-AR的上调,维持相对稳定的肺泡液体清除率有关。     

内镜超声引导穿刺冲洗治疗纵隔脓肿的初步应用

EUS以及EUS-FNA在临床上广泛应用于胃食管、结肠以及胰腺病变的诊断及治疗。在胸腔内既往主要用于发现食管病变及对病变进行分期,此外EUS还可以发现食管外疾病,如纵隔肿瘤或脓肿、淋巴结肿大、结核等,并对这些疾病行EUS引导下的诊断和治疗。近期我们为1例患者成功实施了EUS引导下纵隔脓肿穿刺冲洗术,现报道如下并结合文献进行回顾。     

心力衰竭大鼠肾脏α_1及β肾上腺素受体各亚型表达的改变

目的探讨大鼠心力衰竭时肾脏α_1肾上腺素受体(α_1-AR)和β肾上腺素受体(β-AR)各亚型表达水平的变化。方法选择雄性Wistar大鼠35只,随机分为对照组10只、假手术组10只,其余大鼠制作心肌梗死后心力衰竭模型,成功9只为模型组。取大鼠肾脏皮质,采用Western blot法分别测定各组大鼠α_1-AR亚型(α_(1)-AR、α_(1B)-AR、α_(1D)-AR)和β-AR亚型(β_1-AR、β_2-AR)表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠α_(1A)-AR、β_1-AR表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.01);各组大鼠α_(1B)-AR、α_(1D)-AR、β_2-AR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论心力衰竭时肾脏α_(1A)-AR和β_1-AR明显下调,可能与交感神经系统激活有关;而β_2-AR表达水平无明显变化,可能为代偿β_1-AR下调带来的不利影响,以维持肾脏有效灌注,保护肾脏功能。     

人TIMP-1转基因小鼠随增龄肾组织内血管生成的变化及意义

目的　探讨人基质金属蛋白酶组织抑制物-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）对肾脏器官衰老过程血管生成的影响。方法　对3、12、24月龄人TIMP-1转基因小鼠和野生型小鼠肾组织石蜡切片行PASM染色,观察肾组织内微血管密度变化;Western免疫印迹检测TIMP-1、TIMP-2、基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）-2、MMP-9、血管内皮细胞生长因子（VEGF）、Ⅲ型和Ⅳ型胶原蛋白质表达;明胶酶谱和反向酶谱分别检测明胶酶和TIMP-1的活性。结果　24月龄时与野生型小鼠相比,转基因小鼠肾小球和肾小管周围的微血管密度降低（P〈0.05）;TIMP-1、Ⅲ型和Ⅳ型胶原蛋白质表达增多（P〈0.05）,而MMP-2、MMP-9和VEGF的表达降低（P〈0.05）;明胶酶谱和反向酶谱结果显示,明胶酶的活性下调（P〈0.05）,而TIMP-1的活性则上调（P〈0.05）。结论　TIMP-1可能通过影响血管生成而促进肾脏器官衰老。 基金 国家重点基础研究发展规划（973项目,2007CB507403）;; 国家自然科学基金创新群体科学基金（30121005）     

人miR-34a靶基因的生物信息学分析及载体构建

目的对人miR-34a（hsa-miR-34a）下游靶基因进行预测,并构建含自噬相关基因靶结合序列的GFP报告基因载体。方法使用TargetScan Release 5.1和RNA22软件分析hsa-miR-34a可能的靶基因,并利用Gominer软件对靶基因功能进行分析。根据预测结果,合成含自噬相关基因hsa-miR-34a靶序列的寡核苷酸,以pEGFPC2为载体构建系列质粒,并检测各载体的真核表达情况。结果预测结果显示hsa-miR-34a共有2904个下游靶基因,功能涵盖生物过程、细胞组分、分子功能三大类,其中与自噬作用直接相关的靶基因有beclin 1和sestrin 2。构建含beclin 1和sestrin 2作用位点的GFP载体共5个,质粒转染Hela细胞后在荧光显微镜下可见绿色荧光。结论成功构建hsa-miR-34a下游自噬相关基因靶位点序列GFP报告基因载体,为进一步研究hsa-miR-34a对自噬的调控作用奠定基础。