HLA-A*0201/HPV-18E77-15五聚体的构建及其初步应用

目的构建人乳头状瘤病毒18型（HPV-18）特异性HLA-A2肽五聚体，为HPV-18型抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）的检测提供直接、有效的方法，并将其初步应用于宫颈癌患者外周血中抗原特异性CTL的检测。方法构建含有HLA-A2-BSP和β2M基因的原核表达载体，并进行表达、复性、鉴定及纯化。再将特异性短肽与HLA-A2-BSP和β2M在体外进行耦合，该复合物经纯化浓缩后进行生物素化。生物素化的产物经纯化浓缩后形成单体，此单体再与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成五聚体。运用所构建的五聚体，通过流式细胞仪检测宫颈癌患者外周血中抗原特异性CTL，并与正常对照组进行比较分析。结果所构建的pBV220-HLA-A2-BSP和pBV220-β2M原核表达载体的表达高效而且稳定，纯度达90％以上。HPV-18阳性宫颈癌患者体内抗原特异性CTL计数明显高于对照组（P〈0．05）。结论在五聚体复合物的构建中，高效、稳定的pBV220-HLA-A2-BSP和pBV220-β2M原核表达载体是构建成功的基础。所构建的MHC I类分子五聚体和传统的四聚体相比，作为体内、外HPV-18E7抗原特异性CTL检测的有效工具，具有一定优势。     

慢性乙肝患者肝内IL-23/IL-17信号途径与Treg细胞之间的相互作用

目的探讨慢性乙肝患者体内FOXP3蛋白与炎症因子IL-23/IL-17信号途径之间的相互关系。方法采用qPCR、流式细胞术分析了39例慢性乙肝急性发作(ACLF)、56例慢性乙肝(CHB)及32例健康对照(HC)肝组织及外周血中的FOXP3及IL-23/IL-17信号途径相关炎症因子的表达,免疫组化及荧光共聚焦检测FOXP3在肝组织内的表达,定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附试验检测HBsAg浓度,全自动生化仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)水平。结果 CHB患者外周血及肝组织内FOXP3 mRNA表达明显升高,肝内的FOXP3表达水平与患者血液中的HBV DNA水平及乙肝表面抗原(HB-sAg)浓度明显呈正相关。与健康对照组相比,慢性乙肝患者肝脏内的IL-23/IL-17信号通路相关的促炎因子也明显升高,且与FOXP3的表达水平升高呈正相关。结论 HBV感染的肝脏内IL-23/IL-17信号通路的活化并没有有效地被宿主的免疫机制如Treg细胞所抑制。因此,IL-23/IL-17信号通路可能是维持HBV病毒持续性感染的一个机制。     

MAGE-12的HLA-A2限制性CTL表位肽预测及其三维结构构建

目的从理论上分析、预测黑色素瘤抗原(MAGE)-12的人类白细胞抗原(HLA)-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位肽,并构建其三维结构。方法以肿瘤特异性抗原MAGE-12为研究目标,采用超基序法、量化基序法、多项式法、延展基序法与三维结构构建相结合的CTL表位预测方法。结果预测出的MAGE-12的表位中有4个符合HLA-A2限制性CTL表位要求。结论预测出的4个HLA-A2限制性CTL表位为MAGE-12的表位的可能性较大,经后续实验筛选、鉴定后,可用于基于MAGE-12的肿瘤治疗性多肽疫苗的设计研究。     

脊髓电刺激治疗复杂性区域疼痛综合征1例报道

病例简介患者女性,62岁,左侧小腿及足部疼痛、肿胀8个月入院。8个月前无明显诱因出现左足趾缝处疼痛,逐渐蔓延至左足背、足底及小腿外侧部。疼痛性质为烧灼样、刀割样;呈持续性,阵发性加重;疼痛范围逐步向上扩展。外院考虑为腰椎管狭窄,行椎管减压及内固定术,术后疼痛无缓解,且逐渐加重,VAS评分10分,并伴左     

