重庆市甲型H1N1流感血清流行病学调查及影响因素分析

目的了解重庆市医疗机构就诊病例及健康人群甲型H1N1流感抗体水平,分析和预测流感的流行趋势,为制定针对性的防治措施提供依据。方法对238名门诊病例和171名健康人群进行流行病学调查并采集不同年龄组血清进行甲型H1N1流感血凝抑制试验。结果 HI总体阳性率为15.4%(95%CI:12.1%～9.4%),抗体几何平均滴度(GMT)高滴度者(≥1∶160)占阳性数的6.4%(95%CI:0.4%～19.5%);性别之间、2周前是否出现过流感样症状之间、5～岁年龄组与其余3个年龄组间和是否接种甲型H1N1流感疫苗之间阳性几何平均倒数滴度(GMRT)的差异有统计学意义(P0.05);抗体阳性率、滴度分布和logistic回归分析结果均显示2周前出现过流感样症状者为主要影响因素,但性别、年龄间差异无统计学意义。结论重庆市甲型H1N1流感免疫水平较低,易发生流行。     

流感病毒型别及亚型的多重RT-PCR方法快速检测

目的为适应流感疫情监测中快速诊断的需要,建立敏感特异的流感病毒多重逆转录PCR(MRTPCR)检测方法。方法对甲1型(H1N1)、甲3型(H3N2)、乙型流感病毒的血凝素(HA)基因保守区域分别设计引物进行MRTPCR。另设计了两对引物对H1N1和H3N2亚型流感病毒的神经氨酸酶(NA)N1、N2作亚型判断。结果MRTPCR可特异性检测出各型流感病毒的目的片段,相互间无交叉反应。二次PCR反应后对H1N1、H3N2流感病毒的检测灵敏度可达0.10TCID50/50μl以下,对乙型流感病毒的检测灵敏度可达0.01TCID50/50μl以下。应用此方法也可特异性地检测出H1N1和H3N2流感病毒的NA基因。结论用MRTPCR从临床患者含漱液标本中检出相关流感病毒的灵敏度要高于用狗肾传代细胞(MDCK)或鸡胚分离的灵敏度,达到了快速、敏感、正确检测流感病毒及其亚型的目的。     

应用环介导等温扩增法快速检测O139群霍乱弧菌

目的 建立一种适合基层检验部门及小型实验室使用的快速检测O139群霍乱弧菌的方法.方法 应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),针对O139霍乱弧菌wbfR基因设计4条引物(2条内引物、2条外引物);优化LAMP反应条件和反应体系,对反应体系中的引物、dNTP、Mg2+/Mn2+离子及Calcium等浓度进行优化;并对13株种系背景明确的霍乱弧菌不同实验对照株、30株O139群霍乱弧菌地方分离株、10株O1群霍乱弧菌地方分离株、32株其他肠道菌进行检测,验证该方法的特异性;通过肉眼目测或电泳检测比较结果.结果 所有O139群霍乱弧菌经LAMP榆测均呈绿色并电泳有阶梯状条带为阳性,O1群霍乱弧菌及其他肠道菌均检测呈橙色并电泳无相应条带为阴性;该体系最低检测限为63 CFU/反应;检测结果在白光下通过肉眼即可判断;从菌株核酸的提取至检测完成仅需1.5 h左右.结论 本研究建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测O139群霍乱弧菌,无需昂贵的仪器,简单方便,非常适合基层检验部门或小型实验室以及流行病学人员于应急车上或现场监测等使用,值得推广.     

