脑肿瘤p16基因缺失，突变及5’CpG岛甲基化研究

目的：探讨不同种类的脑肿瘤P16基因变异及其与脑肿瘤的发生,发展的关系。方法：利用PCR,PCR－SSCP及PCR－based甲基化技术检测了56例胶质瘤,15例脑膜瘤及2例原发性脑淋巴瘤P16基因缺失,突变及5’CpG岛甲基化状况,结果：18例高病理级别的脑胶质瘤及1例原发性脑淋巴瘤发生P16基因缺失;6例脑胶质瘤及1例原发性脑淋巴瘤发生P16基因5’CpG岛甲基化,无1例发生P16基因突变。结论：P16基因失活可能参与脑胶质瘤的发生,恶性进展及原发性脑淋巴瘤的发生,P16基因缺失是P16基因失活的主要机制。     

黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤分子遗传学研究进展

  近年来对MALT淋巴瘤的研究主要集中在基因和染色体异常。除早期发现的t(11;18)(q21;q21)／API2-MALT1融合基因外,还发现t(1;14)(p22;q32)／BCL10-IgH或t(1;2)(p22;p12)／BCL10-IgLκ;t(14;18) (q32;q21)／IgH-MALT1;t(3;14)(p14.1;q32)／FOXP1-IgH以及BCL6基因异常。另外,对MALT淋巴瘤和由此转化的弥漫大B细胞淋巴瘤的关系也逐渐明确,发现了独特的或二者相互重叠的基因异常。这些分子遗传学的研究,有助于了解MALT淋巴瘤的发病机制,也有助于早期诊断和合理治疗。     

肺炎性假瘤及球形肺结核细胞增殖研究

目的了解肺炎性假瘤及球形肺结核是否存在细胞增殖异常。方法用流式细胞仪对9例患者(其中5例肺炎性假瘤、4例球形肺结核病)痰液细胞DNA含量进行分析,并与痰细胞学检查、手术及经皮肺活检组织P53、PCNA、Ki67免疫组化分析结果作比较。结果以最后病理诊断为标准,肺炎性假瘤及球形肺结核患者异倍体检出率分别为40%(2/5)与50%(2/4),其相应的病变组织切片PCNA、Ki67免疫组化染色也阳性,但P53免疫组化染色阴性。结论部分炎性假瘤及结核球存在细胞增殖异常。痰细胞DNA含量分析是发现增殖异常的有效辅助方法,可能有利于肺癌的早期诊断。     

草酸铂联合氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸治疗晚期大肠癌临床疗效观察

目的观察应用草酸铂联合氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸治疗晚期大肠癌的客观疗效及不良反应。方法草酸铂联合甲酰四氢叶酸和氟尿嘧啶持续静脉滴注46小时治疗晚期大肠癌48例(L-OHP130mg/m2静注2小时,d1,CF400mg/m2静脉输注2小时,d2,再接5-FU3.0g/m2用输液泵连续静注46小时,以上治疗方案每2周重复一次,化疗第5~11天均给予升白支持),所有病人均接受3个周期以上化疗。结果PR 23例,SD 18例,PD 7例,总有效率47.9%,中位疾病无进展期6.6个月,中位生存期10.5个月,1年生存率36.8%。主要不良反应有恶心、呕吐、黏膜炎、外周神经炎等。毒性反应多为Ⅰ~Ⅱ度,病人耐受良好。结论应用草酸铂联合氟尿嘧啶、甲酰四氢叶酸治疗晚期大肠癌疗效确切,不良反应轻微,值得临床推广使用。     

ADAR1 mRNA在肝癌及癌旁组织的表达及意义

目的探讨ADAR1mRNA在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁组织的表达及意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测诊断为HCC41例患者的肝癌及癌旁组织RNA编辑酶ADAR1mRNA的表达。结果所有肝癌组织RNA编辑酶ADAR1均有表达,相对表达量为3.340±0.863;所有癌旁组织有RNA编辑酶ADAR1表达,相对表达量为0.801±0.209;对照的26例正常肝组织及其他肝脏疾病标本RNA编辑酶ADAR1的相对表达量为0.880±0.226。将肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间存在显著性差异(t=18.30,P<0.001);肝癌组织和对照肝组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间亦存在显著性差异(t=17.65,P<0.001);将癌旁组织和对照肝组织检测到的ADAR1mRNA的表达量进行成组t检验,两者间差异无统计学意义(t=1.64,P>0.10)。将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异(t=18.53,P<0.001)。结论ADAR1mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生机制中起一定的作用。     

