环磷酰胺联合强的松建立人乳腺癌小鼠移植模型

  目的   将人乳腺癌细胞接种于具有正常免疫功能但受抑制状态的小鼠,以期建立乳腺癌小鼠模型。   方法   将40只雌性BALB/c随机平均分成4组,按环磷酰胺和强的松用量多少分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。将人乳腺癌细胞接种于小鼠背部,观察小鼠成瘤时间、成瘤率、肿瘤的影像、病理学表现及其重要内脏器官转移情况等。   结果   高剂量组成瘤率高,成瘤时间早,且内脏器官转移多,小鼠死亡率高。中剂量组成瘤率较低,成瘤时间较晚,内脏器官转移少,小鼠死亡率低。对照组和低剂量组未见成瘤和小鼠死亡。   结论   本实验成功用环磷酰胺联合强的松在免疫正常的小鼠中建立人乳腺癌小鼠移植瘤模型,较好的模仿乳腺癌在免疫正常的机体里的发生、发展过程。      

心肌钙蛋白Ⅰ对蒽环类化疗的乳腺癌患者心脏毒性的预测价值

目的 评估心肌钙蛋白Ⅰ(CTnI)对接受含蒽环类方案化疗的乳腺癌患者心脏毒性的预测价值.方法 收集186例在南方医院接受含蒽环类方案化疗的乳腺癌患者的病案资料,记录患者化疗前和每个化疗周期CTnI浓度及化疗前和首次化疗开始后第2、4、6月的左心室射血分数(LVEF).据文献报道,当患者血清CTnI≥0.1 ng/ml时,心脏毒性发生率明显升高,据此我们将患者定义为两组,化疗期间血清CTnI≥0.1 ng/ml者为CTnI+组(60例),小于0.1 ng/ml者为CTnI-组(126例).结果 所有患者均未出现充血性心力衰竭(CHF).LVEF较化疗前下降幅度超过10%的患者CTnI+组出现16例,占26.7%(16/60),而CTnI-组出现7例,占5.6%(7/126),两组间有统计学差异(P<0.01).结论 CTBI可作为早期预测蒽环类化疗药物引起心脏毒性的指标.     

Effect of Antisense MBD1 Gene Eukaryotic Expression Plasmid on Expression of MBD1 Gene in Human Biliary Tract Carcinoma Cells

DNAmethylationhasavarietyofimportantfunctionsintheregulationofgeneexpression[1].ManystudiesdemonstratedthatthepathogenesisofbiliarytractcarcinomawascloselyassociatedwiththeaberrantDNAmethylationstatusoftumorrelatedgenes.TheaberrantstatusofDNAmethylationincludedthehypomethylationofonco genesandthehypermethylationoftumorsuppres sorgenes(TSG).IncreasingtheexpressionofTSGandimprovingthefunctionofTSGbyelimi natingitshypermethylationstatusmaybeanewwaytotreatbiliarytractcarcinoma.Toexplorether…     

pcDNA3.1-mTOR质粒体外转染对乳腺癌细胞生长的影响

目的研究信号转导通路mTOR体外对乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用,及对抑癌基因PTEN的负反馈调节的影响。
方法用pcDNA3.1-mTOR真核表达质粒及空载质粒转染MCF-7;Western blot检测转染后mTOR蛋白的表达;流式细胞技术检
测细胞周期和细胞凋亡情况;检测转染后PTEN蛋白的表达。结果转染组细胞的生长速度明显增快,而未转染组和转染空载
体质粒组无明显变化。转染mTOR基因后,PTEN 蛋白的表达明显下降。结论mTOR可能通过PI3K/AKT/PTEN与mTOR信
号转导通路负反馈调节PTEN的表达。mTOR的增高可促进乳腺癌细胞的生长,为mTOR的特异性的抑制剂的运用提供了理
论证据。
     