重庆流行性乙型脑炎病毒分离株CQ11-66在PrM/C及E基因区的分子特征

目的 分析重庆地区儿童流行性乙型脑炎(简称乙脑)病毒分离株CQ11-66在PrM/C及E基因区的分子特征.方法 采集重庆医科大学附属儿童医院感染消化科诊断的流行性乙脑患者血液及脑脊液标本,通过接种BHK-21细胞检测并分离乙脑病毒,并对其PrM/C及E基因区测序.使用Clustal X(1.8)、MEGA5等生物学软件进行核苷酸序列、氨基酸序列及系统进化分析.结果 本研究仅从儿童乙脑患者脑脊液标本中分离到1株乙脑病毒,命名为CQ11-66.CQ11-66和其他国家及地区的乙脑病毒分离株相比,PrM/C基因区总体核苷酸及氨基酸序列同源性分别为74.8％～97.4％及85.6％～98.7％,而E基因区总体核苷酸及氨基酸序列同源性分别为81.6％ ～ 99.6％及94.8％ ～99.6％;CQ11-66株与福建省乙脑病毒人分离株相比较,在PrM/C、E基因核苷酸及氨基酸序列同源性均很高.基于PrM/C及E基因区核苷酸序列进行系统进化分析,CQ11-66株属于基因Ⅲ型.结论 在重庆市儿童乙脑患者标本中分离到1株乙脑病毒CQ11-66,CQ11-66株在PrM/C和F基因区核苷酸序列和氨基酸序列同其他乙脑病毒分离株存在一定的差异,且系统进化分析显示CQ11-66株属于乙脑病毒基因Ⅲ型.     

应用环介导等温扩增法快速检测O139群霍乱弧菌

目的 建立一种适合基层检验部门及小型实验室使用的快速检测O139群霍乱弧菌的方法.方法 应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),针对O139霍乱弧菌wbfR基因设计4条引物(2条内引物、2条外引物);优化LAMP反应条件和反应体系,对反应体系中的引物、dNTP、Mg2+/Mn2+离子及Calcium等浓度进行优化;并对13株种系背景明确的霍乱弧菌不同实验对照株、30株O139群霍乱弧菌地方分离株、10株O1群霍乱弧菌地方分离株、32株其他肠道菌进行检测,验证该方法的特异性;通过肉眼目测或电泳检测比较结果.结果 所有O139群霍乱弧菌经LAMP榆测均呈绿色并电泳有阶梯状条带为阳性,O1群霍乱弧菌及其他肠道菌均检测呈橙色并电泳无相应条带为阴性;该体系最低检测限为63 CFU/反应;检测结果在白光下通过肉眼即可判断;从菌株核酸的提取至检测完成仅需1.5 h左右.结论 本研究建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测O139群霍乱弧菌,无需昂贵的仪器,简单方便,非常适合基层检验部门或小型实验室以及流行病学人员于应急车上或现场监测等使用,值得推广.     

间隙连接蛋白43在舌黏膜癌变过程中的表达

目的 研究间隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)在口腔黏膜癌变过程中的表达变化,探寻其与口腔黏膜癌变的关系及意义.方法 用4亚基硝氧喹啉(4-nitroquinoline-1-oxide,4NQO)诱导SD大鼠口腔黏膜癌变,应用免疫组化方法检测Cx43在口腔黏膜癌变过程中各阶段的动态变化,分析Cx43与口腔黏膜癌变的关系.结果 Cx43蛋白主要表达于大鼠舌黏膜上皮细胞的胞膜、上皮基底层、棘层和颗粒层呈阳性染色,角质层未见表达.随着舌黏膜上皮异常增生程度的增加,Cx43的表达明显下降.在口腔鳞状细胞癌组织中,Cx43染色分布于癌细胞胞质以及鳞癌组织的角化珠内.Cx43在正常舌黏膜、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生、口腔鳞癌组织中阳性表达率分别为100.00％(10/10)、85.71％(12/14)、66.67％(8/12)、40.00％(4/10)、33.33％(4/12),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 4NQO诱发舌黏膜癌变的过程中,Cx43蛋白表达水平随病变程度加重而显著下降,提示Cx43表达异常参与了口腔黏膜的癌变过程.Cx43表达下降是口腔黏膜癌变的早期事件.     

父源性插入导致胎儿染色体异常一例CSCD

孕妇 39岁, 因无创产前检测(non-invasive prenatal testing, NIPT)提示胎儿4q21.1-q22.3区存在18.2 Mb重复来我院进行产前诊断。在签署知情同意书后, 于孕19周接受羊水穿刺, 常规进行羊水细胞核型分析, 同时进行染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis, CMA)。     

