Bcr／abl特异性RNA干扰真核表达载体的构建

目的：构建特异性的抗慢性髓细胞白血病融合基因bcr／abl mRNA的siRNA真核细胞表达载体，探索RNA干扰(RNAi)分子靶向治疗慢性髓细胞性白血病(CML)的作用。方法：根据GenBank数据库提供的bcr／abl基因核苷酸序列，按照Tusehl设计原则，选择设计双链小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)，再转化为能表达其小发卡结构RNA(Small hairpin RNAs，shRNA)的DNA序列，并与pTER质粒定向连接，构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子H1的真核表达载体pTER／shRNA1、pTER／shRNA2，经限制性内切酶酶切和DNA测序进行鉴定。结果：构建慢性粒细胞白细胞bcr／abl融合基因siRNA真核表达载体pTER／shRNA1、pTER／shRNA2，经限制性内切酶酶切和DNA测序证实与设计完全一致。结论：抗慢性粒细胞白细胞bcr／abl融合基因siRNA真核细胞表达载体的构建成功。     

超声组织定征对慢性乙型肝炎肝纤维化的研究

目的探讨超声组织定征对慢性乙型肝炎不同程度肝纤维化进行灰阶测量的作用。方法用超声组织定征视频法测量慢性乙型肝炎患者二维声图像的灰阶值,并与其肝穿刺病理组织学纤维化分级对比。结果超声组织定征视频法测出的肝声像图的灰阶值在慢性乙型肝炎肝纤维化病理组织学分级中的差异有显著性意义(F=34.3,P<0.001),肝纤维化S0、S1、S2和S3各组间灰阶值的差异均有显著性意义(P<0.05)。结论超声组织定征视频法可对慢性乙型肝炎肝纤维化的程度进行声像图灰阶测量。     

子宫内膜间质肉瘤13例临床病理分析

目的提高子宫内膜间质肉瘤的早期诊断率,以确定手术范围,避免二次手术。方法对13例子宫内膜间质肉瘤临床病理资料进行回顾性分析。结果确诊主要依靠病理结果,术前诊断性刮宫结合宫腔镜,宫颈赘生物活检确诊率为60%(3/5);临床分期为I期11例,Ⅱ期1例,Ⅳ期1例;行全子宫及双侧附件(包括次广泛)切除6例;行全子宫切除或全子宫及单侧附件切除5例,残端复发灶切除1例,行宫颈赘生物摘除1例;术后11例行全身化疗。结论对此类患者,术前诊断性刮宫是必要的。疑有恶性应送冰冻病理检查;以采用全子宫加双侧附件切除术辅以化疗者疗效最好。     

肺癌生存素基因的表达及其与放疗敏感性的关系

目的:研究肺癌细胞生存素(survivin)基因表达及其与放疗敏感性间的关系,探讨survivin作为预测肺癌放疗敏感性分子标志物的可能性。方法:设计合成survivin基因引物,并对肺癌组织标本行RT-PCR以检测其survivin表达。对原代培养肺癌细胞行2.0Gy X线照射后,采用Cell Proliferation Kit I(MTT)法进行细胞活力检测。结果:survivin在肺癌组织中阳性表达率较高,为60.9%,而在正常肺组织中阳性表达率仅为14.3%。肺癌细胞经2.0Gy的X线照射后,细胞增殖明显受抑,存活率下降。但survivin阳性肺癌细胞的存活率(40.0%～70.0%)显著高于survivin阴性肺癌细胞(20.0%～50.0%)。结论:肺癌高表达survivin,并与其放射敏感性有关。X线照射对癌细胞生长有明显抑制作用,但survivin阳性的癌细胞对X线照射有一定耐受性。检测肺癌细胞survivin表达有望成为预测肺癌对放疗不敏感的辅助指标之一。     

IL‐15 modulates the balance between Bcl‐2 and Bim via a Jak3/1‐PI3K‐Akt‐ERK pathway to promote CD8αα+ intestinal intraepithelial lymphocyte survival

