ROS介导TGF-β1诱导的大鼠系膜细胞纤维蛋白溶酶活性变化

目的:观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对系膜细胞纤维蛋白溶解酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达和纤维蛋白溶酶活性的影响,并探讨反应性氧自由基(ROS)的作用。方法:以体外培养的大鼠系膜细胞为对象,应用TGF-β1刺激,部分实验中应用还原型谷胱甘肽消耗剂BSO或抗氧化剂NAC(N-acetylcysteine)进行干预处理。应用荧光素法测定细胞产生ROS量;应用Westernblot法检测PAI-1蛋白表达;应用RT-PCR和Northernblot检测PAI-1mRNA表达;应用合成的荧光素纤维蛋白溶解酶底物测定纤维蛋白溶解酶活性。结果:外源性TGF-β1可显著增加大鼠系膜细胞产生ROS,并上调细胞PAI-1蛋白和mRNA的表达以及降低纤维蛋白溶解酶活性;BSO可增强TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1mRNA的表达;而NAC可显著地逆转由TGF-β1诱导的PAI-1mRNA表达的上调和纤维蛋白溶解酶活性的下降。结论:TGF-β1可促使系膜细胞产生ROS,ROS作为信号传递分子介导了由TGF-β1诱导的系膜细胞PAI-1表达的上调和纤维蛋白溶解酶活性的下降。     

慢性移植物抗宿主病狼疮样肾炎小鼠模型的研制

目的研制可诱导的、耗时较短的慢性移植物抗宿主病(GVHD)狼疮样肾炎小鼠模型。方法无菌分离母体DBA/2小鼠淋巴细胞,注入雌性(C57BL/10R×DBA/2)F1杂交鼠。观察16周。结果注射后8周模型小鼠以肾小球细胞增生为主要特征,未见蛋白尿及间质损害;注射后12周以大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿及高脂血症为其主要症状,病理以肾小球系膜增宽、基底膜节段性增厚、肾间质细胞浸润为特点;至注射后16周则以肾功能损害为主要改变,病理以肾小球基质大量增生,肾间质纤维化为主要特征。血清学示抗dsDNA抗体阳性,免疫荧光示免疫球蛋白及补体沿系膜(IgM)和毛细血管(IgG、C     

颗粒膜蛋白的表达与狼疮肾炎的关系研究

目的 了解血浆黏附分子颗粒膜蛋白（ＧＭＰ－１４０）水平及其在肾组织的表达与狼疮肾炎（ＬＮ）活动、肾脏病理及痛功能损害的关系。方法 用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定血浆ＧＭＰ－１４０水平,并用免疫组织化学染色法,观察正常肾和狼疮组织ＧＭＰ－１４０表达。结果 ＬＮ患者较正常人以及活动ＬＮ较非活动ＬＮ,血ＧＭＰ－１４０水平显著升高;ＬＮ肾组织ＧＭＰ－１４０表达较正常肾组织明显增强,且狼疮肾组织ＧＭＰ－     

骨调素反义RNA在培养的肾小管上皮细胞的表达

骨调素（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ,ＯＰＮ）是含精氨酸·甘氨酸－天门冬氨酸（ＲＧＤ）三肽序列（黏附分子结构）的高度酸性的磷酸化分泌性糖蛋白,是很强的巨噬细胞化学趋化和黏附分子。在许多与肾小管间质炎症损伤和纤维化有关的实验动物模型中,肾小管上皮细胞均有ＯＰＮ的过度表达,巨噬细胞浸润均发生在肾小管上皮细胞过度表达ＯＰＮ的区域,肾小管上皮细胞ＯＰＮ的过度表达与巨噬细胞局部浸润的密切相关性,表明ＯＰＮ是介导巨噬细胞在肾小管浸润并导致炎症损伤和纤维化发生和发展的关键细胞因子。因此,如能阻断肾小管上皮细胞ＯＰＮ…     

白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子

目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ,ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达;（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响,以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达,它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β,ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达,它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

