Toll样受体4表达与膝骨关节炎软骨细胞凋亡的关系

目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)表达与人膝骨关节炎软骨细胞凋亡的关系,明确TLR4介导的信号通路在骨关节炎发病机制中的作用。方法:取骨关节炎晚期行膝关节置换的关节软骨,剪碎后,采用酶消化法消化细胞,将处于对数生长期第3代细胞随机分为ZVF组、喜树碱对照组和阴性对照组,培养4周后,TUNEL法测定各组细胞凋亡情况,然后采用免疫组化染色和蛋白质印迹测定软骨细胞的TLR4蛋白表达。将软骨细胞随机分为对照组和TLR4抑制剂组,采用流式细胞仪和Caspase-3试剂盒测定两组细胞的凋亡情况。结果:用凋亡抑制剂ZVF和凋亡诱导剂喜树碱刺激体外培养的膝骨关节炎软骨细胞,培养4周后,蛋白质印迹结果显示喜树碱组TLR4蛋白表达最多,阴性对照组其次,ZVF组较阴性对照组的TLR4蛋白表达明显降低。免疫组化染色可见喜树碱组TLR4染色阳性细胞基本充满视野,荧光强度强;而阴性对照组可见一定数量染色阳性细胞,荧光强度一般;ZVF组只可见少量染色阳性细胞,荧光强度弱。流式细胞术结果显示TLR4抑制剂组软骨细胞凋亡率明显低于正常对照组;Caspase-3活化度检测结果同流式细胞术结果一致。结论:凋亡软骨细胞较正常软骨细胞的TLR4表达增加,而阻滞TLR4信号传导通路能有效抑制软骨细胞的凋亡。TLR4信号通路参与了软骨细胞的凋亡,在骨性关节炎的发病及进展中起着重要作用。     

猪Toll样受体7基因人工miRNA表达质粒的构建与筛选

目的 构建猪Toll样受体7(TLR7)基因的人工miRNA (amiRNA)特异性表达载体,筛选有效amiRNA.方法 RT-PCR扩增猪TLR77基因的1984 ～2648 bp序列,构建融合表达载体pTLR7-EGFP.设计针对猪TLR7的5对amiRNA,构建重组干扰质粒pcDNA5-miRTLR7.将pcDNA5-miRTLR7和pTLR7-EGFP共转染NIH-3T3细胞,通过RT-PCR检测amiTLR7的表达,以荧光显微镜观察和流式细胞术分析干扰效率.结果 5个amiTLR7都成功表达,且均能沉默NIH-3T3细胞中TLR7基因的表达,抑制效率为36.99％到97.28％,其中amiTLR7-3效果最佳.结论 成功构建了针对猪TLR基因的amiRNA表达质粒,筛选出了沉默猪TLR7基因的最佳干扰序列.     

不同剂量辛伐他汀对高血压并高脂血症患者血压及血脂代谢的影响

目的:探讨不同剂量辛伐他汀对高血压并高脂血症患者血压及血脂代谢的影响。方法:选择2018年2月~2019年5月收治的70例高血压并高脂血症患者,采用随机数字表法分为对照组和观察组,每组35例,对照组采用小剂量辛伐他汀20%mg治疗,观察组采用大剂量辛伐他汀40%mg治疗,对比两组患者治疗后血压及血脂水平、不良反应发生情况。结果:两组患者治疗前收缩压、舒张压比较无明显差异(P>0.05);治疗后两组收缩压、舒张压均降低,观察组下降幅度大于对照组(P<0.05);治疗前,两组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平比较无明显差异(P>0.05);治疗后,两组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平水平均降低,观察组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白水平低于对照组,高密度脂蛋白高于对照组,但无显著差异(P<0.05);观察组不良反应发生率略高于对照组(P>0.05)。结论:不同剂量辛伐他汀对高血压并高脂血症患者血压及血脂代谢均有一定影响,但使用大剂量辛伐他汀治疗后血脂、血压水平改善效果更佳,且用药安全性较好。     

