肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B 的构建及表达

目的：构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野 生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7B cDNA的肝脏特异 性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B，并检测其表达情况。方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子Alb序列及野生和突变的ATP7B cDNA依次亚克隆至转基因载体Kbpala上，得到可在肝脏特异性表达的正常及突变型人 ATP7B的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B。将其 短暂转染BRL细胞及BHK细胞，通过Western blotting检测其蛋白表达情况。结果:经酶切鉴定及定点测序证实，转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B 构建成功；Western blotting显示仅在肝脏细胞实现表达。结论:带 有人类ATP7B cDNA的野生及常见致病突变型的转基因载体Kbpala/Alb -ATP7B构建成功并在肝脏细胞特异性表达。     

难治性便秘综合治疗及影响因素的评价

目的评价综合治疗对难治性便秘的疗效及影响因素。方法将84例难治性便秘分为非重叠组和重叠组。应用个体化综合治疗4周,观察便秘症状评分变化及总有效率,分析IC患者的重叠症状和心理障碍状态对疗效的影响。结果(1)84例便秘患者中,重叠组和非重叠组分别占40.5%和59.5%。(2)重叠组和非重叠组的总有效率分别为50.0%和78.0%(P<0.05)。(3)对37例IC患者的心理测试调查显示,59.4%(22/37)有心理障碍状态,重叠组和非重叠组伴有心理障碍状态对治疗的总有效率分别为4.8%和31.5%(P<0.05)。结论适合个体化的综合治疗使多数难治性便秘缓解症状,但伴有重叠症状,尤其心理障碍状态则影响疗效。     

婚恋依恋研究进展

近年来依恋研究已由亲子依恋、依恋表征拓展到婚恋依恋．婚恋依恋是成人与情侣间的依恋情感联结。该文介绍了婚恋依恋提出的背景和主要观点、婚恋依恋类型及测量方法、有关婚恋依恋的主要研究成果、最后探讨了婚恋依恋领域有待深入研究的问题。     

应用多层螺旋CT对耳硬化症的术前评估价值

目的:评估MDCT在术前耳硬化症诊断中的作用。方法:收集经临床证实为耳硬化症、且CT扫描采用螺旋扫描病例共18例,采集的数据传输到4.1工作站,进行多平面重建。结果:18例共36耳显示异常:单独前庭窗异常18耳,表现为前庭窗扩大或狭小,周围骨质密度降低或镫骨底板板密度增高;前庭窗及蜗窗同时受累共8耳;主要累及耳蜗周围迷路骨质10耳,表现为耳蜗骨迷路边缘不整,呈条片状密度减低或双环征。MPR交互重建充分显示了所有重要解剖结构的位置、形态:其中3耳为颈静脉球高位。结论:MDCT可以正确显示耳硬化症病灶的细微改变,提供详细的术前诊断信息;结合MPR技术可全面观察病变范围,并充分显示颞骨内重要解剖结构的位置和形态。对于手术方案的设计、防止手术并发症和提高疗效等具有重要意义。     

Screening of ferritin light polypeptide 460-461InsA mutation in Parkinson's disease patients in North America

Deep brain stimulation of the subthalamic nucleus (STN) is becoming the procedure of choice to reduce symptoms of Parkinson's disease such as rigidity, akinesia and tremor. We present here a series of electrophysiological recordings performed in 34 patients along a standardized electrode trajectory. Neuronal activity along the trajectory consists of a first heterogeneous population of thalamic cells with a mean frequency of 24.8+/-1.4 Hz followed by a silent zone and a second population of STN neurones with a significantly higher spiking frequency (P<0.001) of 42.3+/-1.8 Hz. This study confirms previous findings and suggests that rapid measurement of neuronal spiking frequency and burst index is sufficient to determine precisely the vertical position of the STN.     

