乳鼠成骨细胞的原代培养与鉴定

目的：验证及改良成骨细胞原代培养常用方法，探讨该方法的可行性和应用价值。方法：取材于出生2～3d小鼠颅骨，以含20％胎牛血清的DMEM培养液进行培养，采用胶原酶消化法分离成骨细胞，并进行细胞接种与传代。细胞采用Gomori钙钴法染色并进行细胞形态观察，鉴定成骨细胞起源，根据细胞的生长曲线以及贴壁率观察细胞的生长情况。结果：原代培养48h后，大量细胞贴壁生长，呈长梭形或有2～3个突起，胞质透亮、饱满，7d后细胞铺满整个平皿底面。所得细胞经Gomori钙钴法鉴定，证实为成骨细胞。细胞接种后第1个24h为细胞潜伏适应期，第2～7个24h生长曲线基本为线性曲线，是细胞的对数生长期。细胞贴壁主要发生在接种10h之内。结论：采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养方法。     

砷对细胞和生物作用的研究进展

砷化物对于生物是有毒物质，可以导致细胞的染色体异常和基因突变。砷化物还可以改变某些基因的功能，诱导癌症的发生。生物接触砷化物后，细胞内一些基因表达发生了改变。研究表明原核生物及真核生物对砷化物的作用都产生了分子水平的应答。通过研究砷化物与基因相互作用的关系，对于揭示细胞和生物同砷化物的分子作用机制，阐明各种细胞和生物的抗砷分子机制有重要意义。另外，目前发现三氧化二砷能通过不同细胞信号传导途径诱导细胞凋亡。     

氟对人血清脂质过氧化物、巯基和尿羟脯氨酸/肌酐值的影响

吐鲁番夏季炎热干旱,居民饮水量很大,致摄氟量增加引起氟中毒流行。本文对该区两个水氟含量不同的生产队维吾尔族农民血清LPO、-SH和尿Hyp/Cr值进行了测定分析。结果显示:两队农民血清-SH含量虽有差别,但无显著性差异(P>0.05)。水氟含量(0.91mg/L)较高的A队农民血清LPO和尿Hyp/Cr值均高于水氟含量(0.58mg/L)低的B队农民,差别均有显著性。LPO含量分别为:3.47±0.75nmol/ml和2.99±0.69nmol/ml(P<0.05);尿Hyp/Cr值分别为:29.20±9.98mg/g和22.29±7.52mg/g(P<0.01)。表明脂质过氧化和胶原分解代谢受水氟的影响。提示血清LPO和尿HYP/Cr值可作为氟中毒的辅助诊断指标。     

新银盐光度法连续分步测定砷中毒病区水中As(Ⅲ)和As(Ⅴ)含量

目的：对新疆奎屯地方性砷中毒病区水样中的砷进行价态分析，研究砷中毒的发病机理。方法：采用新银盐光度法，用硼氢化钠（ＮａＢＨ４）作还原剂，先在醋酸醋酸钠缓冲溶液（ｐＨ５．２）中将Ａｓ（Ⅲ）转化为ＡｓＨ３，加入盐酸将样品溶液调至ｐＨ≤１，继续将Ａｓ（Ⅴ）转化为ＡｓＨ３，分别被硝酸硝酸银聚乙烯醇乙醇混合液显色。结果：实现了连续分步测定Ａｓ（Ⅲ）和Ａｓ（Ⅴ），检测限为００１５μｇ。应用此法测得新疆奎屯砷中毒病区深井水中Ａｓ（Ⅲ）和Ａｓ（Ⅴ）含量，其中Ａｓ（Ⅲ）的含量为１０％，Ａｓ（Ⅴ）的含量为９０％。结论：新银盐光度法测Ａｓ（Ⅲ）和Ａｓ（Ⅴ）含量，相对标准偏差在４％以内，回收率为９４％～１０４％，具有较高的精密度和准确度。     

三价砷甲基转移酶mRNA相对表达与砷甲基化关系的研究

目的观察三价砷甲基转移酶[As(Ⅲ)MT]mRNA在砷中毒患者、病区对照和非病区对照人群中的表达及其与尿砷甲基化水平的关系。方法选取饮水型砷中毒中重度患者、轻度患者、病区对照和非病区对照各6例,采用实时定量RT-PCR技术测定研究对象的淋巴细胞中三价砷甲基转移酶As(Ⅲ)MTmRNA表达,采用原子荧光AFS-9130、形态分析SAP-10检测尿无机砷(iAs)、一甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)、总砷(TAs)含量。按PMI=(MMA+DMA)/TAs,SMI=DMA/(MMA+DMA)分别计算一甲基化指数和二甲基化指数。结果中重度组,轻度组、病区对照组人群iAs、MMA、DMA、Tas、PMI、As(Ⅲ)MTmRNA均显著高于非病区对照人群(P<0.05);As(Ⅲ)MTmRNA分别与MMA%(r=0.485,P=0.041)和PMI(r=0.476,P=0.046)呈显著正相关。结论砷暴露可能促进As(Ⅲ)MTmRNA高表达进而引起PMI水平增高导致MMA产生过多。     

E-钙黏蛋白在浸润性乳腺癌分子分型中的差异性表达及临床病理意义

目的:研究E-钙黏蛋白(E-cadherin)在浸润性乳腺癌中的表达情况,基于乳腺癌分子分型探讨其表达特点和临床病理意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测87例浸润性乳腺癌中E-cadherin的表达情况.结果:E-cadherin在浸润性乳腺癌中呈现出高表达;E-cadherin的表达在浸润性乳腺癌分子分型之间具有统计学差异(P＜0.05);E-cadherin在浸润性乳腺癌中的表达同组织学分级、淋巴结转移、病理类型和分子分型相关(P＜0.05),同患者年龄、肿瘤大小和临床分期无关.结论:E-cadherin在浸润性乳腺癌分子分型中的差异性表达可能在浸润性乳腺癌的发生、发展和转移中发挥重要作用,可以作为乳腺癌诊断、治疗和预后判断的分子标记和分子分型的有益补充.