生酮饮食对小鼠EMT-6乳腺癌生长影响的实验研究

目的 研究生酮饮食(ketogenic diet,KD)对小鼠EMT-6乳腺癌生长的影响及其机制.方法 取40只BALB/c雌性小鼠,建立小鼠EMT-6乳腺癌模型后,随机平均分配到4个饮食组,每组10只,分别给予标准饮食(standard diet,SD),20％糖生酮饮食(20％糖KD),10％糖生酮饮食(10％糖KD)及无糖生酮饮食(NCKD)饲养.观察小鼠肿瘤生长情况、生存时间及血糖和血酮的变化.采用酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测血胰岛素和血胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)的变化.当小鼠肿瘤体积超过1 000 mm3时即为观察终点,处死小鼠.从接种到观察终点之间的天数记为小鼠生存时间.结果 接种后第16天,各KD组肿瘤体积显著小于SD组,SD组肿瘤平均体积为(319.59±36.03) mm3,20％糖KD组为(205.11±42.68) mm3,10％糖KD组为(217.03±35.80) mm3,NCKD组为(248.36±44.01) mm3,差异有统计学意义,F=176.123,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P值均＜0.001.接种后第7天各KD组血糖水平较SD组降低,SD组为(6.16±0.33) mmol/L,20％糖KD组为(2.93±0.20) mmol/L,10％糖KD组为(3.02±0.26) mmol/L,NCKD组为(2.89±0.17) mmol/L,F=421.529,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P＜0.001.接种后第7天各KD组血酮水平较SD组升高,SD组为(0.60±0.15) mmol/L,20％糖KD组为(2.54±0.25) mmol/L,10％糖KD组为(2.67±0.34) mmol/L,NCKD组为(2.65±0.16) mmol/L,F=183.395,P＜0.001;各KD组与SD组之间两两比较差异均有统计学意义,P＜0.001.SD组、20％糖KD组、10％糖KD组和NCKD组的中位生存时间分别为26、34、32和32 d,Log-rank检验显示,SD组与20％糖KD组差异有统计学意义,x2=14.044,P＜0.001;SD组与10％糖KD组差异有统计学意义,x2=10.199,P=0.001;SD组与NCKD组差异有统计学意义,x2=8.038,P=0.005.运用多因素Cox比例风险回归模型分析接种后第14天各KD组血糖、血酮及体质量增长量发现,血糖(P=0.026,RR=2.548,95％CI为1.062～3.064)及血酮(P=0.013,RR=0.272,95％CI为0.059～0.503)均对生存有影响.结论 生酮饮食可抑制小鼠EMT-6乳腺癌的生长,其机制与血糖及血酮的变化相关.     

DNA甲基转移酶1、3b基因共下调对人胆管癌细胞生长的抑制效应

目的观察联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因真核表达载体对人胆管癌细胞QBC-939生长的影响。初步探讨DNMT1、DNMT3b基因在胆管癌发生中的作用。方法分别构建反义DNMT1基因和反义DNMT3b基因真核表达载体,脂质体介导法将两者联合转入人胆管癌细胞QBC-939,Western blot检测转染前后相应蛋白的表达变化,噻唑蓝(MTT)比色法观察各组细胞生长曲线,流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化,裸鼠皮下种植细胞观察成瘤大小。结果(1)Western blot检测证实转染反义基因能使相应蛋白表达水平降低；(2)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的生长曲线,使细胞增殖减慢,其中以前者为甚；(3)联合转染反义DNMT1、DNMT3b基因和单独转染反义DNMT1能影响QBC-939的细胞周期,使之阻滞于G_1期,使细胞凋亡率从(1．63±0．27)%分别增加到(18．47±1．46)%和(6．19±0．78)％；(4)联合转染反义DNMTl、DNMT3b基因和单独转染反义DNMTl能使裸鼠皮下种植成瘤体积减小。生长延缓,前者效果更为明显；(5)在上述效应检测中,联合转染空质粒和单独转染反义DNMT3b基因实验组对QBC-939细胞的生长无明显影响。结论(1)通过联合转染反义DNMT1和DNMT3b基因真核表达载体,可同时下调DNMT1和DNMT3b在QBC-939细胞中的表达,并能在体内外抑制胆管癌细胞的生长,促进凋亡的发生,其效果明显优于单独转染DN—MT1反义基因。(2)在DNA甲基化的过程中,DNMT1起着主要的作用,DNMT3b扮演着协同的角色,两者可能通过甲基化途径与胆管癌的发生有关。