一个肌萎缩侧索硬化家系D21S223微卫星位点遗传连锁分析

目的对重庆地区1例肌萎缩侧索硬化家系进行遗传连锁分析。方法采用位于21号染色体上的D21S223微卫星位点,经PCR扩增后进行基因型分析,应用GENEHUNTER软件包进行连锁分析。结果最大LOD值为3.06(Θ=0.10),说明该家系致病基因与21号染色体上的D21S223位点连锁。结论SOD1基因突变可能是引起该家系发病的原因。     

SSX基因家族HLA-A2.1限制性CTL表位预测及其MHC-Ⅰ亲和力分析

目的通过对肿瘤基因SSX家族不同成员进行CTL表位预测,并对其与MHC-Ⅰ亲和力进行分析,为探索基于SSX肿瘤基因家族的免疫治疗奠定基础。方法利用基于超基序结合量化基序方案开发的HLA-A2.1限制性CTL表位预测软件,对SSX基因家族不同成员进行CTL表位预测,然后合成SSX相关待测表位肽P1(AMTKLGFKA)、P4(AMT-KLGFNV)、P5(AMTKLGFKV)和P6(VMTKLGFKV),再对这些合成肽与MHC-Ⅰ结合亲和力及其结合物稳定性进行实验分析。结果与实验阳性肽(HBcAg,18~27)相比,除P1外,P4、P5、P6均显示较高的结合亲和力;而结合稳定性实验(DC50)结果显示,P1、P4与阳性对照肽(HBcAg,18~27)DC50均大于8 h,而P5和P6的DC50介于2~4 h之间。结论计算机软件预测的CTL表位肽,经过体外亲和力与结合稳定性实验筛选到2条理想的表位肽,为该表位的下一步体内鉴定奠定基础。     

人DcR3 cDNA克隆及其在COS-7细胞中的表达

目的 克隆人DcR3分子的cDNA,将其重组入真核表达载体,并表达于COS-7细胞.方法 以PCR方法克隆编码人DcR3分子的cDNA,对其序列进行测定.将测序正确的DcR3 cDNA克隆入真核表达载体pAAV-IRES-hrGFP,构建重组表达载体.采用脂质体法转染COS-7细胞,用Western blot检测和激光共聚焦检测重组DcR3分子在COS-7细胞中的表达.结果 PCR方法扩增出一1 000 bp左右的基因片段,插入pAAV-IRES-hrGFP构建重组表达载体后,经序列测定证实扩增的片段为人DcR3分子cDNA.将重组子转染COS-7细胞,Western blotting和激光共聚焦检测到DcR3分子的表达.结论 成功地克隆并在COS-7细胞中表达了DcR3分子.     

血红素加氧酶和一氧化碳在维持CD4+CD25+调节性T细胞介导的外周耐受中的作用

在过去几十年里,人们对共同表达CD4和CD25的调节性T细胞进行了大量研究。Treg的特征性表型在于其能有效地维持外周免疫耐受和改变天然免疫的能力。但是,到目前为止,Treg的作用机制以及它和其他细胞间相互作用以提供免疫调节的机制仍然不清楚。最近的研究表明,HO1有调节免疫反应的作用,并且HO1催化产生的副产物———一氧化碳(CO)也被证实在Treg抑制性作用中有重要功能。现结合这些研究新进展,对Treg的作用机制作一综述,为Treg的未来研究方向提出新的思路。     

前列腺特异抗原的临床应用进展

自前列腺癌特异抗原（ＦＳＡ）发现的二十多年来,它已经成为最有效的前列腺癌（ＰＣａ）的肿瘤标志,并在ＰＣａ的诊治方面扮演着十分重要的角色。 虽然ＰＳＡ被认为是一个有效的肿瘤标志,且是靶器官特异的,但它并不是肿瘤特异的。在男性ＰＣａ和良性前列腺疾病间,ＰＳＡ的浓度分布有很大的重叠,特别在４～１０μｇ／Ｌ之间。这个范围因此也称为诊断灰色区域。为了提高ＰＳＡ诊断ＰＣａ的精确性,人们已经提出了多种解决方案,包括年龄参考范围、ＰＳＡ密度、ＰＳＡ生成速率、神经网络衍生的各项指标和ＰＳＡ的分子形式等［１］。目前…     

