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抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究 总被引:7,自引:9,他引:7
目的:制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体(mAb),建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法:以hBCMA—Ig融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合制备抗Fc段mAb,用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性,建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法;Western blot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联,制备亲和层析柱,对LAIR1-Ig融合蛋白进行纯化。结果:获得7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤(FMUFcl-FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb,FMUFc5作为酶标记mAb,成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法,敏感度达到2μg/L;在7株mAb中,FMUFc6可用于Ig融合蛋白的western blot检测。用FMUFc 6mAb制备的亲和层析柱,可有效地纯化LAIRl—Ig融合蛋白。结论:成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb,建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法,为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段。 相似文献
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目的探讨醛固酮合成酶(CYB11B2)基因多态性与怀化侗族高血压高发人群原发性高血压(EH)及血脂水平的关系.方法采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法(PCR-RFLP)检测89例怀化侗族高血压病人和85例正常人的CYB11B2-344C/T等位基因频率和基因型频率.结果高血压组CYB11B2-344C/T基因型频率(CC 10.1%、CT41.6%、TT 48.3%)和等位基因频率(C 30.9%、T 69.1%)与正常对照组基因型频率(CC 10.3%、CT 27.6%、TT 62.1%)和等位基因频率(C 24.1%、T 75.9%)比较无显著性差异.CC基因型患者与CT TT基因型患者比较,收缩压和舒张压无显著性差异.结论怀化侗族人群EH可能与CYB11B2基因多态性无关. 相似文献
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神经节苷脂GM1对新生大鼠缺氧缺血性脑病的作用研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)及其后的癫痫发作是否具有保护和预防作用以及可能作用机理,为临床应用GM1治疗HIE提供理论依据。方法 建立新生大鼠HIE模型。用组织化学方法和免疫组织化学方法观察缺氧缺血后脑损害的形态学改变,兴奋性氨基酸Glu阳性(Glu-IR)神经元和抑制性氨基酸GABA阳性(GABA-IR)神经元表达和GM1对上述变化的影响。结果 盐水处理组与GM1治疗组相比病变较重,Glu-IR神经元和GABA-IR神经元数目减少与GMI治疗组差异有显著性意义。结论 GM1能够在一定程度上减轻新生大鼠缺氧拭岂血后病损灶,保护Glu-IR神经元和GABA-IR神经元,尤其是对GABA-IR神经元的保护作用,提示GM1对新生大鼠缺氧缺血后的癫痫发作具有一定的预防作用。但尚需进一步探讨研究。 相似文献
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An increasing demand for polycistronic vectors that express multiple genes simultaneously has arisen in recent years to obtain an efficient gene therapy. Armed with the knowledge that the expression of transgene in mammalian cells often requires tight control, we constructed in this study a tetracycline-regulated double-gene adeno-associated virus (AAV) vector carrying green and red fluorescent protein genes and expressed it in PC12 cells. When detected by fluorescence microscope and fluorescence-activated cell sorting, gene expression was induced by 44-66-fold and could be reversibly controlled by doxycycline. This double-gene AAV vector may be useful for regulated expression of two genes or a marker to monitor transgene expression. 相似文献
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本文采用MTT微量酶反应比色法,研究了溴氰菊酯对白纹伊蚊C6/36细胞的杀伤作用、形态影响以及受损细胞的恢复。结果发现用溴氰菊酯处理24h后,对C6/36细胞的半数毒性浓度(IC50)为7488μg/ml,且毒性作用强度随着药物浓度增加而增强。溴氰菊酯浓度在20μg/ml以上时可以诱发C6/36细胞形态学改变,表现为细胞呈多形性、细胞间有间隙、胞质内充满颗粒,以后随药物浓度的升高,胞质出现空泡、染色质凝成粗大颗粒或无结构大块、大片细胞脱落、崩解、死亡。高浓度溴氰菊酯(160μg/ml)作用于C6/36细胞,其受损细胞的恢复与作用时间有关,作用24h的细胞,在经历一段生长停滞后,可缓慢恢复,而作用48h的细胞,则不可逆转的死亡 相似文献
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鄂伦春族Y染色体短串联重复序列多态性研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的 调查鄂伦春族Y染色体上10个短串联重复序列基因座及单倍型的遗传多态性。方法 应用PCR和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染显色分型技术,检测102名无关系鄂伦春族男性血样。结果 在DYS392、DYS438、DYS439、DYS456、DYS459、DYS460、DYS461、DYS462、DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ等10个基因座中共检出44个等位基因,等位基因频率分布在0.418(DYS461)至0.727(DYS389Ⅰ)之间,除了DYS461(0.418)和DYS462(0.479)以外,其余等位基因频率均大于0.5。由10个基因座组成的Y染色体单倍型系统单倍型有101种,单倍型频率0.99。结论 上述10个Y-短串联重复基因座在鄂伦春族群体中具有较好的多态性,单倍型具有很高的遗传多态性。 相似文献
139.
