白血病抑制因子在CHO细胞中的表达及其对U937细胞增殖的抑制作用

构建白血病抑制因子(LIF)表达质粒pEDr-LIF并通过磷酸钙-DNA共沉淀的方法转入CHO-dhfr细胞。使用不同浓度的MTX筛选高表达株。获得的最高表达株经ELISA试剂盒检测上清中LIF含量3天内达到0.2μg/ml。Southern blot检测表明LIF cDNA已经稳固整合到了宿主细胞的基因组DNA中。MTT试验表明CHO-LIF的培养上清可以显著地抑制U937的细胞增殖。     

甲基磺酸乙酯对原核与真核细胞内的穿梭质粒的诱变研究

近年来,随着分子生物学技术的发展,推动和促进了遗传毒理学研究的发展。80年代中期起从分子水平上利用穿梭质粒进行细胞诱变研究,成为遗传毒理学的一个新领域。穿梭质粒是利用重组DNA技术构建的DNA分子。大肠杆菌——哺乳动物细胞穿梭质粒既可在大肠杆菌中复制,也能在哺乳动物细胞中增殖。利用这种穿梭梭质粒可     

3个HDAC1的保守氨基酸定点突变的获得

目的：为了研究ＨＤＡＣ１保守氨基酸的定点突变对其功能的影响,需要建立ＨＤＡＣ１保守氨基酸定点突变的突变子。方法：在克隆ＨＤＡＣ１ｃＤＮＡ的基础上,利用ＡｌｔｅｒｅｄＳｉｔｅⅡ体外突变系统对ＨＤＡＣ１保守氨基酸中的三个氨基酸位点进行突变,经ＤＮＡＩ则序鉴定。结果与结论：结果分别获得了ＨＤＡＣ１的Ｃ１５１Ａ,Ｙ１８８Ｆ,Ｓ１９７Ａ的定点突变子,为进一步研究ＨＤＡＣ１保守氨基酸的定点突变对其功能的影响打     

PCR技术在基因突变研究中的应用

1.PCR反应原理 多聚酶链反应(polymerase chain react-ion,PCR)是由kary Mullis及其同事们建立的一种体外核酸扩增方法,又有“无细胞的分子克隆”之称。它基于碱基互补原则,以待扩增的DNA片段为模板,在其两端加上与之互补的两段核苷酸引物,通过模板DNA在高温下变性、引物与其互补序列退火、用DNA聚合酶将退火的引物延长,这样反复进行的三步反应周期,每一周期的产物又可作为新的模板,进行新的合成反应,因此每个连续的周期使前一周期的合成产物     

N_亚硝基二甲胺在体内和体外突变测定的特异性比较

我们已检测到氯芳类1254处理的大鼠,S9激活的N-亚硝基二甲胺(NDMA)诱发大肠杆菌E.Coli lac I基因N末端DNA的改变,用DNA测序的方法鉴定了125株相互独立的lac I~(-d)突变型。与这种化合物已知的甲基化作用相符,主要的突变类型为G:C→A:T的转换占整个受检突变总数的90％,没有发现检出的非G:C→A:T突变包括2株G:C→     

用于人顶体蛋白酶原基因表达调控和蛋白分选研究的转基因小鼠模型的建立

分别将构建的人顶体蛋白酶原基因（ｈｕｍａｎ ｐｒｏａｃｒｏｓｉｎ,ｈＡＣＲ）５’侧冀序列,第１外显子和编码β－半乳糖苷酶的基因（ｌａｃＺ）的融合基因（载体１）,以及ｈＡＣＲ基因５’侧冀序列与报告基因ｌａｃＺ的融合基因（载体２）,通过显微注射受精卵法制备转基因小鼠,结果如下：载体１：注射８９只卵,移植入９只母鼠单侧卵管中,３只怀孕,产仔９只,存活７只,基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检出整合有外源基因的阳     

转基因动物突变研究模型及其在遗传毒理学中的应用（续）

转基因动物突变研究模型及其在遗传毒理学中的应用（续）①黎怀星傅继梁第二军医大学基础部生物学教研室上海２００４３３（续上期封三）的ｐＨ值不适当也能产生脱嘌呤位点。因而在进行突变率分析时应采用标准化的突变测试过程，并分开计数扇形噬菌斑，否则将导致对突变率...     

肝富集转录因子及其相互作用研究进展

肝细胞的分化及分化表型的维持与肝富集转录因子调控的特定基因表达有关。本文对六大类肝富集转录因子结构特征、生理功能及其相互作用作一简要介绍 ,在此基础上归纳了它们在肝脏发育中可能的级联调控网络     

Expression of splice variants of CD44 mRNA and its significance in human primary hepatocellular carcinoma.

ＥｘｐｒｅｓｉｏｎｏｆｓｐｌｉｃｅｖａｒｉａｎｔｓｏｆＣＤ４４ｍＲＮＡａｎｄｉｔｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｉｎｈｕｍａｎｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｅｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＬｉｕＰｅｎｇｆｅｉ刘鹏飞，ＷｕＭｅｎｇｃｈａｏ吴孟超，ＣｈｅｎＨａｎ陈...