泌尿系源性慢性盆腔痛

1.简介泌尿系源性慢性盆腔痛(urologic chronicpelvic pain,UCPP),主要是女性或男性的间质性膀胱炎(primarily interstitial cystitis,IC)/痛性膀胱综合征(painful bladder syndrome,PBS),以及男性的慢性前列腺炎(chronic prostatitis,CP)/慢性盆     

10年前后移居高原人群慢性高原病比较分析

目的 通过对久居高海拔地区人群进行慢性高原病(CMS)调查,并与10年前调查数据进行比较分析,了解CMS患病情况及10年前后变化情况,为CMS的预防和诊断提供依据.方法 应用CMS调查量表对2019年3300～5400 m海拔地区的218名受试对象进行调查,分析其患病情况,并与2009年相同海拔范围的510名受试对象的...     

蛋白酶体与MHC-Ⅰ类抗原的加工呈递

蛋白酶体是普遍存在于所有被检测过的细胞中的一种保守的蛋白酶复合物,有着广泛的功能.它在MHC-Ⅰ类抗原的加工呈递过程中起着非常重要的作用,而MHC-Ⅰ类抗原的加工呈递效率对肿瘤和胞内感染性疾病的防治特别重要,因此,本文对蛋白酶体的结构、MHC-Ⅰ类抗原加工呈递的作用及其作用的分子机制研究进展作一综述.     

文献阅读研讨课在医学免疫学教学中的应用

<正>《医学免疫学》是我校临床医学、预防医学、核医学、野战外科学、预防医学、医学检验、高原医学、医学影像学、医学心理学等专业学员的必修专业基础课。医学免疫学是研究免疫系统的组织结构和生理功能的科学,它从不同的角度和水平揭示免疫系统识别并消除有害生物及其成分(体外入侵、体内产生)的应答过程和规律,并应用这些规律来阐明疾病发生发展的机制,达到防治疾病的目的。免疫学是生命科学领域发展最为迅速的前沿学科之一,     

我国七种白蛉咽甲的超微结构研究

目的研究不同地域的7种白蛉(白蛉属5种,司蛉属2种)咽甲内侧壁的超微结构.方法采用扫描电子显微镜进行咽甲超微结构的分析.结果白蛉咽甲的内侧壁由一些齿形结构和横嵴组成,齿形结构和横嵴的形状、数目以及排列方式在各蛉种间表现不同.结论不同种属的白蛉咽甲在超微结构上有明显的差异,可为蛉种鉴定提供形态学依据.     

UBM材料上的Laminin蛋白促进负载骨髓间充质干细胞增殖和平滑肌分化

目的 探讨猪膀胱细胞外基质(urinary bladder matrix,UBM)上的Laminin蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向平滑肌分化的影响.方法 采用机械分离法、酶消化法及冷冻干燥法等方法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理,采用蛋白与支架共孵育,制备出UBM+Laminin及UBM+Anti-Laminin复合支架.采用贴壁法培养BMSCs,流式细胞仪鉴定BMSCs.采用P3代BMSCs,分别接种于UBM+Laminin、UBM及UBM+Anti-Laminin上.采用CCK-8检测、HE染色观察及免疫组化鉴定等方法检测Laminin蛋白对BMSCs增殖、迁移和分化的影响.结果 流式细胞仪鉴定BMSCs CD29阳性表达率为98％,CD31阳性表达率为4.56％,CD34阳性率为3.30％.3种材料均能支持BMSCs生长,且随共孵育时间的延长,D(450)值逐渐升高,其中UBM+Laminin复合材料组细胞D(450)最高(P＜0.01).HE染色结果显示UBM+ Laminin组细胞接种第3天形成黏附层,并向深部迁移,第14天可达材料致密层;UBM组第7天仅少许细胞向深层迁移,第14天未达基底层;UBM+Anti-Laminin组仅在支架表层生长.免疫组化检测显示UBM+Laminin组、UBM组、UBM+ Anti-Laminin组细胞α-SMA表达分别呈阳性、弱阳性和阴性.结论 UBM材料上Laminin蛋白能促进负载BMSCs增殖、迁移、并有诱导其向平滑肌方向分化的作用.