IL‐15 is an essential survival factor for CD8αα⁺ intestinal intraepithelial lymphocytes (iIELs) in vitro and in vivo. However, the IL‐15‐induced survival signals in primary CD8αα⁺ iIELs remains elusive. Although Bcl‐2 level in CD8αα⁺ iIELs positively correlates with IL‐15Rα expression in the intestinal epithelial cells, overexpression of Bcl‐2 only moderately restores CD8αα⁺ γδ iIELs in Il15^?/? mice. Here, we found that IL‐15 promptly activated a Jak3‐Jak1‐PI3K‐Akt pathway that led to the upregulation of Bcl‐2 and Mcl‐1. This pathway also induced a delayed but sustained ERK1/2 activation, which not only was necessary for the maintenance of Bcl‐2 but also resulted in the phosphorylation of extra‐long Bim at Ser⁶⁵. The latter event facilitated the dissociation of Bim from Bcl‐2 without affecting Bim abundance in IL‐15‐treated CD8αα⁺ iIELs. Using an adoptive cell transfer approach, we found that either overexpression of Bcl‐2 or removal of Bim from CD8αα⁺ iIELs promoted their survival in Il15ra^?/? mice. Taken together, IL‐15 promotes CD8αα⁺ iIEL survival by both increasing Bcl‐2 levels and dissociating Bim from Bcl‐2 through activation of a Jak3‐Jak1‐PI3K‐Akt‐ERK1/2 pathway, which differs from a previously reported IL‐15‐induced survival signal.     

大鼠性别及血清保存条件对生化检测结果的影响研究

目的 研究大鼠不同性别、血清样本放置条件及时间对生化检验结果的影响.方法 80只大鼠编号后一次性取静脉血,放置30min后离心,每只鼠血清分成8份.首次(1h)检测后,所有血清至于-80℃冰箱保存,一份于1、2、4、7、11、23、40d时间点重复解冻、检测后复存于-80℃冰箱;其余七份分别于以上时间点单次解冻、检测后丢弃;检测项目均为谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、尿素(UREA)、肌酐(CREA)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、血糖(GLU)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB).结果 雄性、雌性大鼠血清样本-80℃冰箱保存至40d 9个生化指标均与1h差异无统计学意义;雌性大鼠血清样本保存-80℃在1d、2d、4d、7d4个时间点重复解冻,部分生化指标逐步显示差异有统计学意义,且随解冻次数及保存时间的增加,差异具有统计学意义的生化指标项数增加,第4次(7d)解冻后ALT、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P＜0.05);第5次(11d)解冻ALT、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P＜0.05);第6次(23d)解冻ALT、CREA、TG、TP指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P＜0.05);第7次(40d)解冻ALT、AST、UREA、CREA、TG、GLU、TP、ALB指标结果与1h测定结果比较差异具有统计学意义(均P＜0.05).其余指标与1h测定结果比较无显著差异(P＞0.05).雄性大鼠血清样本保存-80℃重复解冻1～5次9个生化指标均与1h测定结果比较差异无统计学意义,第6次(23d)解冻TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(P＜0.05);第7次(40d)解冻TG、TP指标测定结果比较差异具有统计学意义(均P＜0.05),其余指标与1h测定结果比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 不同性别大鼠血清-80℃条件下保存40d以内单次解冻后测定以及在大鼠血清解冻3次以内对生化指标测定值无影响;但重复解冻4次以上部分生化指标有显著差异,且不同性别大鼠血清指标差异情况不同,血清样本放置条件及时间及解冻次数会对大鼠生化检测指标造成影响.     

