启动子区5′CpG岛去甲基化对人结肠癌细胞生物学表型的影响

目的:探讨DNA启动子区5′CpG岛甲基化状态与人结肠癌RKO细胞增殖凋亡等生物学特征的关系。方法:应用特异性DNA甲基转移酶(DNMTs)抑制剂-5-氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理肠癌RKO细胞72h,甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)及DNA测序法分析p16/CDKN2基因CpG岛甲基化状态;MTT、FCM、荧光染色及透射电镜检测启动子区去甲基化后细胞生长、形态和细胞周期凋亡的影响。结果:DNMTs抑制剂能较好地逆转启动子区胞嘧啶甲基化状态;CpG岛去甲基化后能明显地抑制肠癌细胞的生长,增加细胞群体倍增时间(P<0.01),诱导肠癌细胞凋亡,影响肠癌细胞周期分布,并具有良好的量效依赖关系。结论:通过逆转CpG岛高甲基化能有效地抑制肠癌细胞增殖,为临床治疗大肠癌提供新的作用靶点。     

维生素K3对HL-60细胞凋亡的诱导作用

目的:观察维生素K₃(VK₃)对HL-60细胞凋亡的诱导作用。方法:通过形态学、DNA电泳、Annexin V标记法检测VK₃作用后HL-60细胞的凋亡发生情况。结果:2、5、10、20 μmol/L的VK₃作用于HL-60细胞48h后凋亡发生率分别为8.76%、9.7%、18.54%、75.4%;10 μmol/L的VK₃作用于HL-60细胞24、48、72、96 h后凋亡发生率分别为11.35%、18.54%、21.22%、37.54%。结论:VK₃能诱导HL-60细胞发生凋亡,并具有一定的量效和时效关系。     

整合素介导微泡声学造影剂与白细胞粘附的实验研究

目的:研究白细胞与蛋白微泡声学造影剂的粘附过程及机制。方法:光镜和电镜观察离体不同状态下的白细胞与蛋白微泡的粘附过程,流式细胞仪测定白细胞与微泡混合后,在存在或缺乏白细胞整合素的情况下,荧光强度的变化。结果:蛋白微泡与PMA激活的白细胞接触后 5min大量结合到白细胞表面,未经激活的白细胞表面少有微泡粘附 (20.30±2. 67vs4.50±1.43,P <0.01)。15min时微泡被吞噬入细胞内,并保持形态完整至 30min。两者的结合可被Mac-1mAb大部分阻止 (P <0.01),VLA-4mAb轻度阻止 (P <0.05)。结论:蛋白微泡声学造影剂可经 β₂ 整合素Mac-1和VLA-4介导与激活的白细胞结合,并进入细胞内从而在炎症部位停留,保持形态完整约15min,仍不失声学活性     

减毒活菌卡介苗对哮喘小鼠气道炎症及外周血Th1/Th2平衡的影响

诸多研究表明，辅助T细胞(Th2)占优势的Th1／Th2失衡是哮喘发病的重要机制。减毒活菌卡介苗(BCG)是一很强的Th1型细胞诱导剂，本研究意在观察BCG对小鼠哮喘模型气道炎症及外周血Th1／Th2平衡的影响。     

江浙蝮蛇毒对体外培养人滑膜细胞凋亡的影响

目的探讨江浙腹蛇毒(AHV)诱导类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞凋亡的作用及对相关蛋白Caspase-3表达的影响。方法 AHV处理培养的滑膜细胞后,采用MTT比色法检测AHV对滑膜细胞增殖的抑制作用,并采用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达。结果 MTT的检测结果显示5μg/mL AHV处理组滑膜细胞增殖抑制率达67.2%,且与时间、剂量具有正相关关系(P0.05),AHV体外作用滑膜细胞24 h的IC50为3.508μg/mL。流式细胞仪结果显示,与对照组相比,AHV各剂量组凋亡率明显增加(P0.05),并与剂量呈正相关。AHV体外作用滑膜细胞24 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,其蛋白表达率明显高于对照组。结论 AHV对滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,细胞凋亡率明显增加可能与AHV诱导滑膜细胞Caspase-3活化相关。