TMEFF1对神经母细胞瘤细胞系增殖的调控

目的 探究具有表皮生长因子结构域和两个卵泡抑素样结构域的跨膜蛋白1(TMEFF1/tomoregulin1)对神经母细胞瘤(NB)细胞系SN-K-BE(2)增殖和迁移的调控效应.方法 RT-qPCR检测神经母细胞瘤细胞系SN-K-BE(2)、IMR32、SK-N-SH、SK-N-AS 和正常细胞系 MCF 10A、hTERT RPE-1 中 TMEFF1 mRNA 表达量.利用小分子干扰 RNA(siRNA)瞬时敲低 MCF 10A、hTERT RPE-1 细胞和 SN-K-BE(2)NB 细胞中 TMEFF1 表达,RT-qPCR 检测TMEFF1 mRNA瞬时敲低效果后,结晶紫染色、实时无标记细胞分析(RTCA)检测细胞增殖;CellTiter-Glo(CTG)检测细胞活性.利用短发夹RNA(shRNA)稳定敲低正常细胞系和NB细胞系中TMEFF1表达,进一步通过集落形成实验、RTCA、CTG检测细胞增殖和活性,此外,通过免疫荧光检测Ki-67细胞阳性率,细胞划痕实验检测细胞迁移率.结果 与正常细胞系相比,NB细胞系中TMEFF1 mRNA表达量显著较高(P＜0.001).敲低TMEFF1对正常细胞系增殖影响无统计学意义,但在SN-K-BE(2)细胞中敲低TMEFF1,RTCA和集落形成实验结果显示细胞增殖能力减弱(P＜0.05),免疫荧光结果显示Ki-67阳性细胞率减少(P＜0.001),CTG结果显示细胞活性降低(P＜0.01),细胞划痕实验结果显示敲低组细胞迁移率显著低于对照组(P＜0.01).结论 TMEFF1是一种特异在NB细胞中高表达的膜蛋白,TMEFF1敲低后不影响正常细胞系的增殖,但显著抑制NB细胞系的增殖、迁移,提示TMEFF1可能在NB发生发展中发挥重要作用,可能成为NB靶向治疗的潜在新靶点.     

环状RNA核受体相互作用蛋白1对肿瘤发生发展的调控机制研究进展

环状RNA(circRNA)是一类广泛表达于真核细胞的单链共价闭合性非编码RNA分子.近来研究发现circRNA参与调控细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程,是肿瘤发生发展的关键调节因子.环状RNA核受体相互作用蛋白1(circ_NRIP1)作为一种环状RNA,在诸多人类肿瘤中呈现异常表达并能够调控肿瘤增殖和侵袭迁移等恶性生物学行为.阐明circ_NRIP1在肿瘤发生发展中的调控机制,能够为肿瘤诊断和治疗指明新的方向.     

腕关节结核158例临床分析

腕关节结核比较常见,在上肢三大关节中占第二位,病人多为青壮年,对其治疗的后果直接影响患者的生活质量。我院自1986年至1996年12月共收治腕关节结核158例,均通过手术治疗,经平均16个月随访。优良率达93．7％,通过总结我们体会;（1）腕关节有其独特的解剖结构,腕关节结核中,单纯滑膜结核和单纯骨结核较少见,而多为全关节结核。（2）早期诊断及早期治疗对于腕关节结核的预后有着直接的影响。（3）治疗方面以足量和联合化疗,彻底的病灶清除术,术后适当的固定,增强体质是预防关节结核复发的关键。     

血液放置时间和RNA反复冻融对RNA质量的影响

正在临床和科研工作中,血液和组织是比较容易获取的生物标本,特别适用于临床和实验室检测及生物样本库收集保存。DNA、RNA和蛋白质是三种重要的生物大分子,其中RNA在人类多种生理和病理过程中发挥着举足轻重的作用。RNA通常是从组织、全血和培养的细胞中提取获得~([1]),高质量RNA可满足RT-PCR、Northern blot、基因表达谱、转录组测序和阵列分析等生物学实验的研究需求~([2-3])。由于     

