P53和nm23基因的表达与喉癌颈淋巴结转移的相关性研究

目的：探讨P53和nm23基因的表达对喉癌颈淋巴结转移的影响。方法：通过免疫组化方法，对42例喉癌病人标本中P53和nm23蛋白表达进行检测。结果：P53和nm23蛋白阳性表达率分别为47．62％和57．1％。P53和nm23蛋白阳性的表达与病人性别、年龄、组织学分级和临床分期无显性差异(P＞0．05)，P53蛋白阳性表达与淋巴结转移呈正相关(P＜0．05)，而nm23蛋白阳性表达与淋巴结转移呈负相关(P＜0．05)。结论：P53基因阳性表达和nm23基因阴性表达的喉癌易发生颈淋巴结转移。     

乳腺癌中微小卫星不稳定性的研究及其临床意义

目的：探讨微小卫星不稳定性（MIN）在乳腺癌发生中的作用及其临床意义。方法：应用PCR-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术。结果：50例乳腺癌患者MIN阳性率为28％，MIN阳性率与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、临床分期及组织分化程度无关（P＞0．05），但有淋巴结转移的患者MIN阳性率明显高于无淋巴结转移者（P＜0．05）。结论：提示MIN是乳腺癌发生的原因之一，并可能在乳腺癌淋巴结转移过程中起正性调控作用。     

RNAi沉默RhoC基因对肝癌细胞生长和转移潜力的影响

目的 研究RhoC基因沉默对肝癌细胞生长和转移潜力的影响.方法 基因重组法构建小干扰RNA表达载体,沉默肝癌细胞RhoC基因表达;平板克隆实验检测细胞生长潜力,半定量RT-PCR法检测细胞周期蛋白和MMPs表达水平.结果 RNAi组克隆形成百分数显著低于对照组(20.33±5.42%和70.58±10.10%,P<0.01);RNAi组细胞CyclinD1表达显著低于对照组(0.45±0.21和1.25±0.24,P<0.05),而P21基因表达则显著高于对照组(1.07±0.23和0.47±0.11,P<0.05);RNAi组MMP-2基因表达显著低于对照组(0.38±0.13和1.41±0.25,P<0.01);与MMP-2相似,RNAi组MMP-9基因表达水平也显著低于对照组(0.44±0.17和1.36±0.18,P<0.01).结论 基因沉默RhoC能够显著抑制肝癌细胞生长和转移潜力,为靶向RhoC肿瘤基因治疗奠定了实验基础.     

人喉癌P_（53）、Rb基因突变的PCR－SSCP检测

应用聚合酶链式反应一单链构象多态分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ分析）技术，检测了喉癌中抗癌基因Ｐ５３第５～８和１１外显子及Ｒｂ基因第２０外显子的突变。结果表明：Ｐ５３、Ｒｂ基因突变与癌组织病理分化程度有关，中、低分化癌的突变例数明显多于高分化癌；Ｐ５３、Ｒｂ基因突变失活与喉癌发生、发展及恶性度有关。应用上述快速敏感的检测方法检测Ｐ５３、Ｒｂ基因突变，对判断喉癌恶性度及估计预后有一定的实用价值。     

稳定过表达紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7的生物学表型的影响

目的 探讨紧密连接蛋白claudin-6过表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响.方法 用脂质体法将含有claudin-6的真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7后,采用RT-PCR、Western印迹和细胞免疫荧光的方法进行稳定克隆的筛选和鉴定;采用MTT法和克隆形成实验检测细胞生长情况;采用划痕法和Boyden小室体外侵袭实验检测细胞迁移和侵袭性.结果 建立了稳定表达claudin-6基因的4株单克隆(C1,C2,C3,C4);细胞免疫荧光结果显示,claudin-6的表达主要定位于细胞膜;与对照组和空载体组相比,稳定表达claudin-6的MCF-7细胞生长缓慢,转染6 h时吸光度A值CI为1.62,C2为1.25,C3为1.30,C4为1.58与对照组A值1.78及空载组1.82比较明显降低.其克隆形成率CI为0.25,C2为0.17,C3为0.26,C4为0.21明显低于对照组(0.53)和空载组(0.45);细胞的迁移性、侵袭性被抑制.结论 claudin-6的过表达能够抑制MCF-7细胞的生长和转移等恶性表型,说明紧密连接蛋白claudin-6作为乳腺癌表型抑制基因在乳腺癌发生及转移中起负性调控作用.     

吉林省地区汉族和朝鲜族健康人群ACE基因多态性分布的研究

目的 分析我国吉林省地区朝鲜族和汉族人群血管紧张素转换酶(angiotersin converting enzyme,ACE)基因多态性的分布.方法 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)等技术检测81名健康汉族和96名朝鲜族ACE基因插入/缺失(I/D)多态性及其分布.结果 汉族人群Ⅱ型、ID型和DD型频率分别为34.38%,28.12%和37.50%;朝鲜族人群分别为38.27%,19.75%和41.98%,两组ACE基因基因型的分布差异无显著性(P=0.433);汉族Ⅰ等位基因总数为78,D等位基因总数为84,朝鲜族Ⅰ等位基因总数为93,D等位基因总数为99,两组等位基因的分布差异亦没有显著性(P=0.957).结论 中国吉林省地区朝鲜族和汉族健康人群中ACE基因I/D多态性及等位基因型的分布没有明显差异.     

老年冠心病病人血清脂质水平研究

测定１０２例老年冠心病病人血清ＴＣ、ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＡ１和ＡｐｏＢ含量并计算ＡｐｏＡ１和ＡｐｏＢ的比值，与１００例健康人进行比较。结果表明：冠心病病人ＡｐｏＢ明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ低于对照组（Ｐ＜０．０５）。９１．２％男性病人和７８．９％女性病人ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ低于对照组，男女之间下降比例有差异，提示ＡｐｏＡ１／ＡｐｏＢ比值下降同样是老年冠心病病人的危险因素     

喉鳞癌组织中Rb基因突变的分析

目的:检测喉鳞状细胞癌组织中Rb基因突变的具体位置和内容,分析其在喉癌发生发展中的意义,为基因诊断和基因治疗提供依据.方法:应用PCR-SSCP-DNA测序技术,选择Rb基因第20外显子的引物,对50例喉鳞状细胞癌组织及12例正常对照进行突变的检测.结果:50例喉癌患者的喉癌组织中Rb基因的突变率为12%,突变以点突变为主,突变均引起氨基酸的改变.Rb基因的突变与临床分期、病理分化程度及淋巴结转移间无相关性(P>0.05).结论:Rb基因突变导致的喉癌细胞不能产生有功能的Rb蛋白可能是喉癌发生的原因之一,但Rb基因的突变并不是喉鳞癌的常发事件.     

PCR直接测序方法及其在分子肿瘤学研究中的应用

随着分子生物学的迅速发展，使肿瘤的病因、诊断及治疗等领域进入了基因水平。癌是基因性疾病，各种致癌因素诱发癌基因激活和抗癌基因失活及产物异常是癌变的首因素，这些变化的基础就是基因异常改变。