新型过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞Wnt-β连环素信号通路的影响

目的 观察新型过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)激动剂DH9对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞(WT9-12)中Wnt-β连环素(catenin)信号通路的影响.方法 予以不同浓度的DH9作用WT9-12细胞72 h,MTT法检测细胞增殖情况;RT-PCR技术检测DH9干预后β-catenin mRNA水平.予GSK3β抑制剂(SB216763)或PPARγ抑制剂GW9662预处理WT9-12细胞后,再予以60 μmol/L DH9或单给DH9干预,Western印迹分别分析β-catenin、磷酸化β-catenin、GSK3β、磷酸化GSK3β蛋白水平.结果 DH9对WT9-12细胞增殖有抑制作用,60μmol/L DH9干预72 h对细胞的增殖抑制达50％,并随着干预时间延长,抑制率增高.60μmol/L DH9可下调β-catenin的蛋白表达(P＜0.01),上调磷酸化β-catenin的蛋白表达(P＜0.01),具有剂量依赖性.而DH9对β-catenin的mRNA水平无明显改变.DH9可上调磷酸化GSK3β的蛋白表达(P＜0.01),但对GSK3β的表达无明显影响.在SB216763预处理WT9-12细胞与DH9共处理72 h后,发现可逆转DH9对β-catenin的下调作用(P＜0.01),但GW9662对DH9下凋β-catenin的作用无明显改变.结论 DH9抑制WT9-12细胞的增殖具有时间和剂量依赖性,并且这种增殖抑制作用可通过GSK3β依赖的方式下调β-catenin的蛋白表达从而抑制Wnt-β-catenin信号通路实现,与PPARγ途径无关.     

自拟治痢汤治疗急性痢疾32例

目的 :观察自拟治痢汤对急性痢疾的疗效。方法 :采用随机分组对照观察法 ,治疗组 30例以自拟治痢汤治疗 ,对照组 2 1例用庆大霉素口服。结果 :治疗组总有效率为 87.5 % ,对照组总有效率为 6 1.9% ,两组差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :治痢汤对痢疾有较好的疗效     

通心络胶囊治疗缺血性脑血管病35例

目的 :观察通心络胶囊治疗缺血性脑血管病的临床观察。方法 :将 6 5例缺血性脑血管患者随机分为治疗组和对照组 ,其中治疗组 35例 ,采用通心络胶囊 (由石家庄以岭药业有限公司生产 )治疗 ,口服每次 4粒 ,日 3次。对照组 30例 ,给予尼莫地平片剂 (由德国拜耳公司生产 )治疗。口服每次 30mg ,日 3次。均治疗 4周为 1疗程 ,采用单盲法给药。结果 :通心络胶囊对缺血性脑血管病能明显改善临床症状及体征 ,治疗组显效 17例 (48.5 % ) ,有效 15例 (43.0 % ) ,无效 3例 (8.5 % ) ,总有效率 91.5 % ;对照组显效 12例 (40 % ) ,有效 12例 (40 % ) ,无效 6例 (2 0 % ) ,总有效率 80 % ;两组经统计学处理 ,有显著性差异 ,治疗组疗效明显优于对照组 (P <0 .0 5 )。同时通心络胶囊可显著降低胆固醇、甘油三脂水平 ,改善血液流变学指标 ,并有 91.5 %的病例经过治疗后局部脑血流灌注显像 (SPECT)显示局部脑血灌注缺损较治疗前明显改善。结论 :通心络胶囊对缺血性脑血管病的气虚血瘀、脉络瘀阻等所致的半身不遂、口舌歪斜、语言不利、偏身麻木不仁等症状具有较好的疗效以及能降低血清胆固醇、甘油三脂、改善血液流变学指标和改善脑供血。     