以脑卒中样症状起病的新型隐球菌脑膜脑炎一例

<正>1 病例报告患者男,46岁。因“左侧肢体无力、言语不清3.5 h, 意识障碍1 h”于2022-6-28入院。入院前3.5 h无明显诱因出现左侧肢体无力,左上肢可抬起,左手握力减退,可站立,身体向左侧偏斜,伴言语不清,尚能正常交流,无头晕、头痛、恶心、呕吐、吞咽困难、饮水呛咳、视物不清、视物旋转、肢体麻木等,1 h前出现意识障碍,躁动不安,问话不答,无抽搐、大小便失禁,遂就诊于作者医院。既往有高血压病史6年,     

N-乙酰半胱氨酸对纳米二氧化硅所致细胞毒性的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对纳米二氧化硅(SiO₂)颗粒导致细胞中活性氧(ROS)水平升高的抑制作用,阐明纳米SiO₂颗粒致细胞毒性的机制。方法:选用粒径为68 nm的纳米SiO₂颗粒,以体外培养的人正常肝细胞(L-02)为模型,分为对照组和不同浓度(1、2、5、10 mmol·L^-1)NAC预处理组、不同浓度(10、20、50、100 mg·L^-1)纳米SiO₂颗粒暴露组和NAC预处理的纳米SiO₂颗粒暴露组。采用MTT法测定不同浓度NAC预处理后的细胞存活率以及不同浓度NAC预处理后暴露于纳米SiO₂颗粒的细胞存活率;倒置显微镜观察NAC预处理后暴露于纳米SiO₂颗粒的细胞形态;荧光酶标仪检测NAC预处理后暴露于不同浓度纳米SiO₂颗粒的细胞中ROS水平。结果:NAC预处理组细胞存活率均高于对照组,在5 mmol·L^-1 浓度时达到峰值,但与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度NAC能使暴露于纳米SiO₂颗粒的细胞存活率升高,以5 mmol·L^-1 NAC的作用最明显(P<0.05);与纳米SiO₂颗粒暴露组比较,NAC预处理的纳米SiO₂颗粒暴露组细胞数目增多,细胞边界较明显;随纳米SiO₂颗粒浓度的升高,细胞中 ROS水平随之升高,呈现剂量依赖效应,在50和100 mg·L^-1浓度时与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);与相同浓度纳米SiO₂颗粒暴露组比较,NAC预处理的纳米SiO₂颗粒暴露组细胞中ROS水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:NAC在一定程度上能够抑制纳米SiO₂颗粒所致的细胞存活率下降和细胞中ROS水平升高,细胞中ROS水平升高是纳米SiO₂颗粒导致人正常肝细胞毒性的作用机制之一。     

巯基乙酸-碲化镉量子点对人肝细胞毒性和DNA损伤的诱导作用

目的：研究巯基乙酸（TGA）包覆的碲化镉(CdTe)量子点（QDs）对人正常肝HL-7702细胞的毒性和DNA损伤的作用,为QDs毒理学研究和安全性评价提供实验依据。方法：实验设立对照组和不同浓度CdTe QDs作用组（浓度分别为6.25、12.50、25.00和50.00 mg/L）。CdTe QDs作用于HL-7702细胞后,分别采用MTT法检测细胞增殖变化,单细胞凝胶电泳法（SCGE）检测细胞DNA损伤情况,PI单染流式细胞术（FCM）检测细胞周期变化,AO/EB双荧光染色法和Annexin Ⅴ- FITC/PI双染FCM检测细胞凋亡情况。结果：MTT法,CdTe QDs可抑制HL-7702细胞增殖,并存在剂量-效应和时间-效应关系;SCGE和PI单染FCM法,CdTe QDs作用于HL-7702细胞24 h后,随着剂量的增加,DNA损伤率逐渐增高,G0/G1期细胞百分率显著下降,S期和G2/M期细胞百分率明显上升（P<0.05）;AO/EB检测,CdTe QDs作用后细胞出现凋亡形态学改变;Annexin Ⅴ-FITC/PI双荧光标记FCM法,CdTe QDs染毒可促进细胞凋亡,各剂量组细胞凋亡率与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：CdTe QDs可影响细胞存活,引起DNA损伤、细胞周期阻滞,并诱导细胞凋亡。     

