人类巨细胞病毒感染与肺癌关系的研究

本文检测了５３例肺癌，５７例肺非癌患者和１００例自然人群血清特异性巨细胞病毒的ＩｇＭ和ＩｇＡ抗体，并检测了其３２例肺癌患者支气管－肺泡灌洗液中的ＣＭＶ－ＤＮＡ序列，肺癌患者血清中ＣＭＶ抗体阳性共２４例（４５．３％），明显高于肺非癌患者和自然人群，３２例肺癌患者ＢＡＬＦ中的ＣＭＶ－ＤＮＡ序列检出８例（２５．０％），与ＣＭＶ－ＩｇＭ抗体阳性结果（２８．１％）相符，从肺癌患者血清和ＢＡＬＦ中分别检测到Ｃ     

临床分离菌株的耐药性监测与分析

目前细菌耐药性问题日益突出,主要监测和研究的焦点集中在耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（ＭＲ－ＳＡ）、耐青霉素的肺炎链球菌（ＰＲＰ）、耐万古霉素的肠球菌（ＶＲＥ）和产Ｂ－．内酞胺酶的革兰阴性菌等。１材料与方法本文对１９９８年上海瑞金医院临床分离菌进行耐药性分析,了解细菌的分布情况及耐药趋势。用ＡＰＩ及ＶＩＴＥＫ－ＡＴＢ系统对临床分离菌株进行鉴定,按美国临床实验室标准委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐的标准方法（Ｋ－Ｂ法）进行药敏试验,用ＷＨＯＮＥＴ４软件进行分析［１］。２结果与讨论１９９８年临床分离菌株以革兰阴…     

上海出现PER-1型超广谱β内酰胺酶

目的 分析多重耐药鲍曼不动杆菌148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移能力。方法 用等电聚焦电泳试验和三相水解试验分析148号试验菌株所产β内酰胺酶，并进行初步分类，再用聚合酶链反应(PCR)扩增和PCR产物测序方法确认β内酰胺酶基因。结果 148号试验菌株产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)，经分子生物学方法证实有blaPER—1基因，同时还有aacA4基因。结论 148号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因，可能是产生了可转移的PER—1型ESBLs，blaPER—1基因位于质粒上。     

革兰阴性杆菌中质粒ampC基因的检测与分析

目的　运用多重聚合酶链反应 (PCR)检测革兰阴性杆菌的质粒ampC基因。 方法　通过热裂解获得DNA模板 ,用 6组引物进行多重PCR扩增 ,用琼脂糖凝胶电泳区分PCR产物。结果　 2 0 0株临床分离的革兰阴性杆菌中有 6株为质粒ampC基因阳性。 结论　用多重PCR技术能简单、快速地检测革兰阴性杆菌质粒ampC基因 ,且特异性高。     

30株星座链球菌的分离鉴定及抗生素敏感性试验

星座链球菌属米勒链球菌群 ,该群还包括咽峡炎链球菌和中间链球菌 ,过去由于临床分离率较低 ,所以对其致病地位的分析研究尚欠重视。但近年来发现该菌可引起心内膜炎 ,肺炎 ,菌血症 ,腹腔或皮肤感染等 ,尤其在宿主免疫功能减弱的情况下 (如吸毒、ＨＩＶ感染等 )。为此引起临床及检验人员的重视是至关重要的。在此 ,我们将分离到的 30株星座链球菌的鉴定及药敏情况总结如下。一、材料与方法1.菌株来源　 2 0 0 0年 4月至 2 0 0 1年 10月间从临床标本的脓及分泌物中分离出 8株 ,痰标本中分离出 8株 ,尿标本中分离出 6株 ,血标本中分离出 4株 ,…     

从肺炎克雷伯菌临床菌株中检出质粒介导的AmpC DHA-1型β-内酰胺酶基因

目的研究肺炎克雷伯菌的耐药机制,检测肺炎克雷伯菌中AmpC酶的基因.方法用纸片扩散法药敏试验和三相水解试验,从23株耐药的肺炎克雷伯菌临床菌株中初筛产AmpC酶的菌株;用PCR扩增耐药基因,将试验产物测序,并在Genbank中进行比对;用转化试验确证耐药基因是否通过质粒传播.结果发现3株肺炎克雷伯菌产诱导型质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶.结论国内首次发现肺炎克雷伯菌出现质粒介导的DHA-1型AmpC β-内酰胺酶.     