2018年内蒙古包头市细菌耐药性监测

目的 了解2018年内蒙古包头市11所参加全国细菌耐药监测网医院临床分离株的构成及耐药情况,为本地区临床合理化用药提供理论依据。方法 各成员医院按监测方案,采用纸片扩散法或自动化仪器检测法进行药敏试验,按美国临床实验室标准化研究协会(CLSI) 2017年版标准判读药敏结果,采用WHONET 5.6软件进行数据分析。结果 共收集上述医院非重复临床分离菌7773株,其中革兰阳性菌2138株,占27.5%,革兰阴性菌5635株,占72.5%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的平均检出率分别为12.2%和66.9%,MRSA和MRCNS对大多数抗菌药物的耐药率均显著高于甲氧西林敏感株(MSSA和MSCNS),未发现利奈唑胺、万古霉素和替考拉宁耐药菌株。屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率均显著高于粪肠球菌,粪肠球菌中发现有3株利奈唑胺、1株万古霉素和1株替考拉宁耐药菌株。非脑脊液标本分离的肺炎链球菌对青霉素的耐药率为2.0%。大肠埃希菌和克雷伯菌属中产ESBL菌株的平均检出率分别为48.3%和20.6%,产ESBL菌株对所测抗菌药物的耐药率均高于非产ESBL菌株。肠杆菌科细菌中CRE的检出率为1.2%,CRKP菌株对阿米卡星的耐药率为64.3%。铜绿假单胞菌对碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类、头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/三唑巴坦的耐药率均低于15.0%。不动杆菌属对包括碳青霉烯类在内的大多数抗菌药物的耐药率超过38.0%,其中亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为42.3%和43.5%。结论 我市细菌耐药情况较全国水平低,但仍呈缓慢增长趋势,应继续做好细菌耐药性监测工作,加强抗菌药物临床应用管理措施,以合理化使用抗菌药物。     

2型糖尿病小鼠小脑代谢物的~1H NMR研究

目的:通过离体的高分辨核磁共振氢谱(1H NMR)技术研究2型糖尿病db/db小鼠小脑的代谢变化。方法:采用8只15周龄2型糖尿病模型db/db小鼠为实验组,11只15周龄野生正常小鼠为对照组,对其小脑组织进行离体的1H NMR检测分析。结果:实验组与对照组相比小脑的代谢模式明显不同,甘氨酸(Gly)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、丙氨酸(Ala)等代谢物浓度明显下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);谷氨酰胺(Gln)、牛磺酸(Tau)、乳酸(Lac)等代谢物水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:代谢组学结果说明2型糖尿病模型db/db小鼠小脑中糖代谢、氨基酸代谢出现了紊乱,这为进一步认识糖尿病脑病的发病机制提供了线索。     

中西医结合治疗复发性口腔溃疡60例疗效观察

目的：探讨使用中西医结合治疗复发性口腔溃疡的临床疗效。方法选取2012-05—2013-05济南军区青岛第一疗养院中医科诊治的复发性口腔溃疡患者120例,按随机数字法分为治疗组60例和对照组60例。其中治疗组在西医药物治疗的同时服用中药进行治疗,而对照组仅以西医治疗方法进行治疗。15 d为1个疗程,3个疗程观察疗效。结果治疗组近期疗效总有效率91.67%,对照组近期疗效总有效率为63.33%;治疗组远期疗效总有效率88.33%,对照组远期疗效总有效率56.67%。两组疗效情况比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论运用中西医疗法治疗复发性口腔溃疡比单纯用西药治疗疗效更为显著,可有效缩短治疗时间,减少溃疡复发率,且根治率较高。     