分析比较急性髌骨外侧脱位与膝关节多发韧带损伤后内侧髌股韧带损伤的特点

 目的 分析比较急性髌骨外侧脱位(lateral patellar dislocation,LPD)与膝关节多发韧带损伤(multiligament knee injuries,MLKIs)后内侧髌股韧带(medial patellofemoral ligament,MPFL)损伤的特点。方法 回顾性分析急性LPD 92例和MLKIs 83例患者的MRI资料,根据患者年龄分为青少年组(年龄≤18岁)84例和成人组(年龄＞18岁)91例,对LPD和MLKIs伴发MPFL损伤程度、部位进行统计学分析。结果 青少年LPD组50例中,MPFL部分撕裂20例,完全撕裂25例,未损伤5例;青少年MLKIs组34例患者中,MPFL部分撕裂9例,完全撕裂6例,未损伤19例;两组比较,差异有统计学意义(χ²=21.725,P<0.05)。青少年LPD组MPFL髌骨侧损伤19例,股骨侧14例,体部2例,多部位损伤10例;青少年MLKIs组MPFL髌骨侧损伤3例,股骨侧7例,多部位损伤5例;青少年LPD组和MLKIs组间MPFL髌骨侧、股骨侧、多部位损伤发生率差异均具有统计学意义(χ²=19.753,9.644,8.193,P值均小于0.01)。成人LPD组42例中,MPFL部分撕裂17例,完全撕裂19例,未损伤6例;成人MLKIs组49例中,MPFL部分撕裂13例,完全撕裂7例,未损伤29例;两组比较,差异有统计学意义(χ²=20.771,P<0.05)。成人LPD组MPFL髌骨侧损伤11例,股骨侧15例,体部2例,多部位损伤8例;成人MLKIs组MPFL髌骨侧损伤4例,股骨侧9例,多部位损伤7例;LPD组和MLKIs组间MPFL髌骨侧、股骨侧、多部位损伤发生率差异均具有统计学意义(χ²=14.773,12.777,6.822,P均<0.01)。结论 急性LPD比MLKIs更易导致MPFL损伤,MPFL髌骨侧损伤、股骨侧损伤和多部位损伤LPD也较MLKIs更常见。     

阶梯式手术培训模式在输尿管软镜教学中的应用

目的介绍我中心阶梯式手术培训模式在输尿管软镜教学的初步探索经验。 方法根据随机数字表的方式,将2015年5月至2018年5月期间,在南昌大学第四附属医院进修并接受输尿管软镜培训的泌尿外科医师随机分为阶梯式培训组和传统教学组,每组学员各20名。传统培训模式学员,直接进入临床培训阶段;阶梯式培训模式在学员进入临床培训前,需经过理论学习、体外训练、动物操作三个阶段。学员在前一阶段的学习后,经过考核方可进入下一阶段培训。 结果两组学员年龄、学历、职称及有无输尿管镜手术经验上差异无统计学意义。通过系统培训,两组共40名成员均可在导师指导下独立完成输尿管软镜手术。两组学员治疗结石患者年龄、性别及结石负荷差异无统计学意义。手术培训时间（月）、手术培训例数（例）,首例独立完成手术时间和学员评分四项指标差异有统计学意义。术中未发生结石移位,无输尿管穿孔,无结石残留。阶梯培训组,术后并发泌尿系感染1例,给与常规抗感染治疗后好转。 结论通过输尿管软镜碎石术的阶梯式培训模式,可以缩短手术培训时间,减少手术培训例数,降低首例手术时间,增加学员评分。     

非小细胞肺癌脑转移瘤治疗方案的优化选择

目的优化选择非小细胞肺癌脑转移瘤的治疗方案。方法72例均有病理学诊断的住院患者。随机分成3组。全颅外放疗组24例(Ⅰ组)。伽玛刀加全颅放疗组22例(Ⅱ组)。伽玛刀加全颅放疗联合Vm-26治疗组26例(Ⅲ组)。全脑外放疗中心剂量36~41Gy,常规分割4~5周完成。伽玛刀治疗以50%等中心剂量曲线严格覆盖肿瘤边缘,处方剂量16~25Gy,平均16Gy。化疗:于全颅放疗DT19-29Gy,2~3周后,加Vm-26化疗,60mg·m2·d-1,连用3d,21d为1周期,共用2个周期。化疗期间继续放疗。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组的中位生存时间分别为6·0(1·2~19·0)、9·2(4·4~30·0)和10·8(5·2~42·2)个月,1、2年生存率分别为34·6%和12·6%;62·2%和30·2%;70·8%和35·6%。结论采用3种不同方法治疗非小细胞肺癌脑转移瘤,Ⅲ组在提高局部控制率、延长生存期上明显优于Ⅰ组和Ⅱ组,且毒副作用可耐受。