大鼠脂肪干细胞复合胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三维支架构建组织工程软骨

Objective To evaluate the character of the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold seeded with rat adipose tissue-derived stromal cells. Methods A dipose tissue were harvested from 6 weeks old Wistar rats and the stromal cells were harvested by type Ⅰ collagenase and then cultured in vitro. Type Ⅰ collagen was fully mixed with chitosan, freeze-dried and cross-linked with chondroitin sulfate, then freeze-dried again and sterilized by ethylene oxide. The pore diameter, water content, porosity of the scaffold were tested. The adipose tissue-derived stromal cells were digested, seeded into the plates, scaffold, and cen-trifuged into pellet, and then induced into cartilage. MTT detection for cell proliferation was done. After 3 weeks, the cell morphology, and cell proliferation and adhesion were observed, and chondrngenic differenti-ation was also analyzed. Results The pore diameter, water content, porosity tested for the scaffold showed an appropriate form. Cell proliferation showed faster in the scaffold and pellet culture system after 5 day, there was still cell proliferation in the scaffold system after 14 days but no obvious changes in the pellet cul-ture system; ceils on the scaffold proliferated densely showed by histological staining, but there was a scaf-fold structure residues in the inner layer. The finding of type Ⅱ immunohistochemistry stain showed that cells express strong positive for type Ⅱ collagen in the scaffold and pellet culture system whereas it was weakly positive in the plate culture system; the specific mRNA for cartilage, type Ⅱ collagen, aggrecan and SOX-9 were expressed in all three systems showed by RT-PCR, but type X collagen was expressed continu-ously in the plate culture system and expressed after 21 days in the pellet culture system, whereas it was not detected in the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold system. Conclusion The parameters of the collagen-chitosan-chondroitin sulfate scaffold were suitable in our study. The results suggested that it can promote the adipose tissue-derived stromal cells proliferation and chondrogenic differentiation better than the plate and pellet culture systems and maintain the phenotype of chondrocytes well; it is the optimal choice for cartilage tissue engineering in the future.     

椎间孔镜经不同入路治疗腰椎间盘突出症的临床进展

与传统开放性手术相比,应用经皮椎间孔镜技术(percutaneous transforaminal endoscopic discectomy,PT-ED)治疗腰椎间盘突出症具有手术创伤小、对脊柱稳定性影响小、恢复较快等特点。但是由于突出物位置的不同、病变节段高低或髂嵴阻挡等原因,PTED经椎间孔入路的适应证相对狭窄,尚不能取代开放性手术。新入路的开发及器械的改良已成为PTED目前研究的热点及未来发展方向。近年来,经椎板间隙入路和经髂骨入路的出现使得PTED的适应证得到了极大扩展。然而,操作不规范、对适应证或手术入路选择失当仍然是导致PTED手术失败的主要原因,因此本文就PTED的适应证、3种不同入路的手术方法、临床疗效和并发症进行综述。     

大鼠慢性马尾神经受压后脊髓内诱导型一氧化氮合酶与神经细胞凋亡的相关性

目的研究大鼠马尾神经慢性受压后诱导型一氧化氮合酶(i NOS)在脊髓内的变化,及其与相应节段脊髓内神经细胞凋亡的相关性。方法将健康成年SD大鼠30只随机分为对照组和实验组。对照组行假手术,仅切除L5椎板,实验组在L4平面置入硅胶片,造成马尾神经单节段受压。实验组分别于建模后第2、4、8、12周后,对照组于第4周,取腰L4前角脊髓组织,切片后进行免疫组织化学方法并结合图像分析技术,检测脊髓内i NOS的表达变化,应用TUNEL法检测凋亡神经细胞,透射电镜观察神经细胞形态学改变。结果对照组脊髓有极少量i NOS表达;实验组造模后第4周有轻度表达,第8、12周i NOS明显高于对照组。对照组脊髓中可见少量神经细胞凋亡,实验组从第4周起可见明显凋亡的神经细胞,且凋亡数量随时间的延长而增多。透射电镜观察发现实验组神经细胞发生凋亡改变。结论大鼠马尾神经慢性受压后,相应节段脊髓神经细胞i NOS表达增加,神经细胞发生凋亡,i NOS与神经细胞凋亡存在正相关。     

有机镓对去势大鼠骨代谢及骨量变化的影响

目的 观察有机镓对去势大鼠骨代谢及骨量变化的影响.方法 将30只大鼠随机分为假手术组、卵巢切除组和有机镓组.除正常对照组外,其他 2 组行卵巢切除.12周后假手术组、卵巢切除组给予PBS治疗,有机镓组给予有机镓干预.8周后取大鼠第五腰椎、股骨分别进行Micro-CT测定骨小梁组织结构;组织形态学测骨小梁占总骨量的百分数(BV/TV);生物力学测定股骨颈机械强度检查;生化指标检测比较血清TRAP、ALP、钙、磷.结果 Micro-CT测试表明有机镓组平均骨小梁厚度(Tb.Th)、皮质厚度Ct.Th)均明显高于卵巢切除组(P＜0.05),BV/TV明显高于卵巢切除组(P＜0.05),破骨细胞数显著减少,有机镓组股骨颈平均最大骨折负荷比卵巢切除组高27.4%,血清TRAP、钙、磷减少(P＜0.05).结论 有机镓减少骨吸收的同时增加骨形成,对于去势大鼠骨量减少有明显的改善作用.     

