血清代谢组学技术在2型糖尿病肾病早期诊断中的应用

目的探讨基于液质联用（LC／MS）的代谢组学技术在2型糖尿病肾病动物模型KK—Ay小鼠不同病程的诊断应用价值。方法试验组KK-Ay小鼠和对照组C57BL／6J小鼠各15只,从8周龄开始,每4周收集24h尿液测尿微量白蛋白,乙醚麻醉后空腹采血,分离血清检测空腹血糖、甘油三酯、尿素氮、肌酐、白蛋白等,同时对血清样品预处理进行LC／MS检测及代谢组学分析。第8、12、20周龄两组各处死3只小鼠,灌洗取肾后进行病理学检查。结果12周龄后KK—Ay小鼠空腹血糖、甘油三酯、尿微量白蛋白与C57BL／6J小鼠有统计学差异（P〈0．01）。KK—Ay小鼠12周龄系膜基质增加明显,20周龄出现基底膜增厚等病理改变。代谢组学主成份分析显示,各周龄KK—Ay小鼠与C57BIM6J小鼠血清代谢图谱差异显著,早于血生化和肾脏病理变化,代谢物模式的经时变化轨迹图能够反映2型糖尿病肾病的进展规律。结论基于LC／MS的代谢组学技术对动物血清的检测分析能准确区分各周龄试验组和对照组小鼠,并揭示病程进展规律,其作为一种辅助手段,可能在2型糖尿病肾病的早期诊断中具有应用前景。     

罗格列酮对多囊肾囊肿衬里上皮细胞p38促分裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

Objective To investigate the effect of rosiglitazone on p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) pathway in polycystic kidney cyst-lining epithelial cells. Methods The cyst-lining epithelial cells (PKD cells) from human polycystic kidney were treated with rosiglitazone (10 μmol/L), peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPARγ) inhibitor GW9662 (10 μmol/L), rosiglitazone (10 μmol/L) +GW9662 (10 μmol/L), p38MAPK specific inhibitor SB203580 (10 μmol/L), SB203580 (10 μmol/L)+ rosiglitazone(10 μmol/L) for 2 hours followed by epidermal growth factor (EGF) stimulation. Protein expressions of p38, phuspho-p38 (p-p38) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) were detected by Western blot. p38 mRNA was examined by RT-PCR. Expression of c-fos and c-jun was observed by immunocytochemistry. Results (1) EGF markedly up-regulated the expressions of p38, p-p38, PCNA, c-fos anti c-jun compared with control group (P<0.01). (2) Compared with EGF treated group, rosiglitazone significantly reduced p38 activation and mRNA expression (P<0.01, respectively). Rosiglitazone, rosiglitazone+SB203580 could significantly down-regulated p-p38, PCNA, c-fos and c-jun expression (P<0.01, respectively) with no significant difference between these two groups. (3) GW9662 partially reversed the reduction effect of rosiglitazone. Conclusions Rosiglitazone can inhibit proliferation of autosomal dominant polycystic kidney disease cyst-lining epithelial cells partially through down-regulating p38 activation and reducing c-fos, c-jun and PCNA expression. The above effect of rosiglitazone is in part PPARγ-independcnt.     

组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275联合化疗药物体外抑制膀胱癌

目的：观察组蛋白去乙酰酶抑制剂MS-275联合DNA化疗药物对膀胱癌T24细胞的抑制作用。方法：用MTT法测定MS-275单用及分别与阿霉素、丝裂霉素C和顺铂联用对T24细胞的抑制率，用金氏公式法判断联合用药的效果。结果：MS-275分别与阿霉素、丝裂霉素C、顺铂联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加，MS-275与丝裂霉素C联用的协同作用最明显，而MS-275与阿霉素和顺铂在中低剂量下联用亦表现为协同作用。结论：组蛋白去乙酰酶抑制剂可明显增强DNA化疗药物对膀胱癌细胞的细胞毒作用，为应用于晚期膀胱癌的化疗方案中提供可能。     

