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目的构建甲型SWH1N1流感病毒核蛋白(NP)的杆状病毒真核表达载体,转染sf9细胞表达并纯化其编码蛋白。方法从江苏SWH1N1流感病毒毒株(A/Jiangsu/1/2009(H1N1))提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NP基因,将其克隆至pMD18-TSimple Vector中构建pMD18-T/NP质粒,双酶切pMD18-T/NP与p-fast后,连接构建真核表达载体p-fast-NP,转化DH10Bac细胞,转座构建杆状病毒NP-Bacmid,经酶切及测序鉴定后将NP-Bacmid转染到sf9细胞中,通过免疫印迹法鉴定NP蛋白的表达,采用亲和层析法纯化NP蛋白。结果经双酶切、测序鉴定证实NP基因的真核表达载体构建成功;免疫印迹法证实NP基因的表达;纯化获得了高纯度的NP蛋白。结论成功克隆了NP基因,并构建了其杆状病毒真核表达载体,该表达载体的构建为后期的流感病毒快速检测以及基因工程疫苗制备奠定了良好的基础。 相似文献
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目的构建甲型SWH1N1流感病毒血凝素HA1蛋白的杆状病毒真核表达载体,转染sf9细胞表达并纯化其编码蛋白。方法从江苏甲型H1N1流感病毒毒株[A/Jiangsu/1/2009(H1N1)]提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增HA1基因,将其克隆至pMD18-T Simple Vector中构建pMD18-T/HA1质粒,双酶切pMD18-T/HA1与p-fast后,连接构建真核表达载体p-fast-HA1,转化DH10Bac细胞,转座构建杆状病毒HA1-Bacmid,经酶切及测序鉴定后将HA1-Bacmid转染到sf9细胞中,通过免疫印迹法鉴定HA1蛋白的表达,采用亲和层析法纯化HA1蛋白。结果经双酶切、测序鉴定证实HA1基因的真核表达载体构建成功;免疫印迹法证实HA1基因的表达;纯化获得了高纯度的HA1蛋白。结论成功克隆了HA1基因,并构建了其杆状病毒真核表达载体,该表达载体的构建为后期的流感快速检测以及基因工程疫苗制备奠定了良好的基础。 相似文献
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雌激素受体及其介导的基因表达与调控 总被引:4,自引:0,他引:4
卞倩 《国外医学:妇产科学分册》2002,29(6):348-351
雌激素在体内的重要功能由雌激素受体(ER)介导。ER是近年生殖生物学及内分泌学研究的热点之一。从ER的分子结构和功能、定位与分布、ER介导的基因表达与调控以及ER的检测与肿瘤等几个方面,对近年来ER研究的进展进行综述。 相似文献
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[目的]探讨吡虫灵农药生产职业暴露对男工精液质量的影响。[方法]分别选择某农药厂吡虫灵生产男工22名为暴露组、厂行政办公区男性工作人员46名为内对照组,另选择某疾控中心男性工作人员22名为外对照组。对各组所处环境空气中吡虫灵及其相关化学物如四氯化碳及氯气进行连续3d的监测,同时选择暴露区及外对照区各3人进行连续3d的个体采样和皮肤污染量测定,评价暴露水平;按统一的实施标准收集一次性精液,用UCDavis推荐的方法对精液质量进行评价,用WHO推荐的标准对精子的形态学进行评价,同时应用计算机辅助精子分析系统(CASA)对精子的运动能力进行分析。[结果]暴露组空气中吡虫灵、四氯化碳浓度明显高于内、外对照组(P〈0.01),而氯气差异无显著性(P〉0.05),同时个体采样及皮肤污染量结果均显示暴露组吡虫灵浓度显著高于外对照组(P〈0.01);暴露组精子直线性(LIN)、精子前向性(STR)均显著低于外对照组(P〈0.05),精液量异常率显著高于外对照组(P〈0.01);内对照组精子活动度显著低于外对照组(P〈0.05),精液量及精子活动度异常率显著高于外对照组(P〈0.05)。[结论]吡虫灵农药生产职业暴露对男工精液质量有一定影响。 相似文献
