2种枸橼酸抗凝方法在甲状旁腺切除术后患者血液透析治疗中的应用效果

目的比较2种枸橼酸抗凝方法在甲状旁腺切除术后患者血液透析治疗中的应用效果。方法回顾性分析58例甲状旁腺切除术后血液透析患者的临床资料,患者均采用4%枸橼酸抗凝治疗(共98例次)。将采用滤器前泵入4%枸橼酸300 mL/h血液透析治疗的34例(50例次)患者纳入对照组,将采用滤器前泵入4%枸橼酸250 mL/h,同时静脉壶端泵入4%枸橼酸50 mL/h的"两段法"血液透析治疗的24例(48例次)患者纳入观察组。比较2组血液透析治疗前后钙离子(Ca~(2+))、碳酸氢根离子(HCO_3~-)、钠离子(Na~+)、pH值水平,并比较2组透析器和透析管路凝血级别。结果透析前,2组Na~+、Ca~(2+)、HCO_3~-、pH值水平比较,差异均无统计学意义(P0.05);透析后,2组Na~+、HCO_3~-、pH值水平均高于透析前,差异有统计学意义(P0.05), 2组Ca~(2+)水平与透析前比较,差异均无统计学意义(P0.05);透析后,观察组Na~+水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05), 2组间Ca~(2+)、HCO_3~-、pH值水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2组透析器凝血及透析管路凝血情况比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与传统枸橼酸抗凝方式比较,枸橼酸"两段法"抗凝方式安全有效,可显著降低静脉壶凝血发生率,保证4 h透析时间,改善透析效果。     

茯苓皮总多糖提取纯化工艺研究

目的研究并确立茯苓皮总多糖的最佳提取和纯化工艺。方法用超声波辅助法提取总多糖,用苯酚-硫酸法测其含量并作为指标,经过单因素实验和正交试验确立最佳提取工艺;用大孔树脂纯化总多糖,以多糖保留率,脱色率和蛋白去除率为指标,经过静态和动态实验,确立最佳纯化工艺。结果以料液比1∶25,温度45℃,超声功率100w,超声时间10min为最佳提取工艺;以AB-8型大孔吸附树脂,溶液pH 5,转速180r·min^-1,上样流速24mL·min^-1,径高比1∶15为最佳纯化工艺。在此条件下静态吸附实验蛋白去除率65.29%,脱色率79.08%,多糖保留率59.50%;动态吸附实验蛋白去除率48.98%,脱色率76.84%,多糖保留率74.58%。结论茯苓皮总多糖的提取纯化工艺稳定可靠,可为其进一步开发提供参考。     

五味子丙素缓解血管紧张素 Ⅱ诱导的心脏炎性反应和心肌重构

目的探究五味子丙素对血管紧张素 Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导小鼠心肌重构和炎性反应的影响。方法研究时间为 2018年 7月至 2019年 1月。皮下注射 Ang Ⅱ诱导 C57BL/6小鼠心肌重构。将 C57BL/6小鼠分为空白对照组、 Ang Ⅱ组、 Ang Ⅱ＋五味子丙素组(Ang Ⅱ+ShC组)皮下注射 Ang Ⅱ前一天开始给药处理, 8周后,处死小鼠,收集心脏组织。采用 ELISA法检测组织中肿瘤坏死因子 ?α(TNF?α)/白介,素?6(IL?6)的含量, RT?PCR法检测 IL?6、TNF?α、心钠肽(ANP)、脑钠肽( BNP)、肌球蛋白重链(MYHC)、转化生长因子 β(TGF?β)、胶原 IV(Collagen IV)和β?肌动蛋白(β?actin)的mRNA表达;生化试剂盒检测血液中的 CK?MB。结果与 AngⅡ组比较,五味子丙素治疗组心脏损伤被逆转,心重比降低［(6.32±0.99)‰比(4.93±0.17)‰,P＜0.05］,心功能相关基因 ANP［( 3.37±0.60)比( 1.41±0.37)倍, P＜0.05)和 BNP［( 2.51±0.75)比( 0.78±0.55)倍, P＜0.05］、促肥大基因 MYHC［( 2.57±0.74)比(1.18±0.26)倍, P＜0.05)、纤维化相关基因 TGF?β［(5.25±0.94)比( 1.78±0.57)倍, P＜0.05)和胶原 IV［(3.70±1.47)比( 1.68±0.56)倍, P＜0.05］的 mRNA表达下调,心脏组织 TNF?α/IL?6的 mRNA［分别为( 7.18±2.85)比( 2.92±0.86)倍, P＜0.05和( 12.89±5.40)比(4.29±3.43)倍, P＜0.05］和蛋白表达水平［分别为( 4.80±0.78)比(2.09±0.41)ng/mg,P＜0.05和(2.56±0.73)比( 1.23±0.41)ng/mg, P＜0.05］均显著降低。结论五味子丙素能有效缓解 Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌重构,并伴随缓解炎性反应。     