镧示踪法透射电镜显示肾脏细胞糖萼的方法学研究

目的 不同方案灌注小鼠后电镜观察肾脏各种细胞糖萼的显示情况,探讨镧示踪法显示肾脏细胞糖萼的最佳方法.方法 根据灌注方案的不同,将C57/BL6小鼠分为3组:①生理盐水组:小鼠放血后,用生理盐水5 ml自主动脉灌注,取肾脏后用2％硝酸镧一戊二醛固定液固定;②硝酸镧固定液组:用2％硝酸镧一戊二醛固定液5 ml相同方法灌注,取肾脏后固定方法同前;③硝酸镧溶液组:用2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液5 ml先后进行灌注,取肾脏后固定方法同前.各组均应用透射电镜观察肾脏的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞、足细胞和肾间质细胞连接的糖萼的显示情况,计算各组不同肾脏细胞糖萼的显示率,并进行比较.结果 镧示踪法透射电镜显示的小鼠肾脏细胞的正常糖萼表现为附着于细胞表面的一层电子致密物层.生理盐水组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼层的显示率均为0％;足细胞糖萼的显示率为20％;肾间质细胞连接的糖萼显示率(92％)较高.硝酸镧固定液组的肾间质血管内皮细胞和肾小球内皮细胞显示率较低(分别为16％和12％);足细胞糖萼和细胞连接的糖萼层显示率相对较高(分别为84％和96％).硝酸镧溶液组的肾脏各种细胞糖萼均能清晰显示,肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞、足细胞和细胞连接糖萼的显示率分别为100％、96％、92％和100％.与生理盐水组和硝酸镧固定液组比较,硝酸镧溶液组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼的显示率均显著增高(P＜0.01).硝酸镧固定液组和硝酸镧溶液组的足细胞糖萼的显示率均较生理盐水组显著增高(P＜0.01).各组的肾间质细胞连接糖萼的显示率无统计学差异(P＞0.05).结论 2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液先后灌注小鼠,取肾脏用相同固定液固定后行透射电镜检查,能清晰显示肾脏各种细胞糖萼层,尤其是肾脏血管内皮细胞糖萼层,这为肾脏糖萼的相关研究提供一种可靠的实验方法.     

ZNF262在常染色体显性多囊肾病患者肾组织中的表达及意义

目的:检测锌指蛋白262(ZNF262)在正常肾组织及不同发病阶段多囊肾组织中的表达,并以增殖细胞核抗原(PCNA)为对照,初步探讨ZNF262在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)中的作用.方法:根据肾小球滤过率(GFR)大小对ADPKD(n=8)进行分期,观察其影像学、常规病理检查结果,采用半定量RTPCR方法检测人正常肾组织(n=8)、早期多囊肾组织(n=4)、晚期多囊肾组织(n=4)中ZNF262和PCNA的表达,并对上述组织中ZNF262和PCNA的表达进行相关性分析.结果:与正常肾组织相比,ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾组织中的表达均显著增多(P＜0.01),且晚期多囊肾组织表达高于早期多囊肾组织(P＜0.05).ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾及正常肾组织中的表达存在显著的相关性(r1=0.842 6,r2=0.902 1,r3=0.883 5,均P＜0.05).结论:与正常组织相比,ZNF262不仅在ADPKD高表达,并且随着病程进展表达逐步增高,这与PCNA的表达具有显著的相关性.提示ZNF262可以作为检测ADPKD的指标,并有助于临床进展分期的判别.     

以FMEA为基础的风险护理模式对哮喘急性发作患者的影响

目的：探讨以失效模式和效果分析(FMEA)为基础的风险护理模式对哮喘急性发作患者的影响。方法：选取2021年4月1日～2022年4月1日收治的160例支气管哮喘急性发作患者为研究对象,按照随机双盲法分为A组和B组各80例,B组给予常规护理干预,A组在此基础上给予以FMEA为基础的风险护理模式;比较两组肺功能[包括第一秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV₁/FVC%)、用力呼出50%肺活量的呼气流量(FEF50%)、最大中段呼气流速(MMEF)]、用药依从性[采用Morisky用药依从性问卷(MMAS-8)]、生活质量[采用生活质量综合评定问卷(GQOLI-74)]、并发症发生情况。结果：干预后,A组FEV₁/FVC%、FEF50%、MMEF指标均优于B组(P<0.01);A组用药依从性率高于B组(P<0.05);干预后,两组GQOLI-74总评分高于干预前(P<0.01),且A组高于B组(P<0.01);A组咳嗽、喘息、肺部啰音及哮鸣音发生率低于B组(P<0.05)。结论：对哮喘急性发作患者采用以FMEA为...     

