蛋白酶抑制剂对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响

目的 探讨蛋白酶抑制剂和组胺对肥大细胞类胰蛋白酶分泌的影响。方法 扁桃体组织经酶消化后，细胞成份用全HBSS重新悬浮，肥大细胞激发和抑制剂作用的试验在37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法测定。结果 鱼精蛋白具有刺激人类扁桃体肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用，其分泌量可高达基础分泌量的5倍。高浓度TLCK和TPGK可抑制抗-IgE诱导的类胰蛋白酶释放，TLCK在有否预培养的情况下均能抑制钙离子导入剂（cal-cium ionophore,CI)诱导的类胰蛋白酶释放，而TPCK则只有在20min预培养后才能显示此作用。结论 TLCK和TPCK抑制IgE依赖性和非依赖性类胰蛋白酶释放提示具有胰蛋白酶和糜蛋白酶活性的酶参与肥大细胞的激活-分泌偶联过程。     

引起皮肤超敏反应的化妆品成分

随着国民经济的发展，人民生活水平的提高，化妆品的应用也日益广泛，而化妆品引起的不良反应也开始越来越多地困扰着人类。其中皮肤变态反应性损伤在化妆品皮炎中占有相当大的比例（约30．0％～46．2％）。在化妆品诸多成分中能够作为变应原引起皮肤变态反应性疾病的成分也多达上百种。本文就常见的化妆品变应原及其引起的皮肤变态反应性疾病作一综述。     

老年COPD患者痰IL-18、-16、-4及IFN-γ水平的相关性研究及临床意义

目的:探讨老年慢性阻塞性肺病(COPD)患者痰白介素(IL)-18、-16、-4及IFN-γ水平相关性及临床意义。方法:老年COPD患者共73例(重度21例,中度21例,轻度31例)。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(SELISA)。检测其痰IL-18、IL-16、IL-4、IL-γ水平。结果:(1)老年COPD患者各组急性期痰IL-18值均显著高于轻度缓解期(P均<0.01)。其中重、中度组分别高出达6及4倍。治疗后,各组痰IL-18值显著下降。(2)老年重度、中度COPD患者急性期、缓解期痰IL-16值均显著高于轻度缓解期(P均<0.01)。其中急性期重、中度组分别高出达15及10倍。而治疗后,重度、中度组痰IL-16值明显下降。(3)老年COPD患者急性期痰IL-4值明显低于轻度缓解期(P均<0.05)。治疗后,重度组痰IL-4明显升高。(4)老年COPD(重度、中度)急性期痰IFN-γ值显著高于轻度缓解期(P均<0.01),治疗后,重度、中度组IFN-γ值明显减低。(5)急性期痰中IL-18、IL-16、IFN-γ水平之间均存在相关性。结论:老年COPD患者白介素水平存在向Th1方向变化的现象,痰IL-...     

优化PCR条件扩增人IL-10 cDNA及其原核表达载体构建

目的：探讨PCR扩增人IL—10基因片段的最佳反应条件并构建人IL—10原核表达载体。方法：运用降落PCR扩增5端GC含量高的人IL—10基因片段，主要对退火温度和热启动等因素进行优化选择；载体和PCR产物经拓扑TA克隆技术连接，常规方法转化、筛选阳性重组质粒。结果：PCR反应的最佳退火温度为68.5℃，此时扩增出的DNA片段大小符合预期设想，并通过茵落PCR和DNA测序得到证实。结论：在上述条件下获得的PCR产物纯度高、非特异性产物少，成功地构建了人IL—10原核表达载体。并提示降落PCR是一种潜在的一步找到最佳扩增条件的方法。     

RANTES对肥大细胞系P815细胞分泌IL-10的诱导作用及其机制

目的检测RANTES对肥大细胞IL-10和IL-12分泌的影响和可能的信号转导通路。方法 P815肥大细胞培养、激发后收集不同时间点的细胞和上清液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中IL-10和IL-12的水平,用细胞激发信号ELISA(CASE)方法检测丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt),细胞外信号调节激酶(ERK),信号转导子和转录激活子(STAT)3和p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路蛋白磷酸化情况。结果 RANTES能够促进肥大细胞P815分泌IL-10而对IL-12的分泌无明显影响。LY294002能够阻断RANTES引起的肥大细胞IL-10分泌并抑制RANTES引起的Akt磷酸化。结论 RANTES刺激肥大细胞P815分泌IL-10可能是通过激活Akt信号转导通路实现的。     

极罕见的致命性气管Rosai-Dorfman病:NF-κB作用探讨

Rosai-Dorfman病,亦称窦组织细胞增生症伴巨大淋巴结病(SHML),由美国Rosai和Dorfman于1969年首次报道.这是一种罕见的非肿瘤性组织细胞增生症,临床表现为双侧无痛性颈部淋巴结增生以及低热、ESR增快、白细胞增多和高γ球蛋白血症.     

