靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段.     

INVESTIGATION ON MODEL OF INFLAMMATORY PLEURAL EFFUSION IN GUINEA PIGS

Objective To establish an animal model of inflammatory pleural effusion.Methods Forty guinea pigs were divided into two groups: experimental group with 7 subgroups and control group. In the experimental group the right chest cavity of each guinea pig was injected with 0.8～1.0 ml of 1% carrageenan, and guinea pigs of each subgroup were killed and observed respectively on day 1, 2, 3, 5, 7, 10 and day 14 after injection.Results Occurring on day 1(within 24 hours), pleural effusion reached the maximum on day 2～3 after injection, so did the neutrophil count in pleural effusion and inflammation of both pleura and lungs and then gradually decreased. The fibrosis and adhesion of pleura appeared on day 7 and were obvious on day 10. The encysted pleurisy was formed on day 14.Conclusion The carrageenan is an ideal pleural inflammatory inducer. This animal model is useful for studying pleural effusion.     

常山酒润麸炒好

常山,辛苦微寒,有小毒,具有截疟,涌吐痰涎的功效。但由于生用煎服后能引起恶心呕吐,故作截疟均用其炮制品。传统的炮炙方法认为酒润后炒炙能改变其不良反应。有的将其炒至表面呈深黄色,并略显黑斑为度,有的则只炒至表面微干即得。为了更好的消除常山的副作用。减低其毒性反应。并使其片型美观,作者通过运用酒润后麸炒的方法,将常山炒至表面呈中黄色为度,此法炮制的常山外观质量较佳。方法如下:     

羟基红花黄色素A通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路缓解哮喘气道炎症的研究

目的 探讨羟基红花黄色素A对过敏性哮喘豚鼠气道炎症的影响,并探讨其作用机制是否与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路有关.方法 选取40只雄性豚鼠随机分为正常组(Control)、模型组(OVA)、羟基红花黄色素A低剂量组(HSYA-L 50g/kg)、羟基红花黄色素A高剂量组(HSYA-H 100g/kg)和地塞...     

犬不同部位BMSCs对牙周膜细胞增殖和成骨分化的影响

目的:研究犬髂骨骨髓基质细胞(iliac bone marrow stromal cells,I-BMSCs)和犬颌骨骨髓基质细胞(maxilla bone marrow stromal cells,M-BMSCs)对犬牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)增殖和成骨分化的影响,了解不同部位来源的骨髓基质细胞对牙周膜细胞调控作用的差异性。方法:原代培养犬髂骨骨髓基质细胞、颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞。分别建立犬髂骨和颌骨来源的骨髓基质细胞与牙周膜细胞的Transwell共培养体系;制备骨髓基质细胞条件培养液培养牙周膜细胞,MTT法检测牙周膜细胞生长曲线;利用实时荧光定量PCR法检测牙周膜细胞成骨相关基因核心结合因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的变化;Westernblot法检测牙周膜细胞Runx2和OCN蛋白的表达变化。结果:髂骨骨髓基质细胞条件培养液能促进牙周膜细胞的增殖;颌骨骨髓基质细胞条件培养液对牙周膜细胞增殖有抑制作用;QPCR检测到共培养组牙周膜细胞Runx2、OCN、ALP基因表达高于对照组,Westernblot检测到共培养组牙周膜细胞的Runx2和OCN的蛋白表达高于对照组,且颌骨骨髓基质细胞诱导牙周膜细胞成骨分化效果更显著。结论:犬颌骨骨髓基质细胞条件培养液可能会抑制牙周膜细胞的增殖,相较于髂骨骨髓基质细胞,颌骨骨髓基质细胞促进牙周膜细胞成骨分化效果更显著,颌骨骨髓基质细胞和牙周膜细胞共同作为种子细胞可能更有利于牙周组织再生。     

消炎抗菌可溶止血纱布预防干槽症60例

目的 评估消炎抗菌可溶止血纱布对预防下颌阻生智齿拔除术后干槽症的作用. 方法 将120例拔除下颌阻生智齿的患者随机分成试验组和对照组,每组60例. 试验组在牙拔除术后牙槽窝内植入消炎抗菌可溶止血纱布,对照组在牙拔除术后牙槽窝内不放置任何填塞物,对两组病例术后干槽症的发生率进行对比研究. 结果 试验组和对照组干槽症的发生率分别为3.3%和18.3%,试验组干槽症的发生率明显低于对照组（P＜0.01）. 结论 下颌阻生智齿拔除术后牙槽窝内植入消炎抗菌可溶止血纱布能有效预防干槽症的发生.     

瘦素和血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨瘦素和血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及两者之间的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测40例NSCLC及其癌周正常肺组织中瘦素、VEGF表达.结果 瘦素及VEGF在NSCLC中表达均高于癌周正常肺组织(85%vs.40%和75%VS.30%)(P<0.05),且两者的表达呈正相关(r=0.736,P<0.01).其与肿瘤的淋巴转移情况、分化程度及TNM分期密切相关,但与患者年龄、性别、肿瘤类型没有相关性.结论 瘦素和VEGF与NSCLC的发生密切相关.瘦素可能通过上调VEGF的表达而在NSCLC的浸润和转移中发挥了一定的作用.