融合蛋白TRX-hJagged1原核表达载体的构建及其在BL21中的表达

本研究旨在构建原核表达载体并原核表达Notch配体Jagged1。构建不同长度但均包含DSL区的原核表达载体pET-hJagged1,将构建重组原核表达载体pET—hJagged1转化大肠杆菌BL21后,予以IPTG诱导,优化诱导条件,使目的蛋白TRX—hJagged1在上清中有较大量表达。诱导工程菌并以镍柱纯化对可溶性的目的蛋白进行纯化。结果表明,成功构建了原核表达载体pET—ldaggedl（Bg1Ⅱ）、pET—hJagged1（Hind1）及pET-hJagged1（stuI）,但仅pET—hJagged1（StuI）表达可溶性的TRX—hJagged1。通过镍柱纯化获得了较单一的TRX—Jagged1蛋白,WesternBlot证实了其为目的蛋白。结论：成功地构建了原核表达载体pET—hJagged1,并在原核表达系统表达了TRX-Jagged1融舍蛋白,为进一步研究Jagged1在淋巴造血系统中的作用奠定了基础。     

人Delta-like1ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体的构建及表达

目的:构建人Delta-like1ext-Fc融合蛋白毕赤酵母表达载体PIC-hDll1ext -Fc,并在毕赤酵母GS115中表达.方法:以pEF-BOSneo-hdll1ext-Fc为模板PCR扩增人Delta-like1胞外段.通过DNA重组构建毕赤酵母表达载体PIC-hDll1ext.-Fc.用MD平板筛选重组子,G418筛选高拷贝转化子,经甲醇诱导表达后,SDS-PAGE、Western blot分析表达蛋白.结果:hDll1基因的胞外段被有效地扩增.序列分析表明,所构建的含hDll1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同,融合蛋白hDll1extFc得到正确表达.结论:成功地扩增了人Delta-likel胞外段,构建了hDll1ext-Fc融合基因的毕赤酵母表达载体PIC-hDll1extFc,并在毕赤酵母中正确表达,为进一步研究奠定了实验基础.     

病原生物学实验教学方法的改革与应用

本文对病原生物学实验教学中自主设计性教学、启发互动式教学、因材施教与重点培养、多样化的教学手段以及多元化的考核方式进行了探讨。     

海马干细胞移植对癫癎鼠脑电影响的初步研究

目的研究神经干细胞移植对癫癎鼠脑电的影响,为神经干细胞移植治疗癫癎提供理论依据.方法分离、培养新生鼠海马干细胞,将其移植至海人酸(KA)所致癫癎模型鼠的右侧海马,比较移植组及未移植组大鼠在移植前和移植后1周、4周、8周及24周海马及杏仁核的脑电变化.结果海马干细胞移植可减少癫癎动物脑电的痫性发放,并降低癫癎波幅约50%.结论神经干细胞移植对于KA诱发癫癎鼠的癫癎具有一定的抑制作用,但其具体作用机制还有待于进一步的研究.     

结肠癌EMT的发生中包含IL-8和CXCR-1调节的趋化作用

上皮细胞间质转化态(epithelial mesenchymaltransition, EMT)是胚胎发育、组织重建和伤口修复中的基础过程。另 外,许多上皮肿瘤,包括结肠、直肠的肿瘤发生EMT过程的 肿瘤易于侵袭。在一种新的EMT结肠癌模型中,炎症细胞 因子TNF α加速了这种由TGF β介导的EMT过程。他们 报道了TNF α刺激使化学趋化因子IL 8表达的上调,并且此 种上调依赖于转录因子NF κB。值得注意…     

偏头痛对中年女性患者认知功能的影响

目的 观察中年女性偏头痛患者的认知功能水平变化.方法 通过面对面结构会晤进行筛选,根据国际头痛学会标准对患者进行偏头痛诊断,进行蒙特利尔认知评估北京版量表(Mont real Cognitive Assessment,MoCA)评定,包括视空间执行能力、命名、记忆、注意、语言流畅、抽象思维、延迟记忆、定向力方面的认知评...     

氨甲蝶呤单次肌注在异位妊娠保守治疗中的应用

目的:探讨氨甲蝶呤单次肌注在异位妊娠保守治疗中的效果.方法:回顾分析保守治疗异位妊娠26例,应用氨甲蝶呤50 mg/m2单次肌注的效果.结果:成功率为92.3%,仅2例需再行手术治疗.结论:氨甲蝶呤单次肌注在早期诊断的异位妊娠保守治疗中方法简便,效果确定.     

静滴凯西莱致过敏反应2例

0　引言　凯西莱 (硫普罗宁 )是一种新型含游离巯基的甘氨酸衍生物 ,无论对急、慢性病毒性肝炎的症状及肝功能谷丙转胺酶和胆红质的异常均有较好的改善作用 ,凯西莱还可减轻肿瘤患者放化疗后的消化道症状 ,同时又能升高白细胞的数量 ,改善和提高患者的生活质量 .凯西莱无明显不良反应 ,2 0 0 1年我院发生 2例过敏反应 ,为了引起同行重视 ,现报告如下 :1　病例报告　例 1:患者男 ,因患骨髓增生异常综合征收入院 ,次日静滴 5 0 g· L- 1 葡萄糖 2 5 0 m L加止血敏 3.0 ,10∶4 0 ,予 5 0 g· L- 1葡萄糖 2 5 0 m L+凯西莱 0 .2 g,以 4 0～ 5 …     

凋亡相关基因bak在原发性肝癌中的表达及意义

目的 研究细胞凋亡相关基因bak在原发性肝癌组织中的表达,探讨bak基因在原发性肝癌发生演变过程中的意义。方法 采用原位分子杂交技术检测46例原发性肝癌组织中bak mRNA的分布及表达。结果 在46例原发性肝癌组织中,bak mRNA的检出率为58.7%（27／46）;在16例癌旁组织中,9例有bak mRNA的表达(56.3％);在4例正常肝组织标本中,仅1例有bak mRNA的弱表达。在癌组织与癌旁组织中,bak基因表达无显著差异（P＞0.05）;但在原发性肝癌中,bak mRNA的表达Ⅱ级组织强于Ⅲ级组织（P＜0.05）。结论 bak mRNA的表达可能与原发性肝癌的分化程度有关,并在其发生过程中起着某种作用。     

盐酸普鲁卡因国内外合成工艺概述

盐酸普鲁卡因又名奴佛卡因,化学名为对氨基苯甲酸-β-二乙胺基乙酯盐酸盐,是一种局部麻醉药,能阻断周围神经末梢和纤维的传导,使相应的组织暂时丧失感觉,而起麻醉作用。在医疗上广泛用于浸润麻醉、传导麻醉、脊椎麻醉、硬膜外麻醉,以及封闭疗法等方面,疗效确实,使用安全,刺激性及毒性均小,且无药瘾。近年来,又经临床证明与其它药物制成复合制剂,能增强活力,防止衰老,故又可用于抗老疗法。罗马尼亚创制的H_3(Gerovital),国内制品益康宁片和复方益康宁片均以普鲁卡因为主药,用于神经衰弱,植物性神经功能失调,以及防治冠心病及脑动脉硬化等;另外对斑秃和更年期综合征亦有一定疗效。尚有报道能促进动植物加快生长。