Human Annexin Ⅴ在不同胎盘中的表达的定量分析

目的观察人膜联蛋白Ⅴ(Human Annexin Ⅴ,HAⅤ)在乙肝病毒感染胎盘、正常中、晚孕胎盘及早孕绒毛中的表达并探讨其意义.方法用SP法检测HBsAg阳性孕妇足月分娩胎盘、HBV血清标志物阴性的正常早孕、中孕和足月胎盘各20例HAⅤ的表达、分布并进行定量分析.结果中孕、足月胎盘和HBV感染的胎盘组织中HAⅤ呈不均一的棕黄色颗粒状染色,泛存在于胎盘组织各类细胞胞浆、胞膜和核膜上.滋养细胞呈强阳性染色,绒毛间质细胞和毛细血管内皮细胞呈弱阳性染色.早孕绒毛HAⅤ棕黄色颗粒主要分布于外层滋养细胞的胞浆、胞膜和核膜上,最内层滋养细胞和间质偶见表达;比较HBV感染组和正常足月组胎盘HAⅤ表达的量,前者的平均灰度比后者明显增高,差异具有显著性(P＜0.01),中孕组与足月组HAⅤ表达的量没有差别(P＞0.05),早孕和中孕组、足月组HAⅤ表达的量的比较,前者显著低于后两者(P＜0.05).结论HAⅤ可能作为受体介导了HBV对胎盘的感染.     

TLR在小鼠胸腺中的表达及其在胸腺细胞发育中的可能作用

检测体外培养和体内发育过程中,胎鼠胸腺处于不同发育阶段时Toll样受体(TLR)的表达,阐明TLR表达量与胸腺细胞发育相关性,为TLR和胸腺细胞发育分化相关研究提供基础数据。无菌取15d胎龄胎鼠胸腺进行体外培养(FTOC),在培养不同时间点(2d,4d,6d),检测处于不同发育期胸腺TLR的表达;同时在孕期不同天数(15~19d),分别取胎鼠胸腺,检测在体内发育过程中胸腺TLR的表达;在FTOC中加入二脱氧鸟苷培养6d以制备胸腺基质细胞,检测基质细胞与胸腺细胞TLR表达情况。结果:小鼠胸腺中检测到多种TLR。FTOC培养中:培养第2天(F2)开始检测到各种TLR,到培养第6天(F6),TLR1,TLR3,TLR6,TLR7,TLR8明显上调,而TLR4,TLR5保持低水平,TLR4在培养第6天又下降;体内发育过程中:TLR6表达量随胎龄增加有较明显上调,TLR1,TLR3-8保持低水平表达;TLR2,TLR9体内体外都未检测到明显表达。在对胸腺细胞与基质细胞TLR表达比较中发现TLR1,TLR5,TLR6,TLR7高表达于胸腺细胞。胎鼠胸腺表达某些TLR,并且在发育不同阶段表达量有所改变,提示TLR可能参与胸腺细胞的发育过程。     

B族链球菌C5a肽酶蛋白表位的克隆、表达和免疫学分析

目的应用生物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白表位，结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测B族链球菌C5a肽酶蛋白的表位，应用PCR技术扩增出编码该表位基因片段，克隆PCR产物构建重组质粒，测序验证。在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达融合蛋白。表达的蛋白经质谱分析和Western blot鉴定。纯化该融合蛋白并免疫C57／BL小鼠，萃取GBS表面蛋白，双向琼脂扩散试验检测抗体水平。结果在SCPB中预测到1个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组和表达了这一肽段，质谱得出与SCPB蛋白的相似性分数为79，Western-blot证实能与抗SCPB的抗体反应，纯化后融合蛋白纯度〉90％。动物实验证实融合蛋白能产生特异性的抗GBS抗体。结论重组表位具有一定免疫原性。为相关蛋白的毒力机制研究和亚单位疫苗等方面的研究打下了良好的基础。     

Inhibition of CDK activity and PCNA-dependent DNA replication by p21 is blocked by interaction with the HPV-16 E7 oncoprotein

p21 inhibits cyclin-dependent kinase (CDK) activity and proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-dependent DNA replication by binding to CDK/cyclin complexes and to PCNA through distinct domains. The human papillomavirus (HPV)-16 E7 oncoprotein (16E7) abrogated a DNA damage-induced cell cycle arrest in vivo, despite high levels of p21. Using cell lysates and purified proteins we show that 16E7 prevented p21 both from inhibiting CDK2/cyclin E activity and PCNA-dependent DNA replication, whereas the nononcogenic HPV-6 E7 had reduced effects. Inactivation of both inhibitory functions of p21 was attained through binding between 16E7 and sequences in the carboxy-terminal end of p21 that overlap with the PCNA-binding site and the second p21 cyclin-binding motif. These data imply that the carboxyl terminus of p21 simultaneously modulates both CDK activity and PCNA-dependent DNA replication and that a single protein, 16E7, can override this modulation to disrupt normal cell cycle control.     