A超与IOL Master测量白内障患者眼轴及前房深度精确性的对比研究

目的:比较传统接触式A超与IOL Master在眼轴及前房深度测量中的准确性,探讨不同测量方法的临床应用特点.方法:前瞻性分析2015-01/2016-12在我院行白内障超声乳化及人工晶状体植入术的患者145例189眼,术前根据IOL Master测得眼轴长度(L)将患者分为5组:A组:L≤22mm;B组:2228mm.术前分别用接触式A超及IOL Master测量眼轴长度和前房深度,IOL Master测量角膜曲率.L≤22mm用Hoffer Q公式计算人工晶状体度数,L>22mm用Haigis公式计算人工晶状体度数.比较两种方法测量的眼轴长度、前房深度及术后3mo平均绝对屈光误差(MAE).结果:分别用A超和IOL Master测量术前眼轴长度:A组:21.48±0.41mm和21.46±0.40mm;B组:23.13±0.62mm和23.14±0.63mm;C组:25.24±0.56mm和25.27±0.59mm;D组:26.97±0.59mm和27.03±0.64mm,以上各组二者差异均无统计学意义(P>0.05);E组:30.76±1.40mm和31.01±1.53mm,二者差异具有统计学意义(P<0.05).A超和IOL Master测量术前前房深度:A组:2.81±0.35mm和2.82±0.41mm;B组:3.04±0.50mm和3.10±0.47mm;C组:3.55±0.62mm和3.60±0.52mm;D组:3.42±0.24mm和3.51±0.30mm;E组:3.50±0.28mm和3.61±0.34mm,以上各组二者差异均无统计学意义(P>0.05).A超和IOL Master测量术后3mo MAE:A组:0.50±0.30D和0.43±0.27D;B组:0.48±0.34D和0.45±0.32D;C组:0.56±0.32D和0.49±0.40D;D组:0.64±0.16D和0.50±0.22D,以上各组二者差异均无统计学意义(P>0.05);E组:0.91±0.47D和0.62±0.29D,二者差异具有统计学意义(P<0.05),其中MAE≤0.50D检出率分别为38.7%和65%,差异具有统计学意义(P<0.05);MAE≤1.00D检出率分别为69.2%和83.3%,差异无统计学意义(P>0.05).结论:IOL Master与接触式A超在生物测量上具有高度一致性,对于长眼轴(L>28mm)患者精确性更高,是一种操作简单、精确性高、重复性好、非接触的测量仪器.     

六君子汤治疗透析中终末期肾脏病合并营养不良

目的：观察中药（六君子汤）对终末期肾脏病（ESRD）合并营养不良的治疗效果。方法：60例ESRD并营养不良患者随机分为两组：①六君子汤治疗组30例,在优质高蛋白饮食及充分透析基础上予六君子汤治疗。每日1剂,分2次服用;②对照组30例,给予优质高蛋白饮食同时予充分透析,但不予中药治疗。两组均以60日为1疗程。同时测定两组患者治疗前后血前白蛋白、白蛋白、转铁蛋白等水平,并予临床上常用的整体评估（subjective global assessment,SGA) 作营养不良分级,比较两组治疗前后营养不良改善情况。结果：治疗组血前白蛋白、白蛋白在充分透析的同时、转铁蛋白的水平明显提高,SGA分级好转。与对照组比较,营养不良的改善有显著性差异（P＜0．05）。结论：在充分透析的同时六君子汤治疗ESRD合并营养不良患者有较好疗效。可作为尿毒症患者并营养不良的辅助治疗。     

Rosiglitazone down-regulates lipopolysaccharide-induced expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 in rat peritoneal mesothelial cells through a NF-κB dependent mechanism

Objective To investigate the effect and mechanism by which PPARγ ligand, rosiglitasone, regulates the expression of CD40 and intercellular adhesion molecule 1 (ICAM-1) in the rat peritoneal mesothelial cells (RPMCs) induced by lipopolysaccharide (LPS). Methods RPMCs were harvested from Sprague-Dawley rat peritoneal cavity and maintained under defined in vitro conditions. The cells were randomly divided into groups as follows: medium, LPS (5 mg/L), LPS (5 mg/L)+BAY11-7085(5 μmol/L, NF-κB inhibitor), rosiglitazone (10 μmol/L or 20 μmol/L, peroxisome proliferator-activated receptor γ activator), LPS (5 mg/L)+rosiglitazone (10 μmol/L)+GW9662 (3 μmol/L, peroxisome proliferator-aetivatcd receptor γ antagonist), and LPS (5 mg/L)+vehicle (DMSO 0.2 ml/L). The expressions of CD40 and ICAM-1 RNA in RPMCs were examined by RT-PCR after 3 hour treatment, and the protein expressions of CD40, ICAM-1, p-NF-κB p65 and p-IκBα were examined by Western blot or immunofluorescence after 24 hour treatment. Results Following treatment with LPS, both the expressions of CD40 and ICAM-1 protein in RPMCs were up-regulated significantly (P<0.05), and the phosphoralation of p65 was increased greatly (1.10±0.17 vs 0.55±0.06, P<0.05). BAY11-7085 (5 μmol/L) significantly decreased the protein expression of p-p65 (0.22±0.11 vs 1.10±0.17, P<0.01), CD40 (0.34±0.02 vs 0.50±0.06, P<0.05) and ICAM-1 (0.35±0.16 vs 0.74±0.03, P<0.05). Pretreated with rosiglitazone for 3 h then added with LPS for 1 h, the levels of p-p65, CD40 and ICAM-1 in RPMCs were significantly decreased compared with those of LPS group (0.77±0.08 vs 0.90±0.10, P相似文献   

