p21对缺血-再灌注损伤后肾小管上皮细胞演变的影响

目的 探讨p21对缺血-再灌注损伤（IRI）后肾小管上皮细胞演变的影响。方法 选择低龄（2个月龄）和高龄（12个月龄）p21（＋／＋）和p21（-／-）鼠，建立左肾IRI模型。于IRI后0、1、3、7d及1、3、6个月光镜下观察肾小管组织学变化，采用免疫组化法检测肾小管上皮细胞增殖细胞核抗原（PCNA）表达，组织化学染色观察肾小管上皮细胞衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）活力，末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 IRI后0d，肾小管以坏死为主，高龄鼠比低龄鼠严重、p21（-／-）鼠比p21（＋／＋）鼠严重（P均〈0．05）。肾小管上皮细胞凋亡在IRI 1d后出现，7d达高峰，且高龄鼠比低龄鼠明显、p21（-／-）鼠比p21（＋／＋）鼠明显（P均d0．05）。低龄鼠IRI后1个月出现SA—β-gal染色阳性的肾小管上皮细胞，而对侧肾此时未见衰老细胞，3和6个月时衰老的肾小管上皮细胞显著增多，且p21（＋／＋）鼠比p21（-／-）鼠明显（P〈0．05）；p21（＋／＋）高龄鼠IRI后0d双肾即可见大量的SA-β-gal染色阳性肾小管上皮细胞，且较p21（-／-）鼠显著增多（P〈O．05），但1d后，p21（＋／＋）和p21（-／-）鼠IRI肾衰老细胞均明显减少（P均〈0．05），1个月后又呈进行性增加，且p21（＋／＋）鼠始终比p21（-／-）鼠严重。高龄和低龄p21（＋／＋）鼠PCNA阳性染色细胞出现的几率差异无显著性（P〉0．05），但低龄鼠细胞增殖能力要强于高龄鼠；而p21（-／-）鼠的细胞增殖能力明显强于p21（＋／＋）鼠，低龄鼠更为显著（P均〈0．05）。对高龄鼠IRI后1d细胞衰老和凋亡进行相关分析显示，二者呈显著负相关Cp21（＋／＋）鼠：r=-0．82，P〈0．001,p21（-／-）鼠：r=-0．76，P〈0．0013。结论 ①IRI可促进正常肾小管上皮细胞衰老的进程；②已经进入衰老状态的肾小管上皮细胞在遭受IRI刺激后，更易走向死亡[坏死和（或）凋亡]；③p21在IRI所致肾小管上皮细胞演变过程中发挥重要的调控作用。     

双侧同时开颅治疗重型颅脑损伤随机对照临床研究

目的探讨双侧同时开颅手术治疗重型颅脑损伤（sTBI）的疗效。方法49例sTBI患者，分为双侧同时开颅手术（治疗组）和传统手术方式（对照组）并于3个月后进行COS评定。结果治疗组27例，恢复良好9例，中度残疾5例，重残4例，植物生存2例，死亡7例。对照组22例，恢复良好3例，中度残疾0例，重残3例，植物生存6例，死亡10例，（P〈0．05）。结论采用双侧同时开颅手术治疗sTBI疗效优于传统手术方式。     

类固醇激素鼓室内给药治疗内耳疾病研究进展

内耳是人体司听觉和平衡觉的器官,内耳病变常遗留耳聋、眩晕和耳鸣。据世界卫生组织(WHO)2001年的初步估计,全世界约有2.5亿听力残疾人(转引自参考文献     

具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

人毛乳头细胞条件培养液治疗斑秃的临床观察

目的：人毛乳头细胞条件培养液治疗斑秃患者的临床观察。方法：用人毛乳头细胞条件培养液治疗100例斑秃患者，并分别选择其中53例和30例作去炎松组和空白组自身对照。结果：人毛乳头细胞条件培养液组、去炎松组和空白组治愈率分别为75％、51％、10％，有效率分别为97％、72％、30％，人毛乳头细胞条件培养液组其治愈率和有效率均明显高于去炎松组和空白组（P〈0．05）。结论：人毛乳头细胞条件培养液对斑秃患者有明显的治疗作用。     

白消安诱导构建胎鼠肢体畸形模型的研究

目的用易获得的化学药物建立大鼠四肢畸形发生率稳定、畸形类型特异的动物模型。方法采用抗肿瘤类致畸药物白消安作为受试物,观察不同剂量和不同给药时间的胎仔畸形率、畸形类型及特征。结果在大鼠受孕第12天(GD12),一次经口给予白消安25mg/kg时,胎仔畸形类型主要为肢体畸形。肢体畸形率以活胎计为37.9%(33/87),以窝计为61.5%(8/13)。畸形类型常见于多指(趾)和缺指(趾),掌跖骨缺失和骨化不全发生率也较高。此外,还发生胫骨缺失和骨化不全,在观察大体形态时所见的短肢是由胫腓骨缺失和发育不全所致。四肢畸形的发生率和严重程度存在着不对称性,后肢较前肢出现率高,缺指(趾)畸形较其他畸形出现率高。结论成功建立大鼠肢体畸形动物模型,为进一步分析研究肢体发育畸形的分子机制和潜在原因奠定了基础。     

