高密度脂蛋白体外氧化修饰动力学研究

在体外HDL在Cu2+诱导下可发生氧化修饰.为了探讨体外血浆高密度脂蛋白(HDL)氧化修饰中几种产物动力学改变,用Cu2+与HDL保温2～24h,分别观察了HDL氧化修饰过程中硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)、脂氢过氧化物(COOH)、共轭二烯(CD)及相对电泳迁移率(REM)等的变化.结果显示:LOOH和CD两个指标的动力学变化相似,呈现延滞期、扩增期和下降期三个时相.而TBARS和REM动力学变化相似,只见延迟期和扩增期,未见降解期.     

成都地区362名汉族成人载脂蛋白E表型分布及其与血脂和载脂蛋白之间的关系

为探讨成都地区汉族人群载脂蛋白（ａｐｏ）Ｅ多态性情况及其与血脂、ａｐｏ 之间的关系,作者随机抽取了成都地区健康体检的３６２名汉族成人,采用等电聚焦免疫印迹分析法对其血清ａｐｏＥ表型进行了测定,同时对受检者空腹血ＴＧ、ＴＣ及ａｐｏＡⅠ,Ｂ１００,ＣⅡ,ＣⅢ,Ｅ进行了全面分析。结果显示：成都地区汉族人群ａｐｏＥ表型分布频率为：Ｅ３／３ ７２．９３％ ,Ｅ２／３ １２．９８％ ,Ｅ３／４ １１．３３％ ,Ｅ２／４ １．３８％ ,Ｅ４／４ １．３８％ ,Ｅ２／２未检测到。ＡｐｏＥ等位基因频率为：ε３ ０．８５０８,ε２ ０．０７１８,ε４ ０．０７７４。３６２名汉族成人不同ａｐｏＥ表型的血脂和载脂蛋白水平显示：与ａｐｏＥ３ （Ｅ３／３）或ａｐｏＥ４（Ｅ３／４ ＋ Ｅ４／４ ）组比较,ａｐｏＥ２ （Ｅ２／３ ＋ Ｅ２／２ ）组血清ＴＣ及ａｐｏＢ１００ 明显降低（Ｐ＜ ０．０５）,ａｐｏＥ水平明显升高（Ｐ＜０．００１）,ＴＧ、ａｐｏＡⅠ、ａｐｏＣⅡ、ａｐｏＣⅢ水平无统计学差异;与ａｐｏＥ３ 组比较,ａｐｏＥ４ 组ＴＧ、ＴＣ、ａｐｏＡⅠ、Ｂ１００、ＣⅡ、ＣⅢ和Ｅ均无统计学差异。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血凝的影响

目的：研究内源性高甘油三酯血症(HTG)患血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)是否发生了氧化修饰及其对血凝的影响。方法：对2l例内源性高甘油三酯血症患与2l例年龄性别相近的正常人的血脂、脂质过氧化物进行了分析。用一次性密度梯度超速离心法分离血浆VLDL、LDL及HDL，测定这三种脂蛋白的234nm光吸收、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)，分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜混合血浆构成的反应系统中，按试剂盒分别测定凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血酶原时间(APIT)。结果：内源性HTG患血浆TG含量平均升高2．73倍，HDLC下降l.7l倍，同时LPO升高1．22倍;HTG组VLDL、LDL及HDL的REM、234nm光吸收值、TBARS含量均较对照组显增加(P＜0．01)，表明内源性HTG患血浆VLDL、LDL及LDL均发生了氧化修饰生成Ox—VLDL、Ox-LDL.PT及APTT在分别加入HTG组的VLDL、LDL及HDL后均比加入相应正常组脂蛋白明显缩短(P均＜0．05)。相关分析表明，HTG组血浆VLDL及HDL相对电泳迁移率(REM)与PT呈负相关(P＜0．01)。结论：HTG患血浆VLDL、LDL及HDL发生了氧化修饰，并使PT及APTT明显缩短。     

肥胖时的代谢紊乱

体重超过理想体重的20%即为肥胖.任何肥胖都是热量摄入超过消耗的结果.摄入之食物不论蛋白质、脂肪或糖,除去消耗外,多余部份即转化为脂肪储存体内.由于蛋白质及糖类在体内储存有限,以致大部分多余热量皆以脂肪形式储存.25岁以前之肥胖称体质性肥胖,这种肥     