以过敏性疾病发病机制为基础浅析其辅助诊断手段及临床意义

过敏性疾病的定义及其与超敏反应的关系 1906年von Pirquet提出了＂Allergy＂一词。其概念为：机体对抗原刺激产生的一种＂改变了反应性＂的状态,即＂变态反应＂。     

IL-29调节的肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体表达分析

目的:检测白细胞介素(interleukin,IL)-29引起的肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体(protease activated receptor ,PAR)-1,2,3,4表达?方法:肥大细胞P815培养后以不同浓度的IL-29激发肥大细胞,在不同时间点收集细胞,给予透膜和非透膜处理后用流式细胞术检测肥大细胞膜表面和胞浆内蛋白酶激活受体的表达?结果:IL-29激发肥大细胞2?6和16 h后肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-1表达与相应对照相比差异有统计学意义,而IL-29调节的膜表面PAR-1表达与胞浆内PAR-1表达相比,差异无统计学意义?IL-29引起的肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-2,3,4表达与相应对照相比,差异无统计学意义;而IL-29激发2 h肥大细胞膜表面PAR-2表达与胞浆内PAR-2表达相比,差异有统计学意义;IL-29激发6 h肥大细胞膜表面PAR-3表达与胞浆内PAR-3表达相比,差异有统计学意义;IL-29激发2?6和16h后肥大细胞膜表面PAR-4表达与胞浆内PAR-4表达相比,差异有统计学意义?结论:IL-29可以下调P815肥大细胞膜表面和胞浆内PAR-1表达,且IL-29引起的膜表面和胞浆内PAR-1表达无差异;尽管检测到PAR-2,3,4在膜表面和胞浆内的表达情况不同,但IL-29对膜表面和胞浆内PAR-2,3,4表达的调节作用不明显;流式细胞术检测的膜表面和胞浆内PARs表达结果均可反应IL-29调节的P815肥大细胞PARs表达情况?     

RANTES调节P815细胞膜与细胞质中蛋白酶激活受体表达的分析

目的:研究趋化因子RANTES对肥大细胞膜表面与细胞质内蛋白酶激活受体(protease-activated receptors,PARs)各亚型表达的影响?方法:肥大细胞瘤细胞P815以不同浓度RANTES(0.1?1.0?10.0?100.0 ng/ml)激发,于不同时间点(2?6及16 h)收集细胞,予透膜及非透膜处理,流式细胞术检测全细胞与细胞膜PARs的表达水平,分析细胞膜与胞质中PARs的表达变化?结果:RANTES作用6 h可显著下调细胞膜表面PAR1,2 h及16 h有下调趋势但差异无统计学意义,该下调效应可被抗RANTES单克隆抗体(anti-RANTES)取消;透膜处理后分析结果显示,RANTES对细胞质内PAR1表达无显著调节作用,细胞膜与细胞质中PAR1表达差异无统计学意义?RANTES对P815细胞PAR2?PAR3?PAR4表达均无显著调节作用?结论:RANTES可选择性调节肥大细胞膜表面PAR1表达水平,对细胞质内PAR1及其他PARs亚型(PAR2?PAR3?PAR4)胞膜与胞质水平均无显著影响?     

白花鬼针草花粉过敏原的分离鉴定与纯化

目的提取和分离纯化白花鬼针草花粉主要过敏原,并鉴定主要过敏原的致敏性。方法提取白花鬼针草花粉蛋白粗提液,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离粗提液蛋白组分并测定其分子质量,经离子交换层析法分离纯化几类主要的蛋白,Western blotting分别检测其与花粉过敏患者血清IgE结合情况及10位正常人阴性混合血清结合情况,对比鉴定每种主要蛋白质致敏原的致敏性。结果 SDS-PAGE结果示:在12.5~120ku之间广泛分布了20余条蛋白条带,其中主带7条,分子质量在35~70ku和10~15ku的区带蛋白含量最为丰富,余下的范围内还有约10余条次带。Westen-blotting检测示:白花鬼针草花粉变应原的致敏性强,与花粉过敏患者血清特异性IgE结合大。离子交换层析出6类主要变应原蛋白,其分子质量分别为70、65、54、49、39及33ku;阴性对照组Westen-blotting在70ku处有弱显色。结论白花鬼针草花粉的主要过敏原为70、65、54、49、39及33ku;70ku变应原致敏性最强。