日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序。根据测序结果 ,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析。结果经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集。DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列。免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜。结论筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜。     

黄芪复合剂抗血吸虫作用的实验研究

目的 比较黄芪、南瓜子仁和槟榔单一与联用抗血吸虫的效果差异.方法 实验设感染对照、感染后1～10 d用复合中药、感染后8～17 d用复合中药、感染后15～24 d用复合中药、感染后28～37 d用复合中药、感染后1～10 d单用黄芪组、感染后1～10 d单用南瓜子、感染后1～10 d用南瓜子+槟榔、感染后36 d用300mg/kg·d的吡喹酮(PZQ)等9个组,观察以黄芪为主药所组成的中药复合剂对感染小鼠体内不同发育期虫体作用的差异.结果 与平行的感染对照组相比,复合中药用于血吸虫感染后1～10 d组、8～17 d组和15～24 d组的减虫率,分别为36.21%、26.74%和39.04%,肝卵减少率分别为58.6%、32.2%和47.7%,差异均具有统计学意义(P<0.05),且肝表面虫卵结节密度值可见明显减小.在感染后28～37 d复合中药组、感染后1～10 d单用黄芪、单用南瓜子组和南瓜子+槟榔合用组与平行的感染对照组比较,减虫率和肝卵减少率均无统计学差异.结论 黄芪、南瓜子和槟榔组合对发育中的血吸虫具有较好的抗虫效果,明显优于单用黄芪或南瓜子和槟榔组合的抗虫作用.     

双嗜性逆转录病毒感染日本血吸虫细胞的生物学理论与可行性探讨

目的探讨用双嗜性逆转录病毒载体将外源基因导入日本血吸虫（Sj）细胞的生物学理论与实验依据。方法用生物信息学方法对双嗜性逆转录病毒rRam-1受体同源性分布、结构与功能作系统的分析与比较;利用携带外源E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫培养细胞,经PCR和RT-PCR检测感染细胞目的基因（E77.43）的整合与表达。结果根据生物信息学分析结果推断,Sj细胞膜上存在的SjCHGC09605和SjCHGC05362两种蛋白为非分泌性跨膜蛋白,可能具有细胞膜离子转运通道或受体蛋白的功能及双嗜性逆转录病毒感染的膜受体样作用,可能参与病毒对细胞的吸附和穿入过程;利用携带外源E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫培养细胞后,用PCR及RT-PCR检测到目的基因整合与表达,扩增的目的片段大小为330 bp,与理论值相符。结论用载有E77.43基因的双嗜性逆转录病毒感染Sj童虫细胞获得成功,推测SjCHGC09605和SjCHGC05362两种与rRam-1受体同源的蛋白可能是Sj感染过程中起作用的分子。研究结果为下一步用双嗜性逆转录病毒载体转导永生化基因到Sj细胞提供了生物学理论与实验依据。     

社区环境中流通食品的食源性致病菌分析

目的分析H市社区环境中（大型超市与农贸市场）流通食品的微生物污染及食源性致病菌的分布特征和耐药性。方法按《全国食品污染物监测相关实验室手册》（细菌学部分）及其他相关国家标准分离、鉴定五类食品的有关细菌，用纸片琼脂扩散（K—B）法测定细菌耐药性。结果全年中以8月份食品含菌量最大，含蛋白质丰富、水分较多的食品（淡水鱼，海产品）微生物污染严重；农贸市场食品的微生物污染较超市严重；五类食品不同程度被食源性致病菌污染，以猪肉与鸡肉污染为重，沙门菌在五类食品中检出率最高，分别是7．86％与12．42％；农贸市场食品的食源性致病菌检出率（23．44％）比超市（16．29％）高，同时O157：H7的检出率也明显高于超市，分别是2.25％与0．56％；分离的食源性致病菌株对常用抗生素显示了相应耐药性。结论以上结果可作为社区公共卫生及预防、控制食源性疾病流行的策略制订提供相应科学根据。     

壳寡糖抗菌活性的实验研究

目的检测用改良双氧水降解法制备的壳寡糖的体外抗菌活性。方法采用涂布法和滴注法测定壳寡糖对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白假丝酵母菌的抗菌作用。结果壳寡糖的抗菌效果基本一致。壳寡糖对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强 ,0 .5 %的浓度可完全抑制其生长 ;大肠埃希菌次之 ,需 1 %的浓度 ;枯草芽孢杆菌需 2 % ;对白假丝酵母菌的作用最弱 ,需 4 %的浓度。抗菌活性随壳寡糖的浓度增加而增强。结论壳寡糖对 4种供试菌有抑制作用 ,为其进一步应用提供依据     

护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢TGF-β1,P-Smad3及FSHR mRNA表达的影响

目的 观察护卵汤对慢性应激超排卵小鼠卵巢转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、信号蛋白P-Smad3及卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)mRNA表达的影响.方法 建立慢性应激小鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、护卵汤组和生长激素组,另设正常组.在超排卵第3天和注射绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)24 h后,检测各组卵巢TGF-β1、P-Smad3及FSHR mRNA表达.结果 与模型组比较,在超排卵第3天,护卵汤组和生长激素组TGF-β1、P-Smad3及FSHR mRNA表达均显著升高(P<0.01或P<0.05);注射HCG 24 h后生长激素组表达升高更明显(P<0.01).结论 护卵汤可能通过激活TGF-β/Smads信号通路,发挥促进卵泡发育和改善卵巢功能的作用.     

运用Quantity One 软件分析日本血吸虫不同发育时期蛋白组分差异

目的应用Quantity One软件进行图像分析,阐明日本血吸虫不同发育时期蛋白组分的差异。方法以日本血吸虫尾蚴人工感染昆明鼠,分别收集感染前和感染后第8、12、16、20、24天和第28天虫体,用SDS-PAGE平行分离各时点虫体蛋白,用图像分析软件Quantity One4.4比较分析其区带差异。结果图像分析软件Quantity One4.4分析7个不同时点的虫体蛋白区带显示:区带数在0、8、12、16、20、24d和28d虫体中分别为27、30、33、32、31、36条和29条,各时点虫体特异性区带在0、8、12～24d和28d虫体中分别为7、4、8、3条,虫体特异性区带多为低表达量的条带。结论运用图像分析软件能够快速获得日本血吸虫不同发育时期蛋白泳道条带的分析图形,自动计算出蛋白区带数、区带光密度值大小和分子量。     

微生物学检验实验教学模式的探索与改革

通过整合实验教学内容,开设自主设计综合性实验;采用多媒体教学与讨论式教学相结合的实验教学方法;学生参与实验教学全过程;完善实验考核制度,综合评价学生实验技能;指导学生课外课题、实习前的强化训练等多种形式对微生物学检验实验教学模式进行了探索和改革,加强了课程的实践性和实用性,加强了学生学习的自主性和各种综合能力。     

体外循环时血浆脂质过氧化物的变化

本文报告48例心脏手术患者术中不同时点血浆脂质过氧化物(LPO)和红细胞内超氧化物歧化酶(SOD)测定值的变化。结果表明:17例动脉导管未闭患者术中LPO及SOD值无明显变化。31例体外循环患者在体外转流后,LPO迅速升高,SOD显著降低;至心脏再灌流后5 min LPO达高峰,SOD达最低值。其变化程度与体外转流时间有关。心脏再灌流后心律失常患者的LPO升高及SOD降低程度,显著高于无心律失常患者。作者还探讨了体外循环时LPO升高、SOD降低的原因和临床意义。