TGF-β1-induced LPP expression dependant on Rho kinase during differentiation and migration of bone marrow-derived smooth muscle progenitor cells

Lipoma preferred partner(LPP) has been identified as a protein which is highly selective for smooth muscle progenitor cells(SMPCs) and regulates differentiation and migration of SMPCs,but mechanisms of LPP expression are not elucidated clearly.The aim of the present study was to discuss the mechanisms by which LPP expression is regulated in the differentiation and migration of SMPCs induced by TGF-β1.It was found that TGF-β1 could significantly increase the expression of LPP,smooth muscle α-actin,smooth muscle myosin heavy chain(SM-MHC),and smoothelin in SMPCs.Moreover,inactivation of Rho kinase(ROK) with ROK inhibitors significantly inhibited LPP mRNA expression in TGF-β1-treated SMPCs and mouse aortic smooth muscle cells(MAoSMCs).At the same time,LPP silencing with short interfering RNA significantly decreased SMPCs migration.In conclusion,LPP appears to be a ROK-dependant SMPCs differentiation marker that plays a role in regulating SMPCs migration.     

重度妊高征28例护理体会

妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )为产妇孕期所特有疾病。多发生在妊娠 2 0周后 ,表现为水肿、高血压、蛋白尿。重度妊高征时血压≥ 2 1.3/ 14.7k Pa,尿蛋白定性( )～ ( ) ,尿蛋白定量≥ 5 g/ 2 4 h。对母胎危害极大 ,是孕产妇和围生儿死亡的重要原因之一。我科于 1999年 8月～ 2 0 0 1年 6月共收治此类患者 2 8例 ,无一例因护理不当而造成孕产妇死亡 ,现将护理体会介绍如下。1　临床资料2 8例患者中 ,孕周≥ 36周 2 6例 ,孕周 <36周 2例 ;剖宫产 2 5例 ,自然分娩 3例。2　护　　理2 .1　心理护理 :重度妊高征患者病情重、思想顾虑多 ,医务…     

利用Psm22α-EGFP-1质粒重组体从小鼠间充质干细胞中分选平滑肌祖细胞

目的 为了从骨髓间充质干细胞中分离纯化出平滑肌祖细胞,探讨骨髓来源的平滑肌祖细胞(SMPC)向平滑肌方向分化的机制和特点.方法 构建了含有sm22α启动子序列和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)编码序列的质粒重组体后用脂质体转染的方法,将Psm22α-EGFP-1重组体转入体外原代培养一周的小鼠间充质干细胞中.在转染后的3、5、7、10 d分别观察平滑肌特异性蛋白sm22α启动子控制下绿色荧光蛋白表达量的变化和转入重组体后间充质细胞形态的变化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观测转染后的骨髓间充质干细胞中myocardin mRNA表达水平的变化,并以免疫荧光法检测转染后第5天骨髓间充质干细胞CD34的表达.结果 转入Psm22α-EGFP-1重组体后的第3天,在荧光显微镜下观察到有绿色荧光蛋白表达的细胞.此后随着时间的推移,表达绿色荧光蛋白的细胞数目持续增加,在第7天时达到高峰,以后逐渐减弱.在不同时间点的绿色荧光蛋白阳性细胞百分率分别为:3 d:7%±0.13%,5 d:10%±0.32%,7 d:20%±0.26%,10 d:12%±0.18%,t=3.45,P＜0.05.在相应的时间点的转染后的骨髓间充质干细胞,myocardin mRNA表达变化的趋势与绿色荧光表达的变化趋势大致相符.阳性对照组的脂质体的转染效率每个组均控制在70%±1.5%(P＞0.05).在激光共聚焦显微镜下观察可见,发绿色荧光的细胞形态呈多态性,动态观察发现绿色荧光蛋白的分布趋势是从胞核逐步分布至胞质.免疫荧光显示在转染后第5天的细胞中CD34的阳性率为5.2%±0.21%(P＞0.05).结论 在小鼠的骨髓间充质干细胞中存在着具有向平滑肌细胞方向分化潜能的祖细胞,即所谓的平滑肌祖细胞.利用Psm22α-EGFP-1质粒重组体可以从小鼠间充质干细胞中分选出平滑肌祖细胞.     

