中国沿海地区汉族男性人群白细胞介素-1β-31C/T基因多态性与痛风的易感性研究

目的 探讨山东省沿海地区中国汉族男性群体的白细胞介素(IL)-1β启动子区rs1143627(-31C/T)基因多态性的分布状况及其与痛风易感性之间的关系.方法 选取208例痛风患者和210名健康对照者,应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(RFLP)技术,检测中国汉族男性群体的IL-1β启动子区rs1143627(-31C/T)位点基因多态性与痛风发病的遗传易感性的关系.采用Hardy-Weinberg检验确认标本的群体代表性,数据分析采用χ2检验和t检验.结果 痛风组中IL-1β启动子区-31C/T位点CC,CT和TT基因型分别为32.7%,43.3%和24.0%,健康对照组分别为31.9%,46.2%和21.9%,2组比较差异无统计学意义(χ2=0.427,P>0.05);2组的等位基因频率C和T间差异也无统计学意义(分别为54.3%,55.0%;45.7%,45.0%;χ2=0.038,P>0.05).经χ2检验,IL-1β基因-31C/T位点基因多态性与痛风病的危险因素无显著性关联.结论 尚不能认为中国沿海地区汉族男性人群中IL-1β启动子区rs1143627(-31C/T)基因多态性与痛风有关联性.

Abstract：

Objective To explore gene polymorphism of the C/T genotype of rs1143627 in the promoter of IL-1β gene in male population living in the coastal area of Shandong, and thus to investigate the relationship between the gene polymorphism of IL-1β and gout. Methods A total of 208 gout patients and 210 healthy controls were enrolled. The possible association between the polymorphism of IL-1 β -3 1C/T and gout in Chinese were investigated and genotype frequencies and allelic frequencies was calculated by polymerase chain reaction (PCR)-restriction fragment length polymorphism (RFLP) method. Hardy-Weinberg was used to verify the representativeness of the sample. Comparisons between the groups were performed with χ2 test and t-test. Results The frequencies of CC, CT, and TT genotypes were 32.7%, 43.3% and 24.0%,respectively among gout patients, while they were 31.9%,46.2% and 21.9%, respectively among the controls.There was no statistically difference in IL-1β -31C/T genotype frequencies between gout patients and controls (χ2=0.427, P>0.05). The allele frequencies of C and T in gout cases were different from those in the controls (54.3%, 55.0%; 45.7%, 45.0%; χ2=0.038, P>0.05). Moreover, no association between IL- I β-31 C/T genotypes and risk factors for gout were observed in gout cases by χ2 test. Conclusion Results of the present study suggest that the C/T genotype of rs1143627 in the promoter of IL-1β gene is not associated with gout in male population living in the coastal area of Shandong.     

登革2型病毒NGC株E基因部分序列原核蛋白表达

目的:构建登革2型病毒NGC株E基因区1～476 bp的原核表达载体并进行原核表达.方法:将登革2型病毒NGC株E基因区部分序列克隆入原核表达载体pET28a(+),命名为pET28a(+)-En;经酶切、PCR及测序鉴定后转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE、Western印迹鉴定表达蛋白;对表达蛋白进行纯化,并滴定对C6/36细胞的TCID50.结果:(1)成功构建了pET28a(+)-En原核表达重组质粒,SDS-PAGE分析表明,E基因区部分序列获得高效表达,相对分子量约为23 kD,表达量约占菌体总蛋白的29%;Western印迹表明该目的蛋白可与登革2型病毒鼠单克隆抗体结合;(2)用Ni柱亲和层析法纯化原核表达蛋白,纯度达90%;(3)DEN-2 NGC株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞的TCID50为10-4.88/0.1 ml.结论:pET28a(+)-En可在BL21(DE3)菌株中高效表达,DEN-2 NGC株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞有一定的细胞毒作用.     