逆转狼疮性肾炎肾功能不全的治疗决策分析

目的 分析和探讨药物治疗对逆转狼疮性肾炎（LN）肾功能不全的作用。方法 对1991－1999年住院的LN伴 初发肾功能不全患者173例进行28周的回顾性队列研究。研究因素包括使用激素、环磷酰胺（ CTX）和环孢素。其中激素分为口服泼尼松、静脉注射氟美松和甲基泼尼松龙冲击3个治疗等级;使用CTX分为未用、小剂量（平均每周≤0.25g/m^2）和大剂量（平均每周＞0.25g/m^2）3个等级;环孢素则采用是否应用2种状态。运用COX回归分层分析的方法,分析这些治疗对肾功能恢复的影响。同时引入性别,年龄,病程,症状,并发症,狼疮活动指数,各种常规、生化和免疫学检查等51项指标,建立COX比例危险率回归模型,并分别分析COX模型中有意义的各个临床和实验室指标对药物诱导肾功能恢复的影响。结果 142例（82.1%)完成随访;93例（65.5%)肾功能恢复,17例（12.0%)死亡。COX 回归分层分析显示,只有CTX治疗可影响肾功能的恢复。运用COX回归的多因素分析,校正混杂因素影响后,仍然显示CTX治疗可以逆转LN的肾功能不全,其中小剂量CTX治疗对肾功能恢复的相关比（RR）为4.41,95%的可信区间（CI）为1.03-18.94;大剂量CTX治疗的RR为13.29,95%CI为3.11-56.82。性别,肾功能不全的病程,肾脏综小,贫血和血肌酐值均对肾功能恢复有影响。结论 CTX冲击治疗可促使LN的初发肾功能不全患者肾功能的恢复,肾功能不全的病程短,肾脏不缩小,贫血较轻的LN是应用CTX冲击治疗的指征。     

肾移植受者巨细胞病毒感染及免疫抑制剂对其的影响

目的探讨肾移植受者巨细胞病毒(CMV)感染率及免疫抑制剂对其的影响.方法214例肾移植受者术后给予甲泼尼龙(MP)、抗淋巴细胞球蛋白(ALG)静脉滴注作为免疫诱导治疗.基础免疫抑制剂治疗为环孢素A+泼尼松+硫唑嘌呤.急性排斥反应时给予MP冲击治疗,无效时给予ALG或OKT3治疗.采用免疫细胞化学LSAB法测定外周血白细胞CMV-PP65抗原.结果CMV感染率为61.7%(126/214),初次检出CMV-PP65抗原的时间为术后(25.4±14.7)*!d,平均抗原阳性细胞数为每50000白细胞(9.2±7.9)个.CMV感染的肾移植受者在感染前急性排斥反应率为42.3%(52/126),明显高于无CMV感染受者的20.5%(P<0.01);使用ALG或OKT3治疗例数分别为23、15例,也高于无CMV感染的受者(P<0.05).CMV感染和无CMV感染的肾移植受者ALG免疫诱导治疗疗程分别为(4.7±1.32)*!d、(4.4±0.92)*!d,使用剂量分别为(14.1±1.32)支、(13.2±0.92)支,差异无显著性(P>0.05).结论肾移植术后CMV感染率高;术后短期的ALG免疫诱导治疗可能不增加CMV感染发生率;急性排斥反应发生后免疫抑制剂尤其是ALG或OKT3的使用与术后CMV感染密切相关.