免疫技术在蛋白质定性定量上的应用 二、放射免疫测定法

1959年yalow及Berson在研究胰岛素免疫特性的基础上,利用标记及未标记抗原与一定量抗体竞争性结合的原理,创立了放射免疫测定法。这种方法把放射性同位素示踪法的高灵敏度和抗原-抗体反应的高度特异性结合起来,可测定10~(-9)-10~(-12)克/毫升的多肽、蛋白质及其它活性物质。放射免疫测定法具有专一性强、灵敏度高、标本用量少、方法简便及可成批大量测定等优点,为多肽、蛋白质类及其它生理活性物质的超微量测定开辟了广阔道路,极大地推动了多肽、蛋白质和激素的理论研究与实际应用。放射免疫是超微量分析方法上的一次革命,是定量分析方法发展史上的一个重要里程碑。yalow及Berson因此而获得诺贝尔奖金。近20     

人血浆高密度脂蛋白的不均一性

人血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）极不均一,不同分离方法可得到不同亚类。ＨＤＬ亚类因载脂蛋白组成,脂质含量不同,其密度,颗粒大,电荷及抗原性均各不相同,所发挥的生理功能也不一样,在各种分离方法中,免疫亲和层析法对ＨＤＬ损伤最小,分离出的亚类能反映血浆ＨＤＬ的真实情况。     

内源性高甘油三酯血症患者耐糖实验及胰岛素分泌的研究

内源性高甘油三酯血症患者耐糖实验及胰岛素分泌的研究范萍，刘秉文，方定志，张荣爵，刘宇，傅明德，吴兆丰，王洪敏，朱红，张蓉（成都华西医科大学载脂蛋白研究室，成都６１００４１）本文对３３例健康成人（男２４例，女９例，年龄５２．５±５．８岁，体重指数２４．...     

中压液相层析法纯化人VLDL主要载脂蛋白

目的 建立中压液相层析分离法纯化人VLDL主要载脂蛋白(apo) E、CⅠ、CⅡ和CⅢ的方法.方法 以低温乙醇法制备人血浆白蛋白后的残余组分FⅡ Ⅳ为原料,经一次性密度梯度超离心得到VLDL.脱脂后的VLDL(apoVLDL)经中压Sephacryl S-200柱层析得到apoE和apoCs粗品.apoE经肝素琼脂糖CL-6B亲和层析进一步纯化,apoCs经DEAE-Sephacel离子交换层析进行分离.结果 apoE经肝素琼脂糖CL-6B亲和层析进一步纯化,可得纯度为93.8%的纯品;apoCs经离子交换层析分离得到纯度为92%以上的apoCⅡ、apoCⅢ.所纯化各载脂蛋白apo E、CⅠ、CⅡ及CⅢ经免疫单扩和SDS-PAGE鉴定为免疫纯及电泳纯.结论 成功建立了一种可大量、快速、高分辨分离提纯载脂蛋白apo E、CⅠ、CⅡ及CⅢ的方法.     

异鼠李素及橙皮甙抑制LDL氧化修饰作用的研究

目的:研究黄酮类中药异鼠李素及橙皮甙是否具有抑制LDL氧化修饰的作用。方法:按一次性密度梯度超速离心法分离人血清LDL,分别加入5.0μmol/L异鼠李素及橙皮甙与LDL温育3 h,然后利用Cu2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法,观察LDL氧化修饰不同时间,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基的动力学改变,并与对照组比较。结果:Cu2 介导LDL氧化修饰时,在2、4、6、8、12及24 h后,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加;加入5.0μmol/L异鼠李素及橙皮甙的实验组,Cu2 LDL的氧化修饰分别延迟2~4 h和2 h,其A234、REM、TBARS及载脂蛋白羰基含量较对照组降低;异鼠李素实验组分别较对照组降低23.5%~40.4%、20.5%~37.7%、18.6%~30.3%及20.1%~52.4%(P<0.001);橙皮甙实验组分别降低11.1%~21.2%、9.2%~28.3%、13.7%~21.3%及5.0%~43.8%(P<0.001,P<0.01,P<0.001及P<0.05)。结论:异鼠李素及橙皮甙均可抑制Cu2 诱导的LDL的氧化修饰,且异鼠李素的抗氧化作用较及橙皮甙强。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆高密度脂蛋白亚类分析

内源性高甘油三酯血症常伴血浆ＨＤＬ－Ｃ含量下降及ＨＤＬ组成异常。为了研究ＨＴＧ患者血浆ＨＤＬ亚类的改变,作者建立了密度梯度聚丙烯酰胺梯度胶电泳法,对２５例ＨＴＧ患者及２５例年龄、性别匹配的血脂正常者。