颞叶内侧癫癎发作期海马深部脑电图的特点

目的探讨颞叶内侧癫癎（medial temporal lobe epilepsy,MTLE）发作期海马深部脑电图的特点。方法回顾性分析记录双侧海马深部脑电图,行前颞叶切除术且长期预后良好的18例病人的临床资料,研究海马深部脑电图发作起源的波形特点和部位。结果发作期海马深部脑电图低幅快节律起源7例,棘（尖）波节律起源8例,高幅棘（尖）慢波起源占3例。起源点主要位于从海马头部向后3 cm之内的区域。结论低幅快节律、棘（尖）波节律是MTLE病人海马深部脑电图发作期的最主要两种波形。发作起源区主要位于海马前头部。     

小鼠精子Sp17与IL-5融合蛋白的构建、表达及其免疫原性鉴定

目的 构建和表达小鼠精子蛋白Sp17与白介素5(IL-5)融合蛋白,并对其进行纯化和免疫原性鉴定.方法 采用PCR技术从质粒pGEM-1-IL-5中扩增IL-5基因片段,将其克隆至pET/Sp17原核表达载体中与Sp17基因融合,构建重组质粒pET/Sp17-IL-5,经酶切鉴定后转化大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达,采用Ni2+-NTA Agarose 纯化,SDS-PAGE检测、N端测序及Western blot;重组蛋白Sp17.IL-5免疫小鼠后ELISA检测小鼠血清特异性抗体.结果 成功构建小鼠精子蛋白Sp17与IL-5融合蛋白的高效表达质粒pET/Sp17-IL-5,重组工程菌pET-28a(+)-sp17-IL-5/BL21经IPTG诱导目的蛋白表达率约28%,PAGE初步测定目的蛋白相对分子量(Mr)约39 000,纯化后蛋白纯度达91%,免疫后小鼠血清中检测到特异性抗体.结论 Sp17-IL-5蛋白经基因克隆获得了较高的表达量,并初步显示了较好的免疫活性,为新型Sp17避孕疫苗的研制奠定基础.     

HPVl6E7_(11-20)-HSP110复合物的构建及其免疫原性研究

宫颈癌是一种危害妇女健康的常见恶性肿瘤,发病率仅次于乳腺癌,其发生发展主要与高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavims,HPV)16和18型感染密切相关~([1-2]).因此,针对HPV研究、开发宫颈癌治疗性疫苗具有重要的临床意义.     

杀伤细胞加化疗治疗转移性乳腺癌的效果观察

尽管乳腺癌对化疗、放疗均敏感，但转移性乳腺癌的治疗仍然非常困难，多数患者疗效不理想，而单纯化疗的骨髓抑制作用，常常导致患者的免疫功能受到损伤。提高抗肿瘤的治疗作用，应该考虑同时采用外源性杀癌细胞药物加辅助自身免疫的方法。细胞因子活化的杀伤细胞（c1Irtokine-induced killer cells，CIK细胞）是一类由多种细胞因子诱导的杀伤细胞，因其杀瘤活性高、杀瘤谱广，目前已在临床上得到了较多的应用。     

病理生理学实验课教学改革探讨

病理生理学的理论来源于实验研究,实验教学是病理生理学课程的重要组成部分。通过实验教学可以培养学生独立思考和综合分析能力,提高学生实践技能,并加强其对理论知识的掌握和应用。但现有的病理生理学实验课教学存在诸多弊端,需要进行针对性的教学改革,通过建立“以学为中心”的教学理念,合理安排实验课程,优化实验课教学内容,综合应用多种教学方式等途径进行病理生理学实验教学改革,全面提升病理生理学实验教学质量,有效提高学生理论知识水平和综合实践能力。