HIS网络在门诊挂号、收费管理中的应用

随着医院现代化的高速发展,医院信息系统(HIS)显得越来越来至关重要。对其要求越来越趋于完善性、全面性、灵活性、快捷性。这样就要求有一套完整的HIS来满足现代化医院管理的需要,实现现代化医院"以人为本"的管理理念,"一切以病人为中心",用现代化的管理理念结合工作需求,构建工作中的"和蔼"关系。     

静电法制备小微囊包裹成年猪胰岛的实验研究

目的　探索用静电法制备小微囊包裹成年猪胰岛细胞。方法　用自制的静电微囊发生装置、制备海藻酸钠 -多聚赖氨酸 -海藻酸钠 (APA)微囊 (微囊直径 <35 0 μm) ,包裹成年猪胰岛 ,体外检测APA小微囊猪胰岛生物活性及微囊膜的通透性 .结果　静电法制备的APA微囊直径 30 0～ 35 0 μm ,大小相对均一 .小微囊包裹成年猪胰岛后 ,每个微囊内可见 1～ 2个胰岛团 ,表面光滑 .囊内胰岛组织学结构完整 ,体外培养微囊化胰岛素分泌良好 ,葡萄糖刺激释放明显 ,显示了良好的细胞活力及微囊膜通透性 .结论　用我们自制的静电微囊发生装置能制备APA微囊包裹成年猪胰岛细胞 ,微囊直径 30 0～ 35 0 μm ,表面光滑 ,囊内猪胰岛生物活性良好     

人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3的克隆

目的：克隆人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3。方法：从已获得的小鼠稳睾和正常睾丸对照中表达量有明显差异的表达序列标签片段（BE644537）入手，构建人同源表达序列标签重叠群，应用基因特异性引物和载体特异性引物，在睾丸cDNA文库的DN或进行巢式PCR扩增、测序，对测序结果进行生物信息学分析。结果：从睾丸cDNA文库中分离出人类睾丸凋亡相关基因的5’末端而获得全长cDNA,命名为TSARG3，GenBank登录号为AF419291（保密期为1年），同时应用相同方法克隆了该基因在小鼠中的同源基因，GenBank登录号为AF419292。结论：获得人类睾丸生精细胞凋亡相关基因TSARG3，该基因可能与人类睾丸生精细胞凋亡有关。     

hIL-2分泌肽序列在HepG2细胞中对hEndostatin表达和分泌差异的影响

目的:了解分泌肽序列在HepG2细胞中对人内皮抑素基因(hEndostatin)的cDNA表达和分泌差异的影响。方法:构建不含hIL-2分泌肽序列的真核表达载体pBlast-hEndo质粒, 转染人的HepG2细胞株, 用RT-PCR的方法检测HepG2(pBlast-hIL2-hEndo), HepG2(pBlast-hEndo), HepG2(pBlast-Mcs)和HepG2中hEndostatin的mRNA表达水平, 及制备4种细胞的总蛋白和收集各自的培养上清, 进行Westernblot分析蛋白表达和分泌的差异。结果:发现HepG2(pBlast-hIL2-hEndo)中hEndostatin的mRNA的水平显著高于HepG2(pBlast-hEndo)。而仅在HepG2(pBlast-hIL-2-hEndo)的细胞总蛋白和上清, 及HepG2(pBlast-hEndo)的细胞总蛋白中检测到hEndostatin表达, 在其它各株细胞总蛋白及上清中, 未检测到hEndostatin。结论:hIL-2分泌肽序列能促进hEndostatin基因在HepG2细胞中表达及分泌。     

物理学在医学影像中的应用

物理学对医学的贡献是巨大的，物理学与医学等学科的交叉碰撞在医学领域中产生了许多丰硕成果，现代的医学影像就是其中的成果之一。本文阐述了物理学在现代四大医学影像中的应用。     

解剖钢板结合连续被动运动功能锻炼治疗胫骨平台骨折

目的 评价解剖钢板结合连续被动运动(CPM)功能锻炼在治疗胫骨平台骨折中的应用价值.方法 2003年5月至2005年10月本院34例胫骨平台骨折行解剖复位、解剖钢板内固定并在术后进行CPM功能锻炼.结果 术后对患者行X线检查示骨折实现解剖复位或接近解剖复位.23例患者经5～30个月随访骨折均愈合,无植骨坏死发生.CPM功能锻炼后运动功能恢复优良率为82.6%(19/23).结论 采用关节面的解剖复位、解剖钢板及牢固固定后配合术后CPM功能锻炼对于胫骨平台骨折有很好的疗效.