重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺研究

目的研究表达重组人抗HBsAg单链抗体工程菌的中试发酵工艺。方法首先采用摇瓶培养,对培养基配方、pH值、诱导表达时机和诱导剂量进行优化,确定基本发酵参数,然后在30L发酵罐上进行中试规模发酵培养。结果在摇瓶培养时,发现含有甘油和微量元素等成分的改良培养基效果明显优于LB培养基和2×YT培养基,另外,工程茵的最佳pH值为7.0,最佳诱导时机为对数中期,最佳诱导剂浓度为0.4mmoL/L异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖,最佳诱导时间为4h,将摇瓶培养确定的关键参数应用到30L发酵罐中,控制溶氧大于30%,进行3批发酵试验,发现发酵产物的湿菌产量可达58-61.9g/L,目的蛋白质表达量可达28.9%-31.2%以上。结论建立了工程菌M15[pQE-scFv]的中试发酵工艺,为进一步开发打下良好基础。     

高效液相色谱法用于褪黑素香口胶的含量测定

目的建立褪黑素香口胶质量控制的高效液相色谱方法。方法PolarisC18色谱柱,乙腈-0.05mol/L醋酸盐缓冲液(1∶3,pH4.6)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长278nm。测定制剂的含量及其均匀度、稳定性和溶出度。结果在4.86~97.20μg/L范围内,褪黑素浓度与色谱峰高比呈现良好线性相关,在高、中、低浓度时平均总加样回收率分别为(103.35±3.98)%,(101.88±3.91)%和(100.46±4.42)%(n=6);平均日内和日间RSD分别为2.68%和3.86%(n=5);最低检出浓度为0.1μg/L。结论此方法适用于香口胶中腿黑素测定。     

宽体金线蛭提取工艺研究

目的:筛选宽体金线蛭的最佳提取工艺。方法:以水蛭提取液中蛋白质含量及活化部分凝血活酶时间为指标,考察宽体金线蛭在不同溶媒、温度、提取时间、溶媒倍量及提取次数条件下的提取效果。结果:以10倍药材量的4 %NaCl溶液为提取溶媒,在60℃条件下分3次提取药材6h(3h +2h +1h) ,所得结果较为满意。结论:该提取工艺方法简单、科学,有推广应用价值。     

非那雄胺片的人体生物等效性研究

目的:研究国产与进口非那雄胺片的人体生物等效性。方法:采用高效液相色谱法测定18名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服非那雄胺片10mg后血清中的药物浓度,计算药动学参数和相对生物利用度,并进行生物等效性评价。结果:国产及进口非那雄胺片的AUC0～t 分别为(990 .80±302. 80)、(1007 .46±333. 65) (μg·h)/L ,Cmax 分别为(119. 22±18. 48)、(114. 08±22 .97) μg/L ,tmax 分别为(2. 89±1. 02)h、(2. 64±0. 54)h ,国产制剂相对于进口制剂的人体生物利用度为(103. 35±29 .75) %。结论:国产与进口非那雄胺片具有生物等效性。     

广州市儿童医院2000～2004年药品使用情况分析

目的了解我院过去5年的用药变化,对我院用药发展趋势作出评价.方法通过本院药剂科及财务科收集相关药品使用的数据资料,对各类药品的使用金额进行统计、排序,并对其进行分析.结果每年药品收入占医疗收入的比例基本稳定,并随着医院的经济收入稳步的增长;其中进口、合资药品使用量呈逐年下降趋势;按药品类别统计购药金额,抗感染类药物稳居第一.抗菌素是我院应用最多的药品,呈逐年上升的趋势.结论我院在控制药品费用的增长率方面成效显著,抗感染类药品存在过多使用的现象.     

