人树突状细胞cDNA质粒文库的构建及其大规模随机测序体系的建立

目的：建立人树突状细胞（ＤＣ）的ｃＤＮＡ文库,通过大规模随机测序克隆免疫新分子。方法：来源于正常人外周血的单核细胞,体外经ＧＭＣＳＦ和ＩＬ４培养,扩增出高纯度的ＤＣ,抽提纯化ｍＲＮＡ,转录成ｃＤＮＡ,定向插入ｐＳＰＯＲＴ２０载体,建立人ＤＣ的ｃＤＮＡ质粒文库;用ＡＢＩ３７７全自动测序仪对该文库进行随机测序,将得到的ＥＳＴ在ＳｕｎＥ４５０服务器中与ＥＭＢＬ及Ｓｗｉｓｐｒｏｔ数据库进行同源性比较,筛选出代表未知基因ＥＳＴ,然后在ＧＣＧ软件中进行分析,对重要的未知ＥＳＴ克隆其全长ｃＤＮＡ。结果：所扩增的ＤＣ经流式细胞仪分析高表达ＭＨＣⅠ、ＭＨＣⅡ、Ｂ７、ＣＤｌａ和ＣＤ８３等表面标志,能强烈刺激同种异体Ｔ淋巴细胞的体外增殖反应;建立的ＤＣｃＤＮＡ文库９２％以上克隆有平均１６ｋｂ大小的插入片段;从所测的１２０００余条ＥＳＴ中筛选出代表未知基因的３０００余条,克隆到１０９条全长新基因,包括属于细胞因子、细胞因子受体、趋化因子和粘附分子等家族的免疫新分子,部分全长基因已在Ｇｅｎｅｂａｎｋ中登录。结论：成功建立了人ＤＣ的ｃＤＮＡ基因文库及其大规模随机测序体系,并克隆到免疫分子。     

小鼠GM-CSF基因修饰瘤苗腹腔免疫对抗原提呈细胞数量和功能的促进效应

目的 观察小鼠粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｍＧＭ－ＣＳＦ）基因修饰的瘤苗体内免疫小鼠后的抗肿瘤效应以及对抗原提呈细胞数量和功能的影响。方法 应用腺病毒载体介导ｍＧＭ－ＣＳＦ基因修饰ＦＢＬ－３小鼠红白血病细胞,灭活后用作瘤苗腹腔免疫小鼠,检测免疫后体内诱导的细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）活性,观察小鼠存活期;计数免疫后腹腔中抗原提呈细胞（ＡＰＣｓ）的数量,流式细胞仪分析腹腔贴壁细胞中３３Ｄ１＾＋树突头细     

雄激素对高尿酸血症大鼠骨代谢的影响

目的探讨雄激素对高尿酸血症(HUA)大鼠骨代谢的影响。方法雄性Wistar大鼠40只随机分为假手术组、HUA组、去势HUA组、去势组各10只,用氧嗪酸钾(1.0 g/kg、1.5 g/kg)和乙胺丁醇(100 mg/kg)建立慢性HUA大鼠模型,分别在第0、4、6、8、12周取内眦静脉血测定血尿酸(UA)、钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)水平。结果第4周时与假手术组、去势组比较,HUA组、去势HUA组UA水平显著升高(P<0.05)。第6周时,HUA组及去势HUA组UA水平显著高于假手术组及去势组(P<0.05),但UA水平有下降趋势;Ca水平显著低于假手术组及去势组(P<0.05)。第8周时,HUA组、去势HUA组UA水平显著高于假手术组及去势组(P<0.05);假手术组Ca水平显著高于其他3组(P<0.05)。第12周时,HUA组、去势HUA组UA水平显著高于假手术组,去势组HUA水平显著低于假手术组;HUA组及去势HUA组及去势组Ca水平显著低于假手术组;去势HUA组P水平显著低于其他3组;去势HUA组ALP水平显著低于假手术组及HUA组;去势组ALP水平显著低于假手术组(均P<0.05)。结论雄激素在HUA大鼠中能引起骨代谢的改变。     

小鼠淋巴细胞趋化因子重组腺病毒载体的构建及其在骨髓树突状细胞中的表达

经ＲＴ－ＰＣＲ克隆小鼠淋巴细胞趋化因子（Ｌｙｍｐｈｏｔａｃｔｉｎ，Ｌｔｎ）的全长编码ｃＤＮＡ，将其置于ＣＭＶ启动子下游，插入Ｅ１区替代的腺病毒载体ｐＡｘ１ｃｗ。Ｌｔｎ重组腺病毒载体ｐＡｘ１ｃｗ．ＣＩｍＬｔｎ与经ＥｃｏＴ２２Ｉ酶切的Ａｄ５腺病毒ＤＮＡ－末端肽复合物共转染２９３细胞，制备Ｌｔｎ重组腺病毒，扩增到的病毒滴度为３．６×１０９ｐｆｕ／ｍｌ。用重组ＧＭ－ＣＳＦ从小鼠骨髓中扩增到的树突状细胞本身并不表达Ｌｔｎ；体外感染Ｌｔｎ重组腺病毒后４ｈ即可经ＲＴ－ＰＣＲ检测到Ｌｔｎ的表达，其２４ｈ的细胞培养上清体外对ＣＤ４＋Ｔ细胞和ＣＤ８＋细胞具有显著的趋化活性，表明所制备的Ｌｔｎ重组腺病毒能有效介导Ｌｔｎ在树突状细胞中的表达，为研究Ｌｔｎ基因修饰的树突状细胞诱导Ｔ细胞免疫应答奠定基础。     