基于脂质组学的子宫内膜异位症生物标志物研究进展

子宫内膜异位症的发病机制不明,缺乏有效的生物标志物,疾病的延误诊断非常突出。脂质组学技术为子宫内膜异位症的诊断和预测提供了新的途径。外周血、子宫内膜液、腹腔液和卵泡液的鞘磷脂、磷脂酰胆碱和磷脂酰丝氨酸等对子宫内膜异位症及疾病分型具有良好的诊断价值;在位子宫内膜的磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸联合磷脂酸有望成为早期子宫内膜异位症的生物标志物;外周血的脂代谢数据对预测子宫内膜异位症相关不孕也有重要价值。脂质组学技术的发展将进一步推进子宫内膜异位症相关发病机制、疾病预测、诊断和治疗等方面的研究进展。     

CT联合D-D检查在胰腺炎预后评估中的应用价值

目的探讨CT联合D-二聚体(D-D)在急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)诊断及预后评估中的应用价值。方法选取2016年10月~2018年12月我院收治的重症AP患者84例,所有患者入院后均完善腹部CT检查及血清D-D检测。根据Balthazar CT分级以C级为分界,将患者分为低级组(≤C级)与高级组(> C级);并以D-D=2.00μg/mL为分界,将患者分为低水平组(≤2.00μg/mL)和高水平组(>2.00μg/mL);对上述不同组间患者预后参数进行对比分析。结果 CT分级高级组住院时间明显长于低级组(P<0.05),死亡率明显高于低级组(P<0.05),两组ICU入住率、中转手术率对比无统计学差异(P>0.05)。D-D高水平组死亡率明显高于低水平组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,D-D水平与Balthazar CT分级呈正相关(r=0.368,P<0.05)。ROC曲线分析显示,Balthazar CT分级、D-D及二者联合预测重症AP患者死亡的曲线下面积分别为0.660 (95%CI:0.507~0.813)、0.669 (95%CI:0.558~0.780)、0.757 (95%CI:0.614~0.900)。结论 Balthazar CT分级、D-D均可对重症AP患者预后进行判断,二者联合可提高预估价值。     

攀登鱼藤异黄酮脂质体有较好的物理性能及抗乳腺癌细胞的增殖活性

目的 制备和鉴定攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体并研究其抗乳腺癌作用。方法 MTT法检测攀登鱼藤异黄酮、大豆异黄酮和金雀异黄酮对人乳腺癌细胞（MDA-MB-231、MCF7、SKBR3）增殖活性影响;克隆形成实验探讨攀登鱼藤异黄酮对三阴性乳腺癌细胞（MDA-MB-231）克隆形成的影响;细胞划痕实验检测MDA-MB-231细胞迁移;蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞迁移和侵袭蛋白MMP2,MMP9表达量;薄膜水化法制备温敏脂质体及攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体;透射电子显微镜、动态光散射扫描仪以及紫外分光光度计分别鉴定攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体形貌、粒径、包封率及稳定性,并用MTT法检测攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体抗小鼠乳腺癌细胞（4T1）增殖活性。结果 攀登鱼藤异黄酮可显著抑制人乳腺癌细胞（MDA-MB-231、MCF7、SKBR3）增殖,且效果优于大豆异黄酮和金雀异黄酮;攀登鱼藤异黄酮显著减少三阴性乳腺癌细胞（MDA-MB-231）克隆形成量,降低其划痕面积的愈合速度,并下调MMP2和MMP9的表达。薄膜水化法制备得到的温敏脂质体呈均质不规则球形,其粒径为56.23±0.61 nm、聚合物分散指数为0.241±0.014、Zeta电位为-40.40±0.46 mV、包封率为（87.68±2.41）%、稳定性较好,且抗小鼠乳腺癌增殖活性增强。结论 攀登鱼藤异黄酮通过抑制乳腺癌细胞增殖、转移和侵袭发挥其抗癌活性,攀登鱼藤异黄酮温敏脂质体具有较好的物理性能及抗乳腺癌活性。