在孩子心中种下同情之花

美国教育学博士米歇尔·博芭在《如何培养孩子的德商》中提出了要培养孩子的七大美德,其中就包括要培养孩子的同情心,即让孩子     

适宜泡在电视机前者的锻炼简

目的探讨通心络联合氯吡格雷治疗冠心病心绞痛的疗效。方法将我院80例冠心病心绞痛的患者随机划分为对照组和观察组各40例,对照组采用常规治疗,观察组在对照组治疗基础上加服通心络胶囊联合氯吡格雷,对比两组疗前疗后的效果。结果两组冠心病心绞痛患者通过治疗后,观察组的总有效率92．5％显著高于对照组75％,心绞痛发病频率、心绞痛时间显著低于对照组。观察组的心电图总有效率72．5％明显高于对照组52．5％,观察组血脂变化情况在治疗后均有较好的改善,比对照组的效果明显,比较差异均有统计学意（P〈0．05）。结论对冠心病心绞痛患者在常规治疗基础上加服通心络联合氯吡格雷药物治疗,能减少心绞痛发病频率,缩短心绞痛时间,改善心电图ST—T段及血脂变化,提高总有效率,是治疗冠心病心绞痛理想的药物,值得推广应用。     

myocardin在骨髓间充质干细胞向平滑肌细胞分化过程中的表达

目的 探讨通过条件培养液(CM)和高浓度血清即20%的胎牛血清(FBS)联合作用下,myocardin在骨髓来源的间充质干细胞向平滑肌细胞(SMC)定向分化过程中的表达特点.方法 采用伞骨髓贴壁法分离骨髓问充质干细胞,CM联合20%FBS诱导骨髓间充质干细胞,同时设立持续10%FBS、单20%FBS及单CM诱导下的骨髓间充质十细胞对照组和SMC阳性对照组,分别于诱导前及诱导3、7、10和14 d时观察细胞形态的变化,并在相应的时间点用免疫荧光法、逆转录聚合酶链反应法、Western blot半定量分析法榆测myocardin以及SMC表面各种标志基因的表达变化,用透射电镜检测诱导后细胞内肌丝存在以此来证实诱导分化成功.结果 光镜观察显示诱导前至诱导3、7、10和14 d时,骨髓问允质十细胞南纺锤形、多角形、扁平形和小圆形等多种形态逐渐转变为单一的长梭形,在诱导21 d后显示出明显的峰-谷特征.免疫荧光结果显示表达myocardin的阳性细胞数量逐渐增多,表达部位由胞质逐渐移向胞核,而表达平滑肌标志基因Ot一平滑肌肌动蛋白(Ot.SMA)、平滑肌肌动蛋白重链(SM-MHC)的细胞也随之增加,同时联合诱导后3、7、lO和14 d表达myocardin和平滑肌标志基因(α-SMA或SM-MHC)的双阳性细胞数最逐渐增加.RT-PCR结果显示myocardin的mRNA表达逐渐上调,在诱导7 d达到高峰后表达基本稳定(P<0.05);平滑肌标志基因α-SMA及SM22α的表达随着myocardin表达上调而增加(r=O.81,P<0.05),诱导10 d后表达基本稳定.Western blot结果显示myocardin蛋白和平滑肌标志基因α-SMA蛋白表达量在诱导后明显增加(r=0.84,P<0.05).透射电镜结果显示诱导21 d后的分化细胞中有肌丝的存在.在不同时间点各组之间的差异有统计学意义(P<0.05).结论 CM联合高浓度的血清可有效诱导骨髓间充质干细胞向SMC分化,myocardin在此分化过程中起了重要作用.骨髓来源的间充质干细胞可以在诱导下定向分化成为SMC.     