肾移植术后并发泌尿系肿瘤6例诊治分析

恶性肿瘤是肾移植术后一种严重的并发症，是影响患者长期存活的主要因素之一。我科2001～2006年共行同种肾移植术524例，术后发生泌尿系肿瘤6例，发生率1.1％。报告如下。1临床资料6例患者中，男1例，女5例；年龄43～69岁。原发病均为慢性肾小球肾炎，透析时间1～2年，移植术前无恶性肿瘤病史。[第一段]     

肾移植患者肠套叠1例

1病例报告 患者，男，48岁。因慢性肾炎、尿毒症于2006年2月行同种肾移植术。术后服环孢素A、硫唑嘌呤免疫抑制治疗，肾功能正常。术后1年感冒后出现肌酐异常升高，给予调整免疫抑制药后无明显缓解，2007年12月化验Cr达544μmol／L，诊断为肾移植术后排斥反应入院。     

麻疹疫苗强化免疫的流行病学效果观察

目的：探索控制麻疹的有效措施。方法：选择1个县为试点,11个县为对照。对试点县所有8个月－7岁儿童,进行一轮次麻疹疫苗（MV）的强化免疫,试点与对照MV常规免疫照常进行,之后观察2年,比较试点县和对照县MV强化免疫前后麻疹发病差异。结果：试点县MV强化免疫后麻疹发病率大幅度下降,1997年和1998年度（当年11月－次年10月）较1996年同期下降96．7％和93．5％,与对照县麻疹发病比较,差异有非常显著性意义（P＜0．01）,结论：MV强化免疫是控制麻疹流行乃至消除麻疹的有效补充策略。     

经皮肾镜碎石术中低体温对术后恢复影响的观察研究

目的 该文通过对经皮肾镜碎石手术病人围手术期情况的对比观察,探讨保持体温对手术病人术后情况的影响.方法 对沈阳军区总医院2011年12月-2012年11月实施经皮肾镜手术患者共112例进行观察.采用随机双盲法分为两组,每组56例.观察组：麻醉开始后,除术野以外身体部分覆盖双层大单外,还加盖充气式保温毯,将温度调节至36～40℃,直到手术结束,术中使用冲洗液及静脉输液均加温至37℃.对照组：术野以外身体部分覆盖双层大单,术中使用冲洗液及静脉输液不作特殊处理.观察两组手术结束后麻醉苏醒时间,麻醉后寒战发生,麻醉后躁动发生情况.结果 两组苏醒时间差异有统计学意义（P＜0.01）.对照组手术后寒战39例,观察组手术后寒战9例,两组数据差异有统计学意义 （P＜0.01）.对照组手术后躁动27例,观察组手术后躁动6例,两组数据差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 该研究通过对112例手术病人围手术期情况的观察,发现低体温可以延长术后苏醒时间,并使术后出现寒战和低血压的机会大大增加.     

负压封闭引流技术结合组织瓣转移修复足踝部软组织缺损

目的探讨应用负压封闭引流技术(VSD)进行创面清洁结合局部组织瓣转移修复足踝部复杂创伤、糖尿病慢性溃疡后局部软组织缺损的疗效。方法应用VSD技术进行创面负压吸引,待创面清洁后切取同侧或对侧腓肠神经营养血管皮瓣逆行转移、同侧内踝上皮支皮瓣逆行转移修复同侧足踝部软组织缺损45例。结果 45例均获随访6-24个月,皮瓣血运良好,质地优良,外形和功能恢复满意。结论创面反复扩创、应用VSD进行创面负压吸引结合灵活应用小腿部组织瓣转移修复是解决足踝部复杂创伤、糖尿病慢性溃疡后局部软组织缺损的有效方法。     

鼻腔冲洗液剂量对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者手术预后的影响

目的：观察不同鼻腔冲洗液体剂量对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉（CRwNP）患者手术预后的影响。方法：将90例CRwNP鼻内镜术后患者按随机数字表法分为A、B、C三组,每组30例,分别行1000、500、250 mL生理盐水冲洗鼻腔。术前及术后1、3、6个月采用视觉模拟量表评分（VAS）、SNOT-20、Lund-Mackay评分法、Lund-Kenenedy评分法进行评分;统计术腔清洁时间、术腔黏膜上皮化时间及术后6个月内需进行鼻内镜清理的次数。结果：术后1个月,A组的VAS评分优于C组（P〈0.05）;术后3个月A、B两组均优于C组,且A组优于B组（P〈0.05）。术后1、3、6个月,A组的SNOT-20总评分均优于C组（P〈0.05）;6个月B组优于C组（P〈0.05）。术后1个月,A、B两组的Lund-Kenenedy评分均优于C组（P〈0.05）。A、B组术腔清洁及上皮化时间均早于C组（P〈0.05）。术后6个月内所需鼻内镜检查次数A组少于C组（P〈0.05）。结论：鼻内镜术后大剂量的生理盐水（1000 mL）行鼻腔冲洗,能改善临床症状,促进术腔黏膜上皮化进程,从而缩短病程。