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烷基酚类物质的生殖发育毒效应及其作用机制 总被引:5,自引:0,他引:5
烷基酚类化合物 (alkylphenolcompounds,APs)因其长期的广泛应用与在环境中的大量滞留 ,已成为最常见的环境污染物之一 ,与之相关的环境内分泌干扰效应已越来越成为关注的热点和亟待研究与解决的问题。本文拟对APs及其相关化合物的生殖内分泌干扰效应和作用机制做初步论述。 相似文献
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目的 探讨基于Snyder希望理论的互联网延续性护理对乳腺癌手术患者的影响。方法 将60例乳腺癌手术患者按随机等分法分为2组,其中对照组30例采用常规互联网延续性护理,观察组30例采用基于Snyder希望理论的互联网延续性护理,对比2组干预前后患者希望水平、生活质量、失志与疲乏程度变化。结果 干预后观察组希望水平高于对照组,失志与疲乏程度低于对照组,生活质量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 基于Snyder希望理论的互联网延续性护理可提高乳腺癌手术患者的希望水平,改善其生活质量。 相似文献
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甲萘威农药生产职业暴露对男工精子和精液质量的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 了解甲萘威的男性生殖毒性。方法 选择某农药厂接触甲萘威生产的男工31名为暴露组;该厂行政区男性员工4 6名为内对照组;某疾病预防控制中心男性员工2 2名为外对照组。对各组环境空气中甲萘威及其相关气体异氰酸甲酯(MIC)、氨气及总酚进行连续3d的监测;选暴露组及外对照组各3人进行个体采样并测定其皮肤污染量;收集各组人群的精液,进行精液质量、精子的形态学评价,用计算机辅助精子分析(CASA)系统分析精子的运动能力。结果 暴露组作业环境空气中甲萘威的几何平均浓度(G)为5 2 .4 1mg/m3 、总酚为0 .0 8mg/m3 ,均高于内、外对照组,差异有统计学意义(P <0 .0 5或P <0 .0 1)。暴露组男工个体采样甲萘威浓度(G)为7.38mg/m3 ,皮肤的污染量(G)为86 2 .4 7mg/m2 ;外对照组均未检出。暴露组男工精子直线运动速度[VSL ,(2 6 .2 9±7.84 )μm/s]、鞭打频率[BCF ,(3.99±1.5 5 )Hz]、直线性(LIN ,39.89%±6 .0 0 % )、前向性(STR ,71.5 1%±11.2 2 % )均低于内、外对照组,精液黏稠度、精子活动度异常率及精子总畸形发生率均高于外对照组,精液量[(2 .39±1.4 4 )ml]、精子活动度[(1.77±0 .6 1)级]低于外对照组,差异均有统计学意义(P <0 .0 5 )。结论 甲萘威职业暴露对男工精子和精液质量有一定影响 相似文献
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目的探讨香烟烟雾暴露对小鼠糖代谢的影响及穿心莲内酯的干预效果,为糖尿病预防及烟草控制提供依据。方法选择SPF级C57BL/6J品系雄性小鼠60只,按照小鼠体重随机分为正常对照组(A组)、烟雾暴露组(B组)和烟雾暴露+穿心莲内酯干预组(C组),每组20只。B组和C组小鼠每天暴露于20支香烟的烟雾60 min,持续3个月;C组小鼠每周腹腔内注射穿心莲内酯(10 mg/kg),A组和B组注射同等体积生理盐水。香烟烟雾暴露结束后施行腹腔内注射葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(IPITT),比较各组小鼠各时点血糖变化及IPGTT和IPITT血糖水平的曲线下面积。结果 0 min时,B组的血糖最高,C组次之。IPGTT示,腹腔注射葡萄糖后各组小鼠的血糖水平迅速增加,注射后15 min最高,随后逐渐下降,且B组在15 min和30 min时的血糖水平均显著高于A组(P<0.01);B组和C组血糖水平的曲线下面积均显著大于A组(P<0.05),B组显著大于C组(P<0.05)。IPITT示,腹腔注射胰岛素后,15 min时B组血糖水平显著高于A组(P<0.05),3... 相似文献