经腹膜后间隙腹腔镜下肾囊肿去顶术的手术配合

目的：总结经腹膜后间隙腹腔镜下肾囊肿去顶术的手术配合经验。方法：术前访视患者,取得患者的信任和合作。手术在固定的腹腔镜手术间进行,摆好手术体位,于腋中线肋下至髂脊连线中点作一小切口,准备自制气囊以扩展腹膜后间隙,置入10㎜穿刺套管,放入腹腔镜摄像头,灌注二氧化碳气体。在内镜监视下,分别置入10㎜、5㎜穿刺套管形成操作器械工作通道,分开肾周脂肪,暴露肾囊肿。递电凝钩将肾囊肿表面戳穿,递吸引器吸净囊内液体,递电凝剪剪除囊壁组织,递抓钳将其提出体外,递电凝烧灼止血。递抓钳钳夹活力碘棉球涂抹残腔。结果：手术过程顺利,无中转,无一例术中并发症,术后无感染发生。结论：术前器械准备充分,确保灭菌效果,术中熟练掌握各设备器械的使用,熟悉手术程序紧密配合,术后重视仪器器械的清洁与保养,并设专人保管等都是手术成功的基础。     

myocardin基因沉默在PDGF-BB诱导小鼠骨髓间充质干细胞向平滑肌样细胞分化中的作用

目的 构建myocardin特异性siRNA真核表达载体,体外观察其对myocardin基因的沉默效应及对小鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向平滑肌样细胞分化过程中的影响.方法 培养小鼠骨髓问充质干细胞并利用血小板源生长因子(PDGF-BB,50 mg/L)联合高浓度胎牛血清(20%FBS)诱导其向平滑肌样细胞分化;构建含U6启动子和myocardin特异短发卡RNA(shRNA)编码序列的质粒载体pGen-myo-shRNA,以含非特异性shRNA编码序列的质粒载体pGenesil-Con(pCon)为阴性对照,分别转染诱导培养后第6天的小鼠MSC,48 h后用RT-PCR技术检测细胞内myocardin在mRNA水平的表达;同时用免疫组织化学方法 检测平滑肌肌球蛋白重链(sM myosin heavy chain,SM-MHC)的表达来鉴定平滑肌样细胞的分化.结果 成功构建myocardin特异性siRNA真核表达载体,利用其沉默myocardin基因后,干扰组相比空白对照组myocardin mRNA表达下调42.86%,差异有统计学意义(P相似文献   

静脉输液相关不良事件及防治措施

目的探讨静脉输液引起医患纠纷的可能引发的因素并提出一些防范措施，以保证临床静脉输液的安全。方法参阅有关静脉输液的临床资料，并对临床处理输液不良事件的一些经验教训进行总结。结果由于药物本身存在的不良反应、输液反应及其它并发症及操作不当、责任心不强等是可能引发静脉输液医患纠纷的主要原因，临床应准确掌握输液适应证，正确选择输液溶媒，注意配伍禁忌，防止输液差错，减少滥用。结论严守输液操作程序，加强输液安全管理是减少输液医患纠纷的重要手段。     

肾上腺肿瘤的CT诊断

目的：探讨ＣＴ对肾上腺肿瘤的诊断价值。材料与方法：回顾性分析９４例经手术病理证实的各类肾上腺肿瘤,观察其ＣＴ征象,提出诊断和鉴别诊断要点。结果：醛固酮腺瘤肿块小,密度低;皮质醇腺瘤中等大小,中等密度;肾上腺原性腺综合征肿块较大,密度均匀;无机能性腺瘤与神经节瘤相似表现为肿块较大,密度略低;肾上腺皮质腺癌肿巨大,呈不规则低密度肾上腺转移癌肿块较在,密度不均匀,嗜铬细胞瘤肿块较大,密度不均匀。结论：Ｃ