液体抛光剂和护牙素预防托槽周围釉质脱矿效果的体外研究

目的 对比研究BISCOVER LV液体抛光剂和Tooth Mousse护牙素对托槽周围牙釉质脱矿后促进其再矿化的效果.方法 将60颗离体牙粘接托槽后随机分为3组,分别涂上液体抛光剂、护牙素以及蒸馏水,将离体牙轮流放置于人工唾液和人工致龋液中浸泡,模拟患者进食的状态,90 d后使用显微硬度仪以及扫描电镜检测托槽周围牙釉质表面硬度以及形态的变化.结果 3组牙釉质脱矿后的显微硬度值差异具有统计学意义(F=507.50,P<0.05),两两比较结果显示:实验组和阳性对照组牙釉质显微硬度值之间差异无统计学意义(P>0.05);而实验组牙釉质显微硬度值高于阴性对照组,以及阳性对照组牙釉质显微硬度值高于阴性对照组,且差异均有统计学意义(P<0.05).扫描电镜显示实验组牙釉质超微结构表面反应物沉积增多,空隙变小,牙釉质再矿化现象明显.结论 在正畸治疗中使用BISCOVER LV液体抛光剂和Tooth Mousse护牙素均可有效防止托槽周围牙釉质脱矿,两者在临床上的使用可视患者的配合程度而定.     

半导体激光照射对牙齿根尖封闭效果的研究

目的:探讨常规根管预备后使用半导体激光进行根管内照射对根尖封闭性能的影响.方法:选择新鲜拔除的单根管牙60 颗,分6 组(n=10),去除牙冠,常规根管预备.A、B组,半导体激光1 W照射20 s;C、D组,超声荡洗1 min;E、F组,不做任何处理,作为对照组.常规热牙胶垂直加压法充填6 组牙根.微渗漏实验对根充后的A、C、E组牙的根尖封闭性能进行评估,扫描电镜观察B、D、F组牙根剖面.结果:A、C、E组根管微渗漏(mm)分别为1.70±0.82、2.02±0.40和4.56±2.76(A vs E,P<0.01;C vs E,P<0.05,A vs C,P>0.05),扫描电镜观察到激光组大部分牙本质小管发生熔融、缩小或封闭,超声荡洗组大部分牙本质小管内有糊剂或牙胶进入.结论:半导体激光进行根管内照射可以显著提高根充后根尖的封闭性能.     

热化疗诱导舌鳞癌CAL-27细胞免疫原性死亡的实验研究

目的:探讨平阳霉素（pingyangmycin, PYM）、热疗（hyperthermia, HT）及两者联合能否诱导舌鳞癌CAL-27细胞发生免疫原性死亡。方法:对人舌鳞癌细胞CAL-27分别进行PYM、HT及两者联合处理,采用CCK-8实验、Annexin V/PI联合染色、流式细胞术及酶联免疫吸附实验探讨不同处理方式对细胞增殖、凋亡、CRT膜表达及HMGB1分泌的影响。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:PYM抑制CAL-27细胞活性,且呈浓度依赖性（P<0.05）。PYM及HT均使CRT膜表达率升高;两者联合应用,细胞凋亡、CRT膜表达率及HMGB1分泌均较未处理组、单纯化疗组及单纯HT组升高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:PYM化疗及HT均能诱导舌鳞癌CAL-27细胞CRT由胞内至膜表面转位,并促进HMGB1分泌;两者联合应用,无论在诱导凋亡还是在诱导免疫原性死亡方面,效果优于单纯PYM化疗组。     

不同洞型的离体牙根管治疗术后的抗折力与折裂模式的研究

目的 量化研究3种典型洞型的离体牙根管治疗术后抗折力的关系,并对折裂模式进行评价。方法 离体下颌前磨牙40个,随机等分为4组。A组:不作任何处理作为空白对照,B、C、D组制备不同洞型(牙合面洞、邻-牙合面洞、邻-牙合-邻面洞)并进行根管治疗术。万能测试仪加载头与牙长轴成45°角,以1 mm/min速度加载至牙齿折裂作为该牙的最大抗折力。将折裂模式分为"可修"和"不可修"2级,盲法评价,Stata 10.0软件数据统计。结果 各组的最大抗折力分别为870.3±313.4,600.2±224.0,493.5±102.5和(262.6±100.0)N。秩和检验,差异有统计学意义(F=23.80,P=0.000 0)。以A组完整牙的抗折力为100%,B、C、D组抗折力分别降低到69.0%、56.7%、30.2%。各组均有折裂发生,"不可修"的折裂发生在A组和B组(分别为2和3)。结论 根管治疗术后的牙齿抗折力会降低。牙齿折裂与否主要取决于外力的大小,而不是牙齿的状态。牙冠没有明显破坏时,一旦发生折裂可能累及牙根。