Replicative MCM7 protein as a proliferation marker in endometrial carcinoma: a tissue microarray and clinicopathological analysis 总被引:3,自引:0,他引:3
Li SS Xue WC Khoo US Ngan HY Chan KY Tam IY Chiu PM Ip PP Tam KF Cheung AN 《Histopathology》2005,46(3):307-313
AIMS: To assess, in tissue microarray (TMA), the proliferative activity of endometrial carcinoma using one of the minichromosome maintenance (MCM) proteins (MCM7), and to explore its potential value for prognosis. MCM proteins are essential for eukaryotic DNA replication and have recently been used to define the proliferative compartments in human tissues. METHODS AND RESULTS: Immunohistochemistry for MCM7 and Ki67 was performed on TMAs constructed from 212 cases of endometrial carcinoma. MCM7 and Ki67 expression was quantified according to the extent of nuclear staining. An analysis was carried out of the association between MCM7 expression and that of Ki67 and the clinicopathological characteristics of endometrial carcinoma. MCM7 and Ki67 immunoreactivity was clearly evident in the nuclei of tumour cells. MCM7 and Ki67 labelling indices in endometrial carcinomas correlated with each other (P < 0.001). A significant correlation existed between the MCM7 labelling index and histological grade (P = 0.008) and patients' age at diagnosis (P < 0.001). Well-differentiated carcinomas and younger patients had a lower MCM7 index. Poor survival was observed in patients with endometrial carcinoma with a high MCM7 index (P = 0.03) and MCM7 was found to be an independent prognostic factor by multivariate analysis (P = 0.04). The Ki67 labelling index correlated with histological grade (P = 0.01) but had no significant prognostic impact (P = 0.50). CONCLUSIONS: In this TMA study on endometrial carcinoma, MCM7 was found to be a more reliable and useful marker than Ki67 in assessing tumour proliferation and in the prognosis of patients. 相似文献
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Laboratory evaluation of mosquito repellents against Aedes albopictus, Culex nigripalpus, and Ochierotatus triseriatus (Diptera: Culicidae) 总被引:2,自引:0,他引:2
Four synthetic mosquito repellents (Autan [10% KBR3023], IR3535 [7.5%], Off! [15% deet], Skinsations [7% deet]) and eight natural (primarily plant extracts and/or essential oils) product-based repellents (Bite Blocker [2% soybean oil], ByGone, GonE!, Natrapel [10% citronella], Neem Aura, Sunswat, MosquitoSafe [25% geraniol], and Repel [26% p-menthane-3,8-diol]) were tested in the laboratory against Aedes albopictus Skuse, Culex nigripalpus Theobald, and Ochlerotatus triseriatus (Say). When estimated mean protection time (eMPT) responses for each repellent were averaged for all three mosquito species, Autan, Bite Blocker, Off!, and Repel prevented biting for > or =7.2 h; IR3535, MosquitoSafe, and Skinsations for 3.2-4.8 h; and ByGone, Natrapel, GonE, NeemAura, and SunSwat for 0.9-2.3 h. Against Ae. albopictus, the eMPT for Off! and Repel exceeded 7.0 h and ranged from 5.0 to 5.7 h for Autan, Bite Blocker, and Skinsations. Bygone, GonE, NeemAura, and SunSwat provided 0.2 h protection against Ae. albopictus and Oc. triseriatus, whereas Autan, Bite Blocker, Off., and Repel prevented bites by Oc. triseriatus for > or =7.3 h. All 12 repellents provided an eMPT > or =2.8 h against Cx. nigripalpus (maximum: 8.5 h for Bite Blocker). When the average eMPT for each repellent (for all species) was divided by the eMPT for 7% deet (Skinsations), the order of repellent effectiveness and the corresponding repellency index (R,) was Repel (1.7) > Bite Blocker (1.5) = Autan (1.5) = Off! (1.5) > Skinsations (1.0) > IR3535 (0.8) > MosquitoSafe (0.6) > Natrapel (0.5) > Neem Aura (0.3) = SunSwat (0.3) = Bygone (0.3) > GonE (0.2). 相似文献