TGF-β对体外培养的人胶质瘤(星形细胞瘤)细胞增殖的影响

目的　探讨TGF -β对体外培养的人星形细胞瘤细胞增殖的影响。 方法　体外培养的人星形细胞瘤细胞 ,分别加入 0 0 1ng/ml ,0 .1ng/ml,1ng/ml,5ng/ml的TGF -β ,采用MTT法研究TGF -β对人星形细胞瘤细胞增殖的影响。 结果　TGF -β以剂量依赖方式抑制人星外细胞瘤细胞增殖 ,其作用在第二天达到高峰。结论　TGF -β能明显抑制人星形细胞瘤细胞增殖 ,因而可能成为生物疗法治疗人星形细胞瘤的新方法。     

Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２在大肠癌组织中的表达及其临床意义

【摘　要】　目的：通过免疫组化检测Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２在大肠癌和大肠正常组织的表达水平,结合临床病理因素,探讨Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２的表达水平与大肠癌发生发展、转移及预后的关系,为寻找大肠癌基因治疗新的干预靶点提供实验和理论依据。方法：用免疫组织化学ＥｎＶｉｓｉｏｎ法检测９５例大肠癌组织和癌旁正常组织４０例中的Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２的表达水平,并对９５例大肠癌按照有无淋巴结转移进行分组比较,分析其与大肠癌临床病理参数的关系。结果：４０例大肠癌旁正常组织中,Ｅｚｒｉｎ蛋白表达阳性４例,占１０.０％,ＡＫＴ２表达阳性７例,占１７.５％,而在９５例大肠癌组织中,Ｅｚｒｉｎ蛋白表达阳性７４例,占７７.９％,ＡＫＴ２表达阳性５５例,占５７.９％。Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２表达与淋巴结转移有关,在淋巴结转移组Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２阳性率明显高于无淋巴结转移组（Ｐ＜０.０５）。ＡＫＴ２阳性表达组中Ｅｚｒｉｎ蛋白表达阳性率明显高于ＡＫＴ２阴性表达组中的表达（Ｐ＜０.０５）。Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２共表达的４９例患者,淋巴结转移率为６１.２％,而Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２均不表达的１６例患者无１例淋巴结转移。结论：Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２在大肠癌组织中高表达,与大肠癌转移密切相关,并可作为临床判断转移及预后等生物学行为的重要参考指标。Ｅｚｒｉｎ和ＡＫＴ２在大肠癌组织中表达成正相关,可联合检测判断大肠癌的恶性程度和进行预后评估。     

胆管癌放射敏感相关基因的基因芯片实验研究

目的:应用cDNA芯片技术进行肝外胆管癌放射敏感性相关基因表达谱差异分析.方法:将10只荷人胆管癌的裸鼠移植瘤模型随机分为对照组和照射组,分别给予10Gy、20Gy单次照射剂量,6h和24h后提取肿瘤组织.利用一步法提取组织块或细胞中的总RNA,浓缩、纯化,逆转录合成掺入荧光分子的eDNA链探针,与21 522条人PCR微矩阵芯片杂交.用双通道激光扫描仪进行扫描并分析表达谱的差异.结果:人胆管癌细胞QBC939在10Gy、20Gy单次照射剂量照射后的基因表达谱分析,发现306条基因表达差异,其中27条功能基因与剂量、照射后时间一致相关(14条表达上调、13条表达下调).结论:基因芯片能快速筛选胆管癌放射敏感性相关基因,为提高放射治疗疗效提供生物学依据.     

修饰的肿瘤抗原肽CEA_（610D）疫苗的体外抗肿瘤作用

目的:评价修饰的CEA610D抗原肽疫苗体外抗肿瘤免疫的有效性,为其临床应用提供依据.方法:多肽固相合成法合成HLA-A2 CEA修饰肽(CEA610D)、HLA-A2天然肽CEA605-613(天然肽)和HLA-A2无关肽MAGE-3(无关肽),采用同种异体混合淋巴细胞与肽共孵育的方法,诱导肽特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),利用MTT法检测CTL的增殖和杀伤活性;流式细胞术观察细胞表型;RT-PCR检测细胞穿孔素的表达;ELISA法检测CTL上清中IFN-γ的水平.结果:CEA610D疫苗产生肽特异性CTL的能力最强(P<0.05),其CD8+T细胞数也高于天然肽组和无关肽组;在效靶比为40∶1时,CEA610D和天然肽所诱导的CTL对CEA+HLA-A2限制性人结肠癌细胞T84的杀伤活性可达(56.7±3.73)%和(51.2±1.86)%,而3种肽特异性CTL细胞对CEA+HLA-A2人结肠癌lovo细胞杀伤活性维持在本底水平;CEA610D组的CTL所释放的杀伤相关介质穿孔素和上清中IFN-γ的水平也显著高于其余两组(P<0.01).结论:与天然肽相比,CEA610D疫苗可打破自身表位的免疫耐受,在体外抗肿瘤免疫中更具优势.