排序方式: 共有55条查询结果,搜索用时 15 毫秒
21.
目的探讨核定位信号肽(NLS)在转人α1,2-岩藻糖苷转移酶(HT)基因小鼠制备中的作用。方法将受精卵随机分为3组,采用显微注射的方法制备转基因小鼠。实验组:将NLS转基因构件与人HT转基因构件同时导入细胞质;对照Ⅰ组:将人HT转基因构件导入细胞质;对照Ⅱ组:将人HT转基因构件导入细胞核。应用聚合酶链反应(PCR)、Southern杂交及逆转录(RT)-PCR等方法检测人HT基因在G0代小鼠体内的整合与表达,应用流式细胞计数(FCM)检测转基因小鼠外周血单核细胞(PBMCs)表面H抗原与α-Gal抗原的表达。结果实验组与对照Ⅰ组G0代小鼠的出生率33.8%(46/136)及35.4%(23/65)高于对照Ⅱ组10.2%(51/498)(P〈0.01),实验组人HT基因的整合率(30.4%,14/46)高于对照Ⅰ组(0,0/23)与对照Ⅱ组(11.8%,6/51,P〈0.01),实验组人HT基因的表达率(19.6%,9/46)也高于对照Ⅰ组(0,0/23)和对照Ⅱ组(5.9%,3/51,P〈0.01),人HT mRNA在小鼠心、肝、肾和骨骼肌组织中均表达阳性。转基因小鼠PBMCs表面H抗原表达阳性,表达强度为人的85%~190%,同时α-Gal抗原表达显著降低。为正常小鼠的5%~12%。转基因小鼠已经稳定传3代。结论NLS基因与目的基因细胞质共注射是制备转基因小鼠简便实用的新方法。 相似文献
22.
供体器官来源不足严重阻碍和困扰着器官移植手术的推广和应用,随着免疫学、基因工程与克隆技术的迅速发展,转基因猪的出现,异种移植有望解决器官短缺的问题,但猪内源性逆转录病毒种间传播的可能性必须进一步深入研究,本文就近期相关研究作一综述。 相似文献
23.
目的 探讨并评估多房囊性肾细胞癌(MCRCC)的诊断及治疗方法的选择.方法 回顾性分析8例MCRCC的临床资料.分析MCRCC的临床表现、放射学特征、手术方法及病理特征和随访结果.结果 MCRCC占全部含囊性成分的肾细胞癌的3.3%,75.0%的病例行根治性肾脏切除,25.0%行肾部分切除.肿瘤的平均直径是3.7cm,平均实体成分占肿瘤的9.5%,平均肿瘤分级是1.1.平均随访38.2个月,无一例复发或转移.结论 MCRCC专指那些囊壁上由小量(25.0%或更少)的透明癌细胞构成的囊性肾细胞癌,是肾细胞癌的一种罕见的亚型,容易与其他表现的肾囊性病变的疾病相混淆,鉴别诊断很重要,超声检查是一个首选的方法,计算机断层扫描能更好地识别其恶性特征.磁共振成像用于模棱两可的病例.本病的良性生物学行为可能使患者受益于保留肾单位的手术. 相似文献
24.
目的 探讨家族聚集性因素对原发性夜间遗尿症(PNE)患儿影响.方法 选取PNE患儿115例,依据PNE先症者三代家族其他成员是否累及,分为家族聚集性(FPNE组,45例)和散发性(SPNE组,70例).填写调查表评估觉醒功能、记录排尿日记和完成白天尿动力学检查.结果 FPNE组重度PNE、非单症状性PNE和小容量膀胱发生率分别为27%、58%和44%,均显著高于SPNE组的7%、21%和21%(P<0.05),而夜间多尿和觉醒障碍发生率在二组之间的差异无统计学意义.FPNE组逼尿肌过度活跃和尿动力学功能性膀胱出口阻力增加发生率为53%和60%,分别显著高于SPNE组的19%和37%(P<0.05).最大排尿量和最大膀胱压测定容量在对照组、SPNE组和FPNE组之间逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 家族聚集性因素可使PNE发生膀胱功能障碍风险增加,尿动力学检查为其治疗提供客观依据. 相似文献
25.
目的分析血清前列腺特异性抗原(PSA)联合血清肿瘤相关物质(TAM)在早期诊断前列腺癌中的应用价值。方法选择128例前列腺癌患者为病例组,另选择128例前列腺良性病变者为对照组,检测所有患者PSA及TAM值,分析PSA联合TAM在早期诊断前列腺癌中的应用价值。结果以PSA≥4.08 ng/ml为诊断前列腺癌的临界值,PSA诊断前列腺癌的准确度、特异度以及灵敏度分别为82.8%、76.1%和88.6%,受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.873。以TAM≥98.36 U/ml为诊断前列腺癌的临界值,TAM诊断前列腺癌的准确度、特异度以及灵敏度分别为77.3%、78.7%和74.5%,ROC曲线下面积为0.832。实施双指标联合检测,特异度为96.6%,高于单一指标诊断特异度。病例组患者TAM和PSA水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论在进行筛查以及早期诊断前列腺癌中,采用PSA及TAM联合检测法,可提升诊断特异度,令检查结果更为精准,值得进一步在临床中推广应用。 相似文献
26.