CD54和LFA-1的相互作用在6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的JurkatT细胞的黏附性增强中的作用

目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8 α-甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)的黏附性增强中的作用。方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强，用细胞与细胞间黏附分子-1-人IgG的Fc片段(ICAM-1-Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试验研究CD54-LFA-1的作用，用单克隆抗体MEM-148检测As细胞LFA-1亲和力的变化，用单克隆抗体NKI-L16检测AS细胞LFA-1亲合力的变化，用鬼笔环肽染色细胞骨架，用Jurkat-Raji细胞间的作用作模型研究6A8α-甘露糖苷酶表达抑制对T和B细胞间黏附的影响，用ConA结合试验检测细胞中蛋白质N-糖基化的变化。结果(1)AS细胞间的黏附性增强主要与CD54及CD11a表达的增强相关，也与LFA-1亲和力的增高相关；(2)AS细胞的细胞骨架发生重排；(3)As细胞与Raji细胞间的黏附也增强；(4)ConA与AS细胞的结合增强。结论CD54和LFA-1的相互作用在AS Jurkat T细胞的黏附性增强中起重要作用。细胞骨架重排也可能起作用。As细胞的蛋白质发生了N-糖基化修饰。     

Deletion of stem-loop 3 is compensated by second-site mutations within the Gag protein of human immunodeficiency virus type 1

Encapsidation of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) RNA involves specific interactions between viral Gag proteins and viral RNA elements located at the 5' untranslated region (UTR). These RNA elements are termed packaging (psi) or encapsidation (E) signals and mainly comprise the stem-loop 1 (SL1) and SL3 RNA structures. We have previously shown that deletion of the SL1 sequences is compensated by second-site mutations within Gag. Similar studies are now extended to SL3 and the results demonstrate that deletion of this RNA structure is rescued by two point mutations, i.e., A11V in p2 and I12V in nucleocapsid (NC). These two compensatory mutations are different from those associated with the rescue of SL1 deletion, suggesting that SL1 and SL3 may bind to different residues of Gag during viral RNA packaging. Analysis of virion-derived RNA in native agarose gels shows that deletion of SL3 leads to decreases in both viral RNA packaging and dimerization. These defects are corrected by the compensatory mutations A11V and I12V. Yet, defects in viral RNA dimerization at an early stage that were caused by the SL3 deletion in the context of a viral protease-negative mutation cannot be overcome by these two suppressor mutations. Therefore, the positive effects of A11V and I12V on dimerization of the SL3-deleted RNA must have taken place at the maturation stage.     

中医药对糖尿病足溃疡相关细胞因子调控作用的研究进展

糖尿病足溃疡是糖尿病严重的破坏性并发症,致残率及致死率逐年增高,严重威胁人类身心健康。中医药治疗糖尿病足溃疡,注重辨证论治与整体观念相结合,不仅能改善中医证候,更能在加速创面愈合的同时减少创面的复发,一定程度上延缓了糖尿病足溃疡的进一步恶化,降低其致残率及致死率。现代研究发现,糖尿病足溃疡难以愈合与各种细胞因子如炎症因子、生长因子、趋化因子等分布异常密切相关;随着现代医学对中医药研究的不断深入,中药单体及复方调控细胞因子治疗糖尿病足溃疡已成为研究热点,该文通过对目前国内外研究现状进行归纳,得出以下总结：(1)芝麻酚、栀子苷、当归补血汤、紫朱软膏等调节肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-1、IL-6、IL-10等炎症因子,抑制创面炎症。(2)白芷、丹酚酸B、四效散、壮药拔毒生肌膏等调节血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）、转化生长因子（TGF）、表皮生长因子（EGF）等生长因子,促进创面胶原沉积及血管新生。(3)芍药苷、隐丹参酮、蜂毒、回阳生肌汤等调节CXC趋化因子配体（CXCL）1、CXCL2、CC趋化因子配体（CCL）2、CCL3、基质细胞衍生...     

rGH＋CLS减少电损伤组织坏死的研究

研究rGH CLS局部应用对减少高压电损伤组织进行性坏死的作用。使用该实验室已建立的重度高压电损伤模型,新西兰大白兔45只均分5组。治疗分别使用rCH CLS（1组）,CLS（2组）,rGH(3组）,盐水（4组）和5组对照,临床解剖探查、组织学和超微结构等方法观察。结果：治疗1组有明显的减少组织坏死作用。15d动物伤肢完整,而2,3和4组虽也各有不同程度延缓坏死的作用。但动物伤肢最终坏死丧失,5组7d大部软组织基本坏死,12d坏死离断,光电镜检查1组5d治疗后粒细胞浸润较少,炎性反应轻,有纤维组织细胞再生和新生的线粒体,10d修复过程明显,2,3,4组7d后坏死明显,5组肌坏死迅速,结果表明：CLS持续组织内透析冲洗和rGH局部肌注能有效地减少电损伤坏死速度和范围,值得研究应用。