急诊Ⅰ期修复膝前复合组织缺损一例

患者　男 ,2 7岁 ,火车行驶中上车时 ,左膝关节被地面拖伤入院。临床表现 :左膝关节前皮肤缺损 4cm× 5cm ,髌骨、髌韧带完全磨损。胫骨平台前 1/3楔形缺如 ,创腔污染较重 ,前抽屉试验(+) ,后抽屉试验 (- ) ,侧方应力试验(- ) ,X线片示髌骨及胫骨平台前 1/3缺如 ,膝关节无脱位征。治疗方法 :硬膜外麻醉 ,气囊止血带下行左膝关节清创探查修复术。术中彻底清创 ,大量等渗盐水反复冲洗 ,去除关节腔内所有失活挫灭组织及污物。清创后探查见胫骨髁间嵴存在 ,前交叉韧带 (ACL)自胫骨附丽处部分断裂 ,残端不规整 ,韧带略松弛 ,弹性尚可 ,后交叉韧…     

运动对纳米二氧化硅染毒大鼠肝肾组织毒作用的研究

目的研究运动强度对纳米SiO_2染毒大鼠的肝肾毒性的影响。方法透射电子显微镜下观察颗粒在高纯水中的形状和分散性,用动态散射光粒度分析仪测量纳米SiO_2颗粒水合粒径的大小。采用非暴露式气管滴注法构建大鼠纳米SiO_2染毒模型,给药剂量为10 mg/kg·bw,同时给予游泳干预,隔日给药,共给药15次。于最后一次运动24 h后取出肝和肾。光学显微镜下观察肝肾组织病理学改变。对肝肾组织氧化损伤进行检测:氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)。对肝肾组织中羟脯氨酸含量进行检测。采用Masson染色对组织胶原纤维进行特染。以P-smad2/3作为TGF-β1/Smad通路活化的标志,通过免疫组织化学染色法检测TGF-β1、Smad2、Smad3、p-Smad2/3在动物肝肾的表达情况。结果随着运动强度的增大,肾中MDA含量增高,但差异无统计学意义(P0.05),GSH-Px活力减少,低强度运动组与阴性对照组和阳性对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05);肝脏中SOD含量减少,高强度运动组与阴性对照组和阳性对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05);肝中羟脯氨酸含量减少,且高强度运动组与阴性对照组和阳性对照组相比差异均有统计学意义(P0.05)。Masson染色显示各运动组较阳性对照组胶原纤维增多。免疫组化结果显示,各运动组大鼠肝中Smad3均高于阴性对照组(P0.05),并呈现与运动强度呈正相关性。各运动组大鼠肾中Smad2和Smad3均低于阴性对照组(P0.05),且Smad2随运动强度增加而降低。结论运动强度增加会加重纳米SiO_2对小鼠的肝肾毒性。     

血清HbA1c水平与2型糖尿病的相关性

目的探讨血清糖化血红蛋白（HbA1c）水平与2型糖尿病患者血糖的相关性。方法 2型糖尿病患者106例随机分为A组和B组各53例。另选取身体健康的志愿者20例作为对照组。A组采取胰岛素治疗结合饮食及运动疗法;B组采取饮食及运动疗法,检测对照组及A、B 2组治疗前后血清HbA1c水平,并进行比较分析。结果 A、B 2组治疗前血清HbA1c水平均高于对照组（P〈0.05）。A、B 2组治疗后血清HbA1c水平均显著低于治疗前（P〈0.05）;A组治疗后血清HbA1c水平显著低于B组（P〈0.05）。血清HbA1c与血糖水平呈正相关（r=0.52,P〈0.05）结论血清HbA1c水平与糖尿病关系密切,能够监测糖尿病患者病情发展与治疗进展情况。