四甲基联苯胺在ELISA和免疫斑点试验中的应用

本文以间接法ELISA检测轮状病毒特异性IgG为模型,对新底物四甲基联苯胺(TMB)与邻苯二胺(OPD)进行了比较研究,结果发现,TMB具有下列优点:①稳定性好;②敏感性高;③酶结合物和H_2O_2用量少。而且TMB又无致癌性,故是辣根过氧化酶较理想的底物。此外,还首次将TMB应用于免疫斑点试验,获得成功。     

护生自身练习护理操作的伦理问题及对策

自身练习护理操作就是以护生作为练习对象,相互间在各自身上完成注射、输液等操作练习项目,以达到教学要求[1]。在基础护理的教学中,自身练习对于调动护生的参与感,增加真实感,满足成就感方面起着十分重要的作用。但是,也必须看到在积极效果背后的种种矛盾以及由这些矛盾可能导     

Macrophages are activated by 17beta-estradiol: possible permission role in endometriosis.

On the basis of the common occurrence of high concentration of estrogen and activated macrophages in patients with endometriosis, we postulate that interaction between 17beta-estradiol and macrophage may be an important affair in endometriosis. So our study was focused on the effect of 17beta-estradiol on macrophage. First morphology of macrophages was examined with environmental scanning electron microscopy. Increased size, extension of more microvilli, expression of retraction fibers and elaboration of membrane ruffles were detected in 17beta-estradiol treated macrophages. Then Nitrate and nitrite level in the supernatant was measured by the method of Griess and iNOS expression was analyzed using immunohistochemical staining. It showed that 17beta-estradiol could induce NO release from peritoneal macrophages and expression of iNOS was increased. Also more TNF-alpha in supernatant that was measured by MTT via L929 cell was produced by macrophages under the inducing of 17beta-estradiol. Furthermore, [Ca2+]i, which was viewed by microscope in a laser scanning confocal unit, elevated 39.8% in peritoneal macrophages after 17beta-estradiol 100 nmol/L treated. The results above demonstrated that peritoneal macrophage had been activated in both morphology and cytokine line when interaction with 17beta-estradiol, which indicated that macrophage activated by 17beta-estradiol might play a permission role in development of endometriosis.     

脑梗塞患者血清叶酸维生素B12浓度与同型半胱氨酸及血脂水平的研究

目的探讨本地区脑梗塞患者的血清叶酸、维生素B12（VitB12）与同型半胱氨酸（Hcy）水平及血脂水平的关系。方法应用全自动化学发光免疫法测定115例脑梗塞患者血清叶酸、维生素B12水平，采用荧光定量分析法测定血清同型半胱氨酸水平，采用免疫比浊法测定血脂水平。结果脑梗塞患者血清叶酸水平明显低于对照组（P〈0．001），血清Hcy及甘油三酯（TG）水平明显高于对照组（P〈0．01），而维生素B12及其余所测血脂指标与健康对照组无显著差异（P〉0．05）。结论即时监测血清叶酸、Hcy及TG水平，适当补充叶酸，可早期预防和及时治疗脑血管疾病，降低脑梗塞的发生率及复发率。     

恐惧应激对大鼠睾丸中Annexin5表达的影响

目的观察大鼠应激条件下睾丸组织中Annexin5表达的变化。方法建立SD大鼠的恐惧应激模型，分别取急性应激、急性对照、慢性应激、慢性对照SD大鼠睾丸，免疫组织化学和Western blotting分析Annexin5免疫定位和蛋白表达。结果急性应激组与对照组相比，免疫组化显示Annexin5都定位在间质细胞、支持细胞和成熟的精子头部，Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了10．8％；慢性应激组与对照组相比，免疫组化结果显示Annexin5在精子头部的定位逐渐减少，应激1w和2w组，未见到Annexin5定位于精子头部，到了应激的3w和4w，发现Annexin5重新定位于精子的头部，而在间质细胞和支持细胞上的定位模式没有显著变化。Western blotting分析发现Annexin5的表达降低了17．4％。结论大鼠睾丸Annexin5参与了应激过程，急性应激条件下Annexin5表达降低。随着应激时间的延长，在慢性应激条件下，Annexin5的表达由减少之后而开始有缓慢增加。     

骨肉瘤细胞特异性结合短肽的筛选

目的：获得与骨肉瘤细胞株os-732特异结合的短肽，作为骨肉瘤靶向治疗的先导化合物。方法：以骨肉瘤细胞os-732为靶细胞，成骨细胞为吸附细胞对噬菌体12肽库进行差减筛选，用细胞ELISA、免疫组化鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果：经三轮筛选，从随机挑选的20个噬菌体克隆中得到9个特异性与骨肉瘤细胞os-732结合，而不与正常成骨细胞结合的阳性克隆。但其氨基酸序列无同源性。结论：得到多个序列不同的特异性结合骨肉瘤的噬菌体克隆，提示骨肉瘤细胞表面结构复杂，具多个骨肉瘤抗原表位。本实验获得的短肽具有一定的亲合力和肿瘤特异性，为针对不同位点的靶向药物设计提供了实验依据。     

勃起功能障碍可能是心血管疾病的信号

近期一项调查研究显示，出现勃起功能障碍的老年健康男子可能存在隐性心血管疾病。共有8063名55岁以上无心血管疾病的美国男子参加了该项队列研究，试验初始时4247人具有正常勃起功能。     

我国原料药产业的发展策略

经济全球化进程的加快，中国加入世贸组织，为我国医药产业国际化发展带来了机遇。     

凋亡素原核表达载体的构建和表达

目的 构建凋亡素原核表达系统，以制备抗原物质凋亡素融合蛋白。方法 通过PCR方法，以pcDNA-VP3质粒为模板，扩增出凋亡素VP3基因。将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点，构建成凋亡素的高效原核表达栽体pET-DsbA-VP3，将该质粒转化到大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS中，以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside，IPTG)对其进行诱导表达，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白。结果 转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E．coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后，聚丙烯酰胺凝胶电泳出现38300的目的蛋白条带。结论 凋亡素原核表达栽体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白。     

肿瘤微环境对树突细胞功能状态的影响

目的：探讨肿瘤细胞分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对树突细胞(DCs，dendritic cells)的分化发育的影响，以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制。方法：用免疫磁珠从人外周血分离CD14^ 单核细胞，加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)和人白血病细胞Jurkat培养上清液体外培养DCs，以正常培养诱导的DCs作为对照，采用傅立叶变换红外光谱(FTIR)技术分析人白血病细胞培养上清液对DCs分化发育的影响。结果：正常培养DCs与肿瘤上清液培养的DCs相比，在细胞内蛋白质和核酸的相对含量和细胞内消耗葡萄糖重新合成磷脂的量方面差异无显著性，但是，在细胞的转录状态方面差异有显著性。结论：肿瘤细胞上清液培养液所营造的微环境细胞转录水平上对DCs的功能状态有明显的抑制作用。