间充质干细胞在构建组织工程软骨中的实验研究

目的探索利用几丁质支架和间充质干细胞(MSC)构建组织工程软骨。方法抽取兔股骨骨髓,密度梯度离心分离骨髓MSC,用转化生长因子β(1TGF-β1)诱导第3代的骨髓MSC向软骨方向分化,2周后用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况。将分化后的软骨样细胞传代,接种在几丁质支架上,用含TGF-β1的培养基继续培养2周,再用免疫组化检测Ⅱ型胶原表达情况,并在电镜下观察软骨细胞的生长情况。结果骨髓MSC经TGF-β1诱导后,具有软骨细胞特点,接种在几丁质支架上继续培养2周,这些细胞在支架上生长良好,并仍能很好表达Ⅱ型胶原。结论MSC经TGF-β1诱导,分化成的软骨样细胞在几丁质支架上表型稳定,生长良好。     

高等医学院校教学督导制度的实践与评价

目的：发挥教学督导的作用，提高医学院校临床教学的质量。方法：教学督导组通过课堂听课，实验检查，调研观摩等对教学过程进行督导和评估，对强化教学意识，培养和提高教师的教学水平，推动教学方法，教学手段改革，提高教学质量都有促进作用，并取得一定的成绩。结果：保证了教学效果，使教学质量有了明显的提高。结论：加速医学现代化建设，培养高素质医学人才，教学督导的作用显得尤其重要。     

三种前路手术治疗多节段颈椎病疗效比较

目的比较三种颈椎前路融合术治疗多节段颈椎病的临床疗效。方法本文为回顾性研究。将2000年1月至2006年1月160例脊髓型颈椎病患者分为A、B、C三组:A组采用前路减压单纯髂骨植骨术式治疗,其中双节段32例,3节段18例;B组采用植骨融合并颈椎前路钢板内固定术式治疗,其中双节段33例,3节段19例;C组采用钛网并前路钢板内固定术式治疗,其中双节段36例,3节段22例。术后定期随访及拍摄X线片,观察疗效、椎间高度、颈椎前弯曲度和融合情况。结果平均随访时间2.2年,经过随访,A组植骨融合率为83.1%,B组植骨融合率为96.7%,C组植骨融合率为96.4%。终访时,A组平均椎间高度和颈椎前弯曲度较术后2周之间比较差异具有显著性意义(F=3.06,P<0.05),B组和C组之间差异则不具有显著性意义(F=2.42,P>0.05)。A组与B和C组之间远期疗效之间差异均具有显著性意义(F=3.15,P<0.05),B组和C组之间远期疗效之间差异不具有显著性意义(F=2.32,P>0.05)。结论单纯髂骨植骨方法简单,但并发症较多。颈椎前路钢板植骨融合内固定和钛网并前路钢板内固定,固定牢固,符合颈椎生物力学特性,并发症少,远期疗效好。     

退变颈间盘组织中一氧化氮和超氧化物歧化酶含量的变化及其意义

目的：研究一氧化氮(N0)和超氧化物歧化酶(SOD)在退变颈问盘组织中含量的变化并对其意义进行探讨。方法：用分光光度法测定32例颈间盘突出症(PCID)患者的颈间盘组织及10例正常颈间盘组织中的NO和SOD的含量并进行比较。结果：退变颈间盘组织中NO含量高于正常颈间盘组织，SOD含量低于正常颈间盘组织。结论：颈间盘退变时，颈问盘组织中NO升高SOD降低，氧自由基损伤在颈间盘退变中发挥重要作用。     

甲状旁腺素抑制人骨关节炎软骨细胞终末期分化的实验研究

目的:探讨甲状旁腺素(PTH)对人骨关节炎软骨细胞终末期分化的抑制作用。方法:分离和培养人骨关节炎软骨细胞,将其进行分组(PTH处理组和对照组),分别经PTH和盐水处理细胞,倒置显微镜观察细胞形态的变化,碱性磷酸酶(ALP)染色法检测ALP的分泌,RT-PCT法和WesternBlot法检测细胞内促终末期分化因子基因mR-NA和蛋白的表达。结果:人骨关节炎软骨细胞具有终末期成熟分化的特征,与对照组相比,PTH明显降低ALP染色的强度,显著降低细胞内促终末期分化基因mRNA和蛋白的表达。结论:PTH具有抑制人骨关节炎软骨细胞终末期分化的作用。     

IL-17在绝经后骨质疏松方面的相关研究

白介素-17(IL-17),CD4*细胞亚群Thl7细胞分泌的特征性细胞因子,在抵抗胞外细菌、真菌 感染的宿主防御以及各种自身免疫性疾病发病中起到了重要作用。绝经后骨质疏松现被认为可能是 一种炎症过程,现有研究表明IL-17在绝经后骨质疏松的发病机制中具有重要作用。本文综述了近 几年IL-17在绝经后骨质疏松相关研究中的研究进展,为后续相关研究提供理论支撑。