2012年中国CHINET血培养临床分离菌的分布及耐药性

目的了解2012年中国CHINET血培养分离菌的构成及耐药性。方法对中国CHINET 细菌耐药监测网2012年1月至12月所有血培养分离菌,按统一方案用K‐B纸片扩散法进行抗菌药物敏感试验。结果2012年自血标本中共获分离菌8490株,其中革兰阳性球菌占56．0％,革兰阴性杆菌占44．0％。居前10位的分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌（CNS ）（35．5％）、大肠埃希菌（16．4％）、克雷伯菌属（9．8％）（其中91．1％为肺炎克雷伯菌）、肠球菌属（7．2％）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）（7．2％）、不动杆菌属（5．9％）（其中93．8％为鲍曼不动杆菌）、草绿色链球菌（4．3％）、铜绿假单胞菌（3．2％）、肠杆菌属（2．4％）和洋葱伯克霍尔德菌（1．5％） ,占所有分离菌株的93．5％。甲氧西林耐药金葡菌（M RSA ）、甲氧西林耐药 CNS （MRCNS）分别占金葡菌和CNS的50．8％和61．7％。粪肠球菌对高浓度庆大霉素和氨苄西林的耐药率分别为29．0％和10． 9％,屎肠球菌对多数测试药物的耐药率显著高于粪肠球菌。草绿色链球菌对青霉素的耐药率为3．8％。儿童分离株中青霉素耐药肺炎链球菌株为31．2％,与成人分离株大致相仿（34．1％）。葡萄球菌属、肺炎链球菌、其他链球菌属和粪肠球菌中均未发现万古霉素和利奈唑胺耐药菌株,屎肠球菌对万古霉素的耐药率为3．5％。大肠埃希菌、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属和枸橼酸菌属等肠杆菌科细菌对碳青霉烯类的耐药率均在10．0％以下,唯克雷伯菌属对碳青霉烯类耐药率为11．2％～19．8％。不发酵糖革兰阴性杆菌对碳青霉烯类耐药率较高,铜绿假单胞菌对碳青霉烯类的耐药率近30．0％,对不动杆菌属耐药率达70．0％以上。结论2012年中国CHINET监测资料显示,血培养分离菌仍以革兰阳性菌为主,但检出比例有所下降,革兰阴性菌有所上升。血培养分离株对常用抗菌药物耐药性仍严重,尤其革兰阴性菌对碳青霉烯类耐药率呈上升趋势。因此应合理应用抗菌药物,并加强医院感染控制措施抑制耐药菌传播。     

随机扩增多态性DNA分型法用于酵母菌基因分型

目的研究酵母菌随机扩增多态性DNA分型法(RAPD)的最佳实验条件.方法在改变引物、Mg2+、模板浓度、Taq多聚酶用量等不同条件下,采用RAPD法对酵母菌进行基因分型.结果经优化后的RAPD方法能清晰地对酵母菌进行基因分型.结论RAPD是从分子水平对酵母菌感染进行病原学、流行病学研究的一种快速、可靠的分子生物学分型方法.     

恶性血液病患者鼻部感染的病原菌分布及耐药性分析

目的 了解恶性血液病患者鼻部感染的细菌分布及耐药性,以利于指导早期鼻部感染时的经验性抗菌治疗.方法 选择2006年1～12月在该院治疗的60例患有不同程度鼻部感染的恶性血液病患者,取其鼻腔、鼻窦脓液进行细菌培养及药敏检查.结果 60例脓液标本中细菌检出率是71.67%,其中真菌占37.25%,G+球菌占54.90%,G-菌占7.84%.在G+球菌中,金黄色葡萄球菌占11.76%,凝固酶阴性葡萄球菌占29.22%.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率是66.67%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率是95.00%.耐甲氧西林葡萄球菌的药敏结果显示对多种抗菌药物耐药,仅对万古霉素、利福平及呋西地酸敏感.结论 作者针对恶性血液病患者的鼻部感染存在条件致病菌及耐药菌的感染率高的特点提出了治疗对策.     

TEM-1β内酰胺酶介导的大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮耐药机制的研究

目的探讨临床分离大肠埃希菌RJ904对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含β内酰胺酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感的机制。方法通过三相水解试验了解大肠埃希菌RJ904所产酶的水解特性;以大肠埃希菌J53Azr为受体菌,临床菌株RJ904为供体菌,通过接合试验了解该耐药特性是否由质粒介导;通过"鸟枪法"随机克隆试验将耐药质粒经BamHI和HindⅢ双酶切后的片段插入到克隆载体pACYC184中表达并测序,明确介导该耐药特性的基因;通过重叠延伸法定点突变及亚克隆了解启动子对耐药基因表达的影响。结果菌株RJ904中的酶可水解哌拉西林-他唑巴坦、头孢哌酮,但不水解头孢西丁、头孢噻肟,而且其耐药性可通过质粒接合转移。耐药质粒经BamHI和HindⅢ酶切后重组到载体pACYC184中的3.9 kb双酶切片段,含有大小861 bp的blaTEM-1B基因,其上游的启动子为Pa/Pb。该重组载体表达后对头孢哌酮、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物耐药,而对头孢西丁、头孢噻肟敏感,重组载体中blaTEM-1B基因启动子经32位的T→C定点突变后,由强启动子Pa/Pb变为弱启动子P3,突变后的重组质粒转化入大肠埃希菌DH5α后所表达的耐药性与突变前相比MIC值均有较大下降。结论本试验首次证实在大肠埃希菌中Pa/Pb启动子调控TEM-1β内酰胺酶的高表达可使细菌对阿莫西林-克拉维酸、哌拉西林-他唑巴坦等含酶抑制剂抗菌药物和头孢哌酮耐药,而且这种耐药基因位于转座子和质粒上,可通过接合转移扩散。