基于机器学习和大数据挖掘的药物重定位算法综述

药物重定位(又称药物重使用或药物重配置)是将现有治疗方法应用于新的疾病的过程的一种药物研发方法。新药研发成本高、失败率高,使得对现有药物进行重新定位成为目前研究的热点。在高通量测序技术的帮助下,许多有效的算法被提出并应用于药物的重新定位。目前用于药物和化合物重定位的算法可分为基于特征的方法、基于矩阵分解的方法、基于网络的方法3大类。分别对这3类常用方法进行综述,总结这些方法的优缺点,并对未来药物重新定位方法的发展方向进行剖析,以期达到帮助我国科研工作者开发更加有效的药物重定位算法,增加我国社会经济效益的目的。     

虫草素对高糖诱导脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用研究

目的探讨虫草素对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护作用及其机制。方法原代培养HUVECs,实验分为空白对照组、模型组、对照组、抑制剂A组、抑制剂B组、干预A组、干预B组和低、中、高浓度虫草素组。空白对照组给予正常糖浓度(5.5 mmol·L^-1);模型组给予40 mmol·L^-1高糖孵育48 h;对照组给予10μmol·L^-1白藜芦醇+高糖;低、中、高浓度虫草素组分别给予1,10,20μmol·L^-1虫草素+高糖;抑制剂A组给予1μmol·L^-1 CLI-095+高糖;抑制剂B组给予100 nmol·L^-1西罗莫司+高糖;干预A组给予1μmol·L^-1 CLI-095+20μmol·L^-1虫草素+高糖;干预B组给予100 nmol·L^-1西罗莫司+20μmol·L^-1虫草素+高糖。用5-溴脱氧尿嘧啶核苷-酶联免疫吸附法检测光密度值观察细胞增殖能力,用Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶流式细胞术检测细胞凋亡率,用实时荧光定量聚合酶链反应检测沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)mRNA的表达水平,用Western Blot检测SIRT1蛋白的表达水平。结果模型组、对照组和低、中、高浓度虫草素组以及干预A组、干预B组的增殖能力(光密度值)分别为(1.38±0.11),(1.86±0.06),(1.44±0.03),(1.60±0.05),(1.70±0.08),(1.85±0.04)和(1.85±0.06),细胞凋亡率分别为(6.72±1.00)%,(0.56±0.37)%,(3.86±0.16)%,(2.64±0.23)%,(2.16±0.15)%,(1.57±0.28)%和(0.86±0.20)%,SIRT1 mRNA表达相对倍数分别为(0.24±0.05),(2.97±0.41),(0.62±0.07),(1.37±0.18),(2.14±0.35),(3.45±0.76)和(3.02±0.79)。模型组、对照组、高浓度虫草素组、抑制剂B组和干预B组的SIRT1蛋白表达分别为(0.82±0.11),(1.14±0.29),(0.98±0.13),(0.74±0.19)和(1.30±0.20)。对照组和高浓度虫草素组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。干预A组和干预B组的细胞增殖力及SIRT1 mRNA表达水平与高浓度虫草素组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。干预B组细胞凋亡率与高浓度虫草素组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。干预B组SIRT1蛋白表达与抑制剂B组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虫草素可能通过促进SIRT1表达,从而起到保护高糖损伤的内皮细胞作用。     

DEK基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其功能鉴定

目的：构建DEK基因的RNA干扰（ RNAi）慢病毒表达载体,并对其生物学功能进行初步检测。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的序列,确定其有效靶序列,合成DEK基因的Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到经BamHⅠ与EcoRⅠ酶切后的小干扰RNA（ siRNA）表达载体PSIH-H1上,产生PSIH-H1-DEK慢病毒载体,筛选阳性克隆并测序鉴定。与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染乳腺癌细胞ZR75-1,经嘌呤霉素（ puromycin,puro）筛选2周后,收集部分细胞利用实时聚合酶链反应（ real time-PCR,RT-PCR）和Western印迹分别检验DEK在信使RNA （ mRNA ）和蛋白水平的敲低效果,并通过细胞生长实验检测DEK对人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞生长的影响。结果 PCR和DNA测序结果证实,DEK siRNA慢病毒表达载体PSIH-H1-DEK构建成功。 RT-PCR和Western印迹结果显示,构建的DEK siRNA可有效抑制DEK基因的表达,并由此建立了敲低DEK的稳定克隆。生长曲线实验表明, DEK siRNA可抑制人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞的生长。结论成功构建了DEK基因的RNAi慢病毒表达载体,感染人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞后,有效沉默了ZR75-1细胞中的DEK基因的表达,为进一步研究DEK基因在乳腺癌中的作用奠定基础。     