多囊蛋白1氨基段融合蛋白对肾小球系膜细胞细胞外基质及其降解基因表达的影响

目的研究多囊蛋白-1氨基段（PC-INF）融合蛋白对大鼠肾小球系膜细胞（RMC）Ⅳ型胶原及其降解调控基因表达的影响。方法用实时荧光定量RT-PCR法检测PC-1NF融合蛋白对RMCIV型胶原和细胞外基质（ECM）降解调控基因基质金属蛋白酶、金属蛋白酶1组织抑制剂（MMP-2、TIMP-1）表达的作用。ELISA方法检测培养的细胞上清液中Ⅳ型胶原含量的变化。免疫细胞化学方法观察融合蛋白对细胞核因子c-jun和c-fos表达的影响。Western印迹检测融合蛋白对蛋白激酶C（PKC）-α信号转导通路的影响。结果4mg／LPC-1NF融合蛋白作用48h后，RMCⅣ型胶原mRNA从（103±16）降至（82±11）拷贝，106GAPDH，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），培养上清液中的IV型胶原含量也明显降低；MMP2mRNA从（1150±90）升至（2770±）拷贝，106GAPDH，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），而TIMP-1mRNA从（5530±480）降至（3040±370）拷贝，106GAPDH，与对照组差异有统计学意义（P〈0．01）。DAB染色显示，融合蛋白作用后，RMC的c-jun和c-fos表达受到明显抑制。RMC经不同浓度PC-1NF融合蛋白作用48h后，随着融合蛋白浓度升高。PKC-α的表达逐渐减弱。结论PC-1NF融合蛋白可通过上调促进ECM降解的MMP-2和抑制ECM降解的TIMP-1之间的比值而促进Ⅳ型胶原降解；还可能通过PKC-α信号转导通路，抑制c-ju．和c-fos表达，从而抑制RMC的增殖和ECM的合成。     

曲古霉素A增强抗肿瘤药物对膀胱癌T24细胞的杀伤作用

目的观察HDAC抑制剂曲古霉素A(TSA)和针对DNA的抗癌药物联用对膀胱癌T24细胞的杀伤作用。方法用MTT法测定TSA单用及分别与ADM、MMC和DDP联用对T24细胞的抑制率,用金氏公式法判断联合用药的效果。结果TSA分别与ADM、MMC、DDP联合用药对T24细胞的抑制率均随着浓度的增加而明显增加,TSA与MMC联用的协同作用最明显,而TSA与ADM和DDP在中低剂量下联用亦表现为协同作用。结论HDAC抑制剂TSA可明显增强针对DNA的抗癌药物对膀胱癌细胞的杀伤作用,有希望应用于晚期膀胱癌的化疗方案中。     

基层医疗机构护士工作任务的调查研究

目的 了解国内基层医疗机构不同职称护士的工作任务, 为今后基层医疗机构护理人力资源的科学管理提供依据。 方法 采取分层抽样法对全国7个地理分区、2类基层医疗机构进行抽样,采用护士工作任务调查表对1 450名基层护士进行问卷调查。 结果 基层医疗机构护士工作任务中,“药物治疗相关任务”的执行频率以及综合评价得分最高,分别为（3.47±0.72）和（12.72±3.49）,“满足患者基本需求”的执行频率以及综合评价得分最低,分别为（2.04±1.02）和（6.98±4.74）。不同职称护士在“药物治疗相关任务”“其他活动”维度执行频率得分的比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;社区卫生院和乡镇卫生院护士在总体工作任务以及“评估、评价活动”“健康教育”“沟通交流活动”“伦理、法律活动”“其他活动”维度执行频率得分的比较,差异具有统计学意义（P<0.05）;社区卫生院和乡镇卫生院护士除“药物治疗相关任务”维度上差异无统计学意义外,在“总体工作任务”以及其余7个维度的工作任务重要性评分的比较,差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 基层医疗机构护士呈现年轻化、低职称化及低学历化等特点,基层护士工作任务主要以药物治疗相关活动为主,且职能分工和岗位设置不明确,社区卫生院护士大部分工作任务的执行频率和重要性评分均高于乡镇卫生院。     

遗传性视网膜疾病基因治疗的研究进展

遗传性视网膜疾病(IRD)是造成患者不可逆视力丧失或失明的重要原因,其预后差,临床缺乏有效的干预手段。基因治疗药物为该类疾病治疗创造了新的可能。腺相关病毒(AAV)是目前基因治疗中应用较广泛、较有前景的病毒载体之一。该文简述了AVV载体眼部应用的可行性,重点阐述了应用AAV递送系统治疗IRD的临床前及临床进展,并结合取得的数据评估其安全性及有效性。最后总结了基因治疗IRD的影响因素,展望今后的研究方向,以期为IRD治疗技术创新、AAV载体后续产品研发提供参考。