目的:探讨转基因小鼠血管内皮细胞特异性表达人CD59(hCD59)基因对人补体介导的免疫反应的保护作用。方法:通过显微注射方法建立转hCD59基因小鼠,采用PCR、Southernblot方法检测hCD59基因的整合,流式细胞仪检测hCD59蛋白的表达,人血清体外灌注转基因小鼠心脏、免疫组织化学染色补体C9及IgG评估排斥反应的情况。结果:转基因小鼠hCD59基因表达强度为人外周血白细胞的35%~120%,转基因小鼠体外灌注心脏存活时间明显延长(P<0.01),心脏补体C9沉积明显减少。结论:血管内皮细胞特异性表达hCD59可以减轻异种移植排斥反应,延长移植物的存活时间。 相似文献
27.
目的:探讨PCa组织中前列腺癌抗原-1(PCA-1)的表达及其临床意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测45例PCa组织、30例前列腺高分级上皮样内瘤样病变组织(HG-PIN)、43例BPH组织和39例其他肿瘤组织标本中PCA-1 mRNA的表达。免疫组织化学检测不同前列腺组织中PCA-1蛋白的表达。结果:PCa与HG-PIN组织标本中PCA-1 mRNA的阳性表达率分别为80.0%(36/45)和60.0%(18/30),BPH组织及其他肿瘤组织中均未见PCA-1 mRNA的表达。PCA-1 mRNA表达与PCa的临床病理参数之间无明显相关性,差异均无统计学意义(P>0.05)。PCa与HG-PIN组织标本中PCA-1蛋白的阳性表达率分别为75.6%(34/45)和50.0%(15/30),BPH组织及其他肿瘤组织中未见PCA-1蛋白阳性表达。结论:PCA-1仅在PCa组织中表达,且与PCa的临床病理参数无关,有可能作为特异性的肿瘤标志物对PCa进行早期诊断。 相似文献
28.
Nucleostemin基因在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义 总被引:4,自引:0,他引:4
Tasi等最近发现Nudeostemin (NS)蛋白存在于多种癌细胞的细胞核,并且其与维持癌细胞自我更新能力密切相关。我们应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及核酸分子原位杂交技术检测膀胱移行细胞癌(TCC)中NS基因的表达,探讨其在TCC中的作用。 相似文献
29.
RNA干扰抑制膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子基因表达对其增殖的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨体外培养膀胱肿瘤细胞BIU-87核干细胞因子(NS)表达在肿瘤发生和肿瘤细胞自身维护中的作用,以及RNAi技术应用于肿瘤治疗的可行性.方法通过RT-PCR和Northern blot方法检测体外培养的BIU-87细胞中NS的表达情况.采用分子克隆手段构建NS基因特异性siRNA表达载体,细胞转染获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体和pcDNA4/C载体的细胞克隆,Northern blot方法检测阳性克隆NS基因表达丰度的变化,并观察其体外增殖能力的变化.结果RT-PCR和Northern印迹杂交结果均显示所检测的BIU-87细胞有较高水平的NS表达,NS在正常人膀胱组织中无表达.Northern blot检测证明获得稳定整合有pcDNA4/C-NS-Silencer载体的细胞克隆NS的表达丰度明显下调,且其体外增殖速率明显降低(P<0.05).结论NS表达在BIU-87细胞体外增殖过程中发挥重要作用,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法. 相似文献
30.
异种移植模型转人a1,2岩藻糖基转移酶基因小鼠显微注射DNA片段的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
目的制备转人琢1,2岩藻糖基转移酶(HT)基因小鼠显微注射DNA片段。方法引物两端设计酶切识别位点,聚合酶链反应(PCR)扩增HTcDNA全长序列,两端含有EcoRⅠ和BamHⅠ酶切识序列;回收HTcDNA片段并与PMD18-T载体连接,EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切纯化质粒鉴定;EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pMD18-HTcDNA重组质粒和pCMV-MCS质粒,回收HTcDNA片段和pCMV-MCS质粒片段,进而连接,转化感受态细菌,纯化质粒对其进行酶切、PCR和测序鉴定;PvuⅠ和NotⅠ依次单酶切重组质粒pCMV-MCS-HTcDNA,回收大小约2.85kb片段,溶于适量显微注射用缓冲液。结果成功构建了重组质粒pCMV-MCS-HTcDNA,酶切回收了2.85kb的显微注射DNA片段。结论通过基因工程技术可以获得转人HT基因小鼠显微注射DNA片段,包含基因表达元件,可以用于显微注射法建立转人HT基因小鼠。 相似文献