Mizagliflozin通过抑制钠－葡萄糖共转运体1的功能抑制常染色体显性多囊肾细胞增殖和纤维化

目的：探究钠-葡萄糖转运体1（SGLT1）抑制剂Mizagliflozin（MIZA）在常染色体显性多囊肾病中的作用。 方法：用Western-blot、qPCR、免疫荧光染色实验测定PKD1-/-和PKD1+/+小鼠肾脏组织、人肾癌旁组织和人多囊肾组织中SGLT1的表达和分布。用MIZA处理囊肿衬里上皮细胞（OX161）和肾小管上皮细胞（UCL93）,37℃孵育24、48和72h后行MTT实验和集落形成实验观察细胞增殖状况。qPCR测定100uM MIZA处理48h后OX161细胞的COL1A1、COL3A1和Fn表达量。MDCK 3D囊肿形成实验验证MIZA对囊泡形成的作用。mRNA-Seq技术检测UCL93、OX161和100uM MIZA处理48h后OX161细胞的差异表达基因,利用KEGG数据库进行富集分析。 结果：发现在多囊肾病患者和PKD1-/-小鼠多囊肾组织中SGLT1较正常肾脏组织表达量明显增高,免疫荧光染色发现主要表达在囊泡衬里上皮细胞。在体外实验中,MIZA随浓度和时间依赖性地抑制了多囊肾细胞的增殖和纤维化,在3D形成实验中抑制了囊肿的形成。mRNA-seq测序和KEGG富集分析显示,加入MIZA的差异表达基因主要富集在PI3K－Akt、MAPK等信号通路,与OX161和UCL93的差异表达基因富集通路相同。 结论：SGLT1抑制剂MIZA在体外实验中通过PI3K-AKT、MAPK等通路抑制多囊肾细胞的增殖和纤维化,延缓了多囊肾的生长,是多囊肾病的一个潜在治疗靶点。     

淫羊藿苷对急性肾损伤向慢性肾脏病转化小鼠模型的预防性保护作用

目的·探究淫羊藿苷在急性肾损伤（acute kidney disease,AKI）向慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）转化中的作用并探讨其可能的机制。方法·C57BL/6小鼠腹腔注射马兜铃酸2周,制作AKI向CKD转化模型,并于造模前1周或马兜铃酸注射2周结束时持续灌胃给予淫羊藿苷5周或2周。监测小鼠肾功能和肾脏病理损伤,并用透射电子显微镜观察肾小管上皮细胞线粒体结构,采用荧光定量PCR（qPCR）及免疫组织化学染色法检测脂肪酸氧化代谢通路、纤维化及炎症指标等。采用Transwell细胞小室共培养大鼠肾脏成纤维细胞株和大鼠肾小管上皮细胞株,模拟2种细胞之间的相互作用。先提前1 h在肾小管上皮细胞培养液中加入淫羊藿苷,再加入马兜铃酸干预24 h;去除药物干预后,将肾小管上皮细胞与成纤维细胞共培养24 h。qPCR或Western blotting检测肾脏上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferator activated receptor α,Ppara）、促纤维化因子、炎症因子、活化胱天蛋白酶（cleaved caspase-3）,以及肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因mRNA或蛋白表达的变化。用Ppara-siRNA转染肾小管上皮细胞,观察淫羊藿苷提前于马兜铃酸干预后PPARα下游线粒体脂肪酸氧化代谢相关指标以及cleaved caspase-3的表达变化。结果·马兜铃酸注射2周结束时和注射结束后2周（造模4周）,仅注射马兜铃酸的小鼠血清肌酐及尿素氮水平较对照组均显著升高,肾脏炎症细胞大量浸润,肾小管损伤严重;而提前给予淫羊藿苷干预的小鼠较马兜铃酸组肾功能明显改善,肾脏病理损伤减轻。造模4周时马兜铃酸组肾小管上皮细胞线粒体结构损伤严重,脂肪酸氧化代谢通路相关基因mRNA水平较对照组显著降低,伴巨噬细胞浸润及肾纤维化,提前给予淫羊藿苷干预后上述损伤或指标均明显缓解。在马兜铃酸注射2周结束时给予淫羊藿苷的小鼠血清肌酐和尿素氮水平、肾脏病理损伤、纤维化指标均与马兜铃酸组无明显差异。体外实验中,马兜铃酸可抑制肾小管上皮细胞Ppara mRNA表达,促进cleaved caspase-3、炎症因子及促纤维化因子表达升高,并上调共培养的肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因的表达,而淫羊藿苷提前干预对上述变化有明显的纠正作用。用siRNA敲低肾小管上皮细胞的Ppara后,淫羊藿苷对马兜铃酸抑制脂肪酸氧化代谢及促进细胞凋亡的预防保护作用减弱。结论·淫羊藿苷能预防马兜铃酸诱导的小鼠AKI向CKD转化;它可能是通过改善肾小管上皮细胞线粒体脂肪酸氧化代谢通路（尤其是PPARα）发挥作用。