浅-中-浅低温高钾氧合血对心肌保护的临床分析

目的通过临床随机对照试验，比较浅-中-浅低温高钾氧合血与高钾氧合冷血对心肌保护的作用。方法将20例心脏瓣膜病患者，随机分成两组：采用自配含5％KCI的停跳液与氧合血按1：50左右比例配成浅-中-浅低温高钾氧合血经冠状动脉顺行灌注（实验组），氧合血与St Thomas停搏液按4：1混合成高钾氧合冷血经冠状动脉顺行灌注（对照组）。观察体外循环时间，升主动脉阻闭时间，自动复跳率、强心药使用时间、机械通气时问、ICU停留时间。结果两组在观察体外循环时间，升主动脉阻闭时间无差别（P〉O．05），自动复跳率实验组明显高于对照组（P〈O．05）。强心药使用时间、机械通气时间、ICU停留时间方面，实验组明显低于对照组（P〈0．05）。结论在心肌保护方面浅-中-浅低温高钾氧合血优于高钾氧合冷血。     

PCR对弓形虫感染家兔血液中虫体DNA的动态检测

目的了解弓形虫感染家兔血液中是否有虫体存在,探明虫体在血液中动态变化情况。方法用不同剂量的RH株弓形虫速殖子经腹腔感染家兔6只。在家兔感染前后分别采集血液,抗凝处理后,-40℃冻存备用,用普通PCR检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫DNA。结果5只家兔在感染后的6~14d死亡,仅1只家兔在感染后的6~72d,用PCR检测手段在血液中均可检测到弓形虫DNA。结论弓形虫感染雄兔血液中有虫体存在。     

颈椎外伤手术麻醉35例分析

近年来,颈椎外伤手术呈显著上升趋势,因颈椎外伤造成颈椎损伤,致呼吸循环功能及肌力受损,手术和麻醉风险高。我们共行颈椎外伤手术麻醉35例,效果满意。现分析报告如下。1临床资料1.1一般情况35例中,男30例,女5例;年龄23~73岁,平均38.6岁。C2骨折4例,C3~7骨折或脱位31例。1.2手术方式前路减压植骨融合钢板内固定30例,后路减压植骨融合钢板内固定2例,前路减压植骨融合钢板内固定加后路减压术3例。1.3麻醉方法本组病例采用静脉吸入复合全身麻醉,诱导期继续颅骨牵引或颈托固定头部,根据颈部活动度和气管插管难易酌情选择快或慢诱导。(1)快诱导:咪达唑仑0.05~0.08mg/kg体重,芬太尼2.0~3.0μg/kg体重,丙泊酚1~1.5mg/kg体重,维库溴铵0.08~0.12mg/kg体重。(2)慢诱导:咪达唑仑0.05~0.08mg/kg体重,环甲膜穿刺气管内注射2.0%利多卡因2~3ml,0.3%丁卡因咽喉部表面麻醉。术中监护血压、心电图、动脉血氧饱和度、呼气末二氧化碳分压和尿量。1.4结果(1)快诱导29例中,插管1次成功28例,仅1例2次成功。术中出现显著心动过缓2例;因短时间内大失血出现严重...     

乳癌改良根治术气管插管两种复合全麻的对比

目的研究乳腺癌改良根治术两种不同全麻方法。方法选择32-65岁60例乳腺癌患者,采用随机方法分为硬吸组（IE组30例）和静吸组（IV组30例）,比较两组血流动力学、术后苏醒情况及拔管时间。结果两组拔管时间比较差异无统计学意义,拔管后意识恢复均较好,拔管后伤口无痛感,舒适度IV组最佳,IE组次之。结论采用静吸、硬吸复合全麻方法,患者较安全舒适,且静吸复合方法更好。     