超声弹性应变率比值在TI-RADS(4-6)类合并钙化的甲状腺结节中的价值

目的探讨超声弹性应变率比值在鉴别诊断甲状腺TI-RADS(4-6)类合并钙化结节中的应用价值。方法常规超声观察303例患者(共324个结节)甲状腺结节的边界、内部回声、是否合并钙化、纵横比、内部及周边血流情况等,依据甲状腺影像数据评分与报告系统(TI-RADS)对相应的甲状腺结节进行分类,同时进行超声弹性成像记录弹性应变率比值,绘制ROC曲线,获得弹性应变率比值鉴别诊断甲状腺良恶性结节的最佳界值。其中TI-RADS 4-6类患者137例(137个结节)分钙化组(Ⅰ组)和无钙化组(Ⅱ组),钙化组又以钙化大小分为微钙化组(≤2mm)和粗钙化组。以病理结果为金标准,绘制ROC曲线,评价弹性应变率比值在Ⅰ、Ⅱ组病变中的应用价值。结果弹性应变率界值为0.55。微钙化组和Ⅱ组的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值分别为88.9%、71.4%、86.5%、95.2%和82.4%、78.9%、81.1%、87.5%,ROC曲线下面积(AUC)分别为0.808、0.831;粗钙化组ROC曲线AUC为0.655。结论应用TI-RADS分类标准联合弹性应变率比值可提高鉴别诊断Ⅱ组和微钙化组甲状腺结节良恶性的敏感性、特异性和准确性,指导临床对甲状腺合并钙化结节采取正确的处理,达到早期诊断,早期治疗的效果。     

糖尿病肾病患者血清视黄醇结合蛋白、胱抑素C变化的临床意义

目的:探讨糖尿病患者血清胱抑素C(Cys-C)、视黄醇结合蛋白(RBP)变化与糖尿病肾损伤的关系。方法:根据24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)将194例患者分为3组:尿微量白蛋白排泄率<30mg/24h为单纯糖尿病组、30mg/24h<尿微量白蛋白排泄率<300mg/24h为早期糖尿病肾病组、尿微量白蛋白排泄率>300mg/24h为临床糖尿病肾病组,选取同期健康体检者70例作为对照组。RBP和Cys-C测定均采用免疫比浊法检测。结果:与对照组比较,血清视黄醇结合蛋白、胱抑素C在单纯糖尿病组无明显升高(P>0.05),在早期糖尿病肾病组有所升高(P<0.01),在临床糖尿病肾病组升高最明显(P<0.01);早期糖尿病肾病组中血清视黄醇结合蛋白、胱抑素C较单纯糖尿病组明显升高(P<0.01);临床糖尿病肾病组较早期糖尿病肾病组明显升高(P<0.01)。结论:血清视黄醇结合蛋白、胱抑素C是检测糖尿病患者早期肾损害的良好指标,对早期糖尿病肾病的诊断具有较高的临床价值,亦是评估肾损害程度的指标。     

脊柱脊髓损伤救治及进展

脊柱脊髓损伤（ spinal cord injury,SCI）在现代社会中呈高发趋势,其伤情复杂、救治难度大,对患者产生灾难性、危及生命的不幸与后果,家庭背负沉重的负担。在临床的处置中需要进行仔细的病情评估分析、制动、创伤高级生命支持,对有手术指征的患者力争早日手术,最大程度地解除脊髓压迫,减轻继发损伤,促进脊髓康复。     

钙激活钾通道增龄变化及其与高血压血管重构的相关性

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)增龄变化及其与高血压血管重构的关系。方法:①选取雄性9、15、21、27、33周龄自发性高血压大鼠(SHR)及正常血压(WKY)大鼠,每周龄大鼠各4只;②测量腹主动脉平均动脉血压;③分离肠系膜小动脉及其血管平滑肌细胞(VSMCs);④利用膜片钳全细胞模式记录肠系膜小动脉VSMCsBKCa电流密度;⑤观察肠系膜小动脉血管内径、中膜厚度、中膜与内径比的变化;⑥探讨BKCa电流密度增龄变化与血管重构的关系。结果:①不同周龄SHR组血压明显高于WKY组,且随增龄渐增高,而WKY组血压始终正常;②SHR肠系膜小动脉VSMCs BKCa电流密度随增龄降低,而WKY随增龄的变化差异无统计学意义(P>0.05);③SHR肠系膜小动脉血管内径增龄减小及中膜厚度、中膜厚度/内径比增龄增大显著(P<0.05),而WKY增龄无明显变化;④SHR肠系膜小动脉VSMCsBKCa电流密度与肠系膜小动脉血管内径、中膜厚度、中膜厚度/内径比均高度相关(r分别为0.8534、-0.8767、-0.8911)。结论:BKCa电流和电流密度随增龄衰减,与高血压血管重构高度相关。