稳心颗粒治疗冠心病心绞痛的临床观察

目的比较稳心颗粒与复方丹参片治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的临床疗效.方法冠心病心绞痛患者146例,其中73例(治疗组)采用稳心颗粒口服治疗,并与复方丹参片治疗的73例(对照组)作疗效比较,2组疗程均为12周.结果经12周治疗,两药均显著降低心绞痛的发作频率、硝酸甘油日耗量并显著改善心电图NST、∑ST和运动耐量,改善心肌血的范围及程度,显著降低心率及缩压乘积,降低心肌耗氧量及提高SOD活性,降低血粘度,改善心功能.但治疗组显著优于对照组(P<0.01).此外,两药均起效迅速,分别有79.5%与71.2%在5min内生效,持续时间4.6±4.1h, 5.6±2.9h(P>0.01) ,基本相仿.总的症状疗效分别为87.6%和78.08%(P>0.05),心电图总有效率90.4%和80.8%(P<0.01).结论稳心颗粒治疗冠心病疗效显著优于复方丹参片.     

胸腺肽α1对老年晚期结肠癌患者化疗期间生命质量的影响

目的评价胸腺肽α1对老年晚期结肠癌患者化疗期间生命质量的影响。方法用随机对照方法，比较单纯化疗组（对照组）和单纯化疗＋胸腺肽α1（试验组）化疗毒副反应程度和生命质量的改变，生命质量评分用EORTC QLQ-30中文版测定。结果对照组白细胞减少、恶心呕吐反应的严重程度明显高于试验组；化疗后，患者的整体健康状况、躯体功能、情绪功能、食欲、乏力等有明显加重趋势，疼痛呈减轻趋势，对上述影响试验组明显优于对照组。结论胸腺肽α1能减轻化疗的毒副反应，改善化疗患者的生命质量。     

鲐鱼蛋白水解酶的提取纯化及其活性研究

目的建立从鲐鱼消化道中提取蛋白酶的方法,并对其活性进行探讨。方法采用硫酸铵沉淀、柱色谱和凝胶过滤等方法进行纯化。结果该酶既能水解酪蛋白,又能水解N 苯甲酰L 精氨酸乙酯。水解酪蛋白的最适温度为5 0℃,最适pH为9.2 ,Ca2 + 和Mg2 + 对该酶有激活作用,Hg2 + ,Co2 + ,Cu2 + 对该酶活性有抑制作用。半胱氨酸、巯基乙醇、还原型谷胱甘肽、碘乙酸和对氯汞苯甲酸对酶活性均无影响。结论此法简便,准确,适用于鱼类蛋白水解酶的提取纯化     

人源抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体的构建

目的构建以人HBsAg单链抗体(HBScFv)为导向作用、α干扰素为治疗作用的融合蛋白酵母表达载体pPICZ-αB/ScFv-IFN-α。方法通过重叠PCR构建目的蛋白质基因,再亚克隆到酵母表达载体pPICZαB中,DNA测序后,转化巴氏毕赤酵母宿主菌GS115 ,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定重组酵母,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS PAGE分析鉴定表达产物。结果DNA测序结果显示构建的目的基因片段(HBScFv IFN-α)的序列与原设计序列相符合;菌落PCR结果显示目的基因已整合到酵母菌中;诱导表达后,SDS PAGE结果显示在相对分子质量约4 4 0 0 0处可见目的蛋白质表达带。结论成功构建了抗HBsAg单链抗体与α干扰素融合蛋白酵母表达载体     

布替萘芬擦剂治疗足癣67例的随机双盲对照多中心临床试验

目的:评价国产1%布替萘芬擦剂治疗足癣的疗效及安全性。方法:以1%联苯苄唑溶液为对照药,对131例足癣进行随机双盲用药,A组67例,B组64例,每日外涂1次,连续4wk,观察其临床和真菌学疗效以及不良反应。结果:A组和B组的治愈率分别为63%和69%,有效率分别为84%和80%,真菌学清除率分别为91%和89%,临床和真菌学疗效2组比较无统计学意义(P>0.05)。A组无不良反应发生,B组2例出现中度局部刺激症状。结论:国产1%布替萘芬擦剂治疗足癣疗效好,安全性高。