IL-18基因启动子区-607C/A位点多态性与痛风发病相关性

目的探讨山东汉族人白细胞介素-18(IL-18)基因启动子区-607C/A位点单核苷酸多态性与痛风易感性之间的关系。方法应用聚合酶链反应-序列特异性引物技术,检测100例痛风病人和100例非痛风病人IL-18基因启动子区-607C/A单核苷酸多态性位点的基因型。结果非痛风病人和痛风病人IL-18基因启动子区-607C/A位点3种基因型频率分别为:AA型0.18(18/100)、0.18(18/100),AC型0.58(58/100)、0.67(67/100),CC型0.24(24/100)、0.15(15/100)。IL-18基因启动子区-607C/A位点的基因型和等位基因频率在两组之间分布无明显差异。结论山东汉族人群中IL-18基因启动子区-607C/A位点存在多态性,但痛风与该多态性无相关性。     

DEN-2分离株E基因部分序列原核蛋白表达

目的 通过构建登革2型病毒(DEN-2)临床分离株(B株)E基因区1-476bp的原核表达载体,进行原核表达,为DEN-2 E蛋白功能的研究提供基础依据.方法 将DEN-2 B株E基因区部分序列克隆入原核表达载体pET28a(+),命名为pET28a(+)-Eb;经酶切、PCR及测序鉴定后转化BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印迹(Western blot)鉴定表达蛋白;对表达蛋白进行纯化,并滴定对C6/36细胞的细胞半数致死量(TCID50).结果 成功构建了pET28a(+)-Eb原核表达重组质粒;SDS-PAGE分析表明,E基因区部分序列获得高效表达,其相对分子量约为23 kDa,表达量约占菌体总蛋白的29%;Western blot表明,该目的 蛋白可与DEN-2鼠单克隆抗体结合.用Ni柱亲和层析法纯化原核表达蛋白,纯度达90%.DEN-2 B株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞的TCID50为10-5.31.结论 pET28a(+)-Eb可在BL21(DE3)菌株中高效表达;DEN-2 B株E基因部分序列原核表达蛋白对C6/36细胞有明显的细胞毒作用.     

疼痛对创伤患者血浆TNF-α及胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的影响

目的探讨疼痛对创伤患者血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的影响。方法入选对象为我院住院部创伤后疼痛患者40例(疼痛组)和镇痛患者40例(镇痛组),另选取30例健康体检人员为正常对照组。测定各组血浆TNF-α、空腹血糖、胰岛素、胰高血糖素和皮质醇水平,并观察稳态模式评估法胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和β细胞胰岛素分泌指数(HOMA-β)变化。结果(1)疼痛组空腹血浆TNF-α、空腹血糖、空腹胰岛素、胰高血糖素和皮质醇水平均明显高于镇痛组(P均<0.01),镇痛组上述指标明显高于正常对照组(P均<0.01),疼痛组上述指标明显高于正常对照组(P均<0.01)。(2)疼痛组HOMA-IR明显高于镇痛组(P<0.01),镇痛组HOMA-IR明显高于正常对照组(P均<0.01),疼痛组HOMA-IR明显高于正常对照组(P均<0.01)。(3)疼痛组HOMA-β明显低于镇痛组(P<0.01),镇痛组HOMA-β明显低于正常对照组(P<0.01),疼痛组HOMA-β明显低于正常对照组(P<0.01)。结论疼痛应激促进血浆TNF-α升高,并在创伤患者胰岛素抵抗和β细胞功能不全中发挥重要作用,控制疼痛有助于改善创伤后高血糖症。     

乙型肝炎病毒表面抗原低水平阳性血清的病毒核酸载量分析

目的：对电化学发光法检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）低水平阳性标本的病毒核酸载量进行分析,判断感染状态。方法收集湖北省中山医院检验科2012年6月至2012年10月电化学发光检测HBsAg COI值在0．8～5．0的血清标本130份,进行荧光定量PCR检测,获得 HBV-DNA载量值。结果130份标本中 HBV-DNA检测阳性2份。结论 HBsAg低水平阳性条件下联合 HBV DNA检测对乙型肝炎诊断有重要的临床价值。