肝功能衰竭大鼠脑水通道蛋白-4表达与MR扩散加权成像的相关性研究

目的研究水通道蛋白-4（AQP-4）在急、慢性肝功能衰竭时脑组织中的表达规律，应用MR扩散加权成像（DWI）探讨脑水肿的分子生物学机制。方法雄性SD大鼠65只采用数字表法随机分为急性组（25只）、慢性组（25只）和对照组（15只），分别诱发急、慢性肝功能衰竭。行DWI观察异常信号分布情况，测量顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度。处死后进行血氨检测，取与DWI检查对应的大脑层面切片行病理观察、免疫组织化学及逆转录．聚合酶链式反应（RT—PCR）检测，检测AQP-4蛋白表达水平，并进行统计学分析。结果急性组肝细胞坏死及脑水肿明显，慢性组呈肝硬化改变，脑水肿不明显。血氨浓度急性组、慢性组和对照组分别为（516±46）、（158±26）和（148±32）μmol／L，差异有统计学意义（F=188．325，P〈0．01）。顶部皮质区、外侧部皮质区和邻近侧脑室区的DWI信号强度对照组分别为516±160、727±183和656±181；急性组分别为1766±438、1223±503和1216±446；慢性组分别为700±213、820±263和713±243，差异均有统计学意义（F值分别为44．612、3．422和5．581，P值均〈0．05）。相应区域AQP-4蛋白表达水平（用平均灰度值表示）对照组分别为7379±1617、8104±2093和4851±2178；急性组分别为9580±2616、11057±2334和2949±1735；慢性组分别为12137±2332、11135±3102和7688±2925，3组间差异均有统计学意义（F值分别为11．414、4．602和7．002，P值均〈0．05）。急性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度有相关性（r=0．756，P〈0．05），慢性组AQP-4蛋白表达水平与DWI信号强度无相关关系（r=0．236，P〉0．05）。结论在急、慢性肝功能衰竭中血氨增高是导致脑内能量代谢异常、星形胶质细胞内AQP-4mRNA和蛋白表达增加的主要因素；DWI技术发现的信号异常可很好的反映脑水肿、AQP-4蛋白表达异常的范围、程度。     

肾恶性肿瘤肾外供血动脉的来源及临床意义

目的研究肾恶性肿瘤肾外动脉供血的形成机制，以指导介入治疗。方法对141例肾恶性肿瘤患者，常规进行腹主动脉造影及选择性可疑供血动脉造影，分析其肾外供血动脉的特征及形成机制。结果141例患者中51例有肾外供血动脉（共87支），这些患者肿瘤均突破肾包膜；90例无肾外供血动脉，其中50例肿瘤突破肾包膜，40例肿瘤未突破肾包膜，两者差异有统计学意义（X^2=31．64，P＜0．01）。肾外供血动脉的来源与肿瘤发生的部位有关。结论明确肾恶性肿瘤肾外供血动脉的来源，对于指导临床治疗具有重要的意义。     

单臂外固定支架联合腓肠肌内侧头肌皮瓣治疗胫腓骨骨折合并大面积皮肤撕脱伤

目的探讨单臂外固定支架联合腓肠肌内侧头肌皮瓣治疗胫腓骨骨折合并胫前大面积皮肤撕脱伤的疗效。方法18例患者先进行急诊清创,采用单臂AO外固定支架固定骨折、腓肠肌内侧头肌皮瓣局部旋转覆盖外露胫骨。撕脱的皮肤修成全厚皮片回植供皮区,其中5例仍有缺损,另取同侧大腿全厚皮片移植。结果均无感染,15例旋转皮瓣完全成活,2例皮瓣远端表皮坏死,经换药治愈,1例皮瓣远端全层坏死,经植皮治愈。撕脱皮片回植13例成活,5例小部分坏死,其中3例经换药治愈,2例经中厚皮片植皮愈合。5例大腿皮片完全成活。平均随访19.5(10~36)个月,骨折平均愈合时间4(3.5~6)个月。所有患者行走正常,3例膝关节屈伸活动受限,4例踝关节屈伸受限。结论采用单臂外固定支架联合腓肠肌内侧头肌皮瓣治疗胫腓骨骨折合并胫前大面积皮肤撕脱伤,疗效肯定。     

应用两种评分系统对409 例肝硬化和重型肝炎病例的评估分析

目的应用两种评分方法对409名肝硬化及重型肝炎患者进行评估比较，对两种评估结果及有关的上消化道出血及死亡等因素进行相关性分析。方法统计409名肝硬化及重型肝炎患者的相关资料，应用Child和MELD评分法分别计算后应用Chiss软件进行统计学分析。结果各种计算比较结果见表格。结论Child-Pugh分级法和MELD评分系统各有特点，将两种评分方式与多因素分析与经验有机结合，才是符合临床实际的判断严重肝病预后的较科学手段。