家猪心脏纤维支架的大体解剖

目的　观察猪心纤维支架 ,为猪心的研究和比较解剖学积累资料。方法　取甲醛固定后的猪心2 7例 ,液态塑料浸渍的塑化猪心 5例 ,解剖显示纤维支架后用游标卡尺进行观测。结果　猪心左纤维三角的三边分别平均为 17 4 1± 1 99mm、18.96± 3.2 6mm和 17.6 4± 2 .4 4mm ;右纤维三角三边分别为 15 .83± 2 .11mm、16 .19± 1.94mm和 2 0 .96± 2 .6 2mm ;二尖瓣环、三尖瓣环的周长平均为 73.0 0± 9.71mm ,6 8.89±7.2 4mm ;主动脉瓣环和肺动脉瓣环直径分别为 18.4 4± 2 .89mm和 16 .0 3± 2 .6 3mm ;猪Todaro腱呈扁带状 ,走行部位较深 ,且分支较人心多 ,长度为 2 0 98± 4 2 0mm。结论　猪心纤维支架与人类形态结构相似 ,但瓣环周长和Todaro腱形态有一定差别。     

家猪心脏三尖瓣复合体的形态学观测

目的　观测家猪心脏三尖瓣复合体 ,为家猪心脏研究和心脏移植积累资料。方法　甲醛固定的家猪心脏 35例 ,大体解剖并观测三尖瓣复合体。结果　家猪心脏三尖瓣复合体由瓣环、瓣膜、腱索和乳头肌构成 ,瓣环周长为 70 75± 8 4 5mm ,前瓣、后瓣、隔侧瓣、前隔连合、前后连合、后隔连合的高度分别为 14 5 8±2 6 4、14 16± 2 5 0、12 84± 2 37、6 2 9± 1 97、6 86± 1 0 1、6 5 1± 1 36mm。前隔连合、前后连合、后隔连合的宽度分别为 6 4 0± 1 5 4、6 78± 1 2 3、6 4 3± 1 4 6 ;前乳头肌起始 ,腱索附着于前瓣、后瓣和前后连合的条数分别为 3 0 0± 0 97、3 0 9± 1 0 9、2 4 4± 1 16 ;后乳肌起始 ,腱索附着于后瓣、隔侧瓣和后隔连合的条数分别为 2 6 0± 0 6 9、3 0 9± 1 6 3、1 14± 0 4 3。隔侧乳头肌起始 ,附着于前瓣、隔侧瓣、前隔连合的腱索条数分别为1 71± 0 6 7、2 37± 1 2 6、0 94± 0 4 2。结论　家猪心脏三尖瓣复合体中各结构与人类相似 ,但大小有一定差异。     

Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果.采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响.同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶 3(caspase 3)的表达变化.结果 p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期.随着survivin基因被沉默,caspase 3表达升高(P<0.01).结论 靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡.     

良性家族性新生儿惊厥 KCNQ2 基因新突变

目的 对一个中国良性家族性新生儿惊厥(benign familial neonatal convulsions，BFNC)家系进行基因诊断，并探讨其分子发病机理。方法 对该家系进行详细的临床检查及疾病基因的连锁分析。应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)-DNA直接测序，并用PCR-单链构象多态(single strand conformation polymorphism，SSCP)对先证者、家系内16人及家系外72名无血缘关系的正常入进行KCNQ2基因突变分析。结果 连锁分析提示该家系与KCNQ2基因连锁，并排除与KCNQ3基因连锁。PCR—DNA直接测序在先证者发现．KCNQ2基因突变193ldelG，PCR—SSCP发现家系内其他患者均出现与先证者相同的异常SSCP条带，而72名正常人未出现此异常条带。结论 KCNQ2基因突变是中国人BFNC的发病原因之一，193ldelG是国内外未曾报道过的新突变，连锁分析结合基因突变分析可对BFNC患者进行基因诊断。     

B族链球菌C5a肽酶蛋白表位的克隆、表达和免疫学分析

目的应用生物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白表位，结合基因工程手段进行表位重组、表达和免疫原性分析。方法用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测B族链球菌C5a肽酶蛋白的表位，应用PCR技术扩增出编码该表位基因片段，克隆PCR产物构建重组质粒，测序验证。在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达融合蛋白。表达的蛋白经质谱分析和Western blot鉴定。纯化该融合蛋白并免疫C57／BL小鼠，萃取GBS表面蛋白，双向琼脂扩散试验检测抗体水平。结果在SCPB中预测到1个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组和表达了这一肽段，质谱得出与SCPB蛋白的相似性分数为79，Western-blot证实能与抗SCPB的抗体反应，纯化后融合蛋白纯度〉90％。动物实验证实融合蛋白能产生特异性的抗GBS抗体。结论重组表位具有一定免疫原性。为相关蛋白的毒力机制研究和亚单位疫苗等方面的研究打下了良好的基础。     

EIAV减毒疫苗诱导马外周血单个核细胞Th1型细胞因子的转录

目的：探讨马传染性贫血病毒驴白细胞减毒疫苗免疫马后,外周血单个核细胞中Th1型细胞因子转录水平与免疫保护应答的关系,揭示DLV的免疫保护机制。方法：应用分子克隆及实时定量RT-PCR技术,建立了马PBMC中IFNγ-、IL-2、IL-12 mRNA转录水平的定量检测方法,定期观察4组（疫苗免疫组、阴性对照组、强毒株阳性对照组、自然感染组）12匹马外周血PBMC中细胞因子的转录水平及分布特征,同时监测体温变化等指标。疫苗株免疫动物8个月后,用EIAV强毒株攻击,观察攻击前后细胞因子转录水平的变化。结果：DLV免疫马,在免疫后3周外周血PBMC中IFN-γ、IL-2转录量显著高于阴性对照组及自然感染组（P〈0.01）;免疫后用EIAV强毒株攻击,IFNγ-、IL-2和IL-12转录的量明显升高,免疫马获得完全保护;强毒株攻击阳性对照马IFN-γ、IL-2转录量随疾病进展波动,发热期下降。结论：本研究首次证明EIAV减毒疫苗可诱导马外周血PBMC中IFN-γ、IL-2、IL-12基因高效转录,其转录水平与DLV的免疫保护密切相关,此结果在分子水平为阐明DLV的免疫保护机制提供了新的实验依据。     

Parkin基因启动子区-258T/G多态性与广西地区散发性帕金森病的相关性分析

Objective To investigate the association between the-258T/G polymorphism.in the pro-moter of parkin gene and the risk for sporadic parkinson's disease (SPD) in Guangxi Province, and in relationto the age of onset, of PD patients. Methods PCR-RFLP and sequence analysis were used to determine thegenotype of-258T/G polymorphism between all patients and healthy controls. Results The G allele was morecommon in patients than controls (55.20%:43.33% ,x2=6.898, P<0.05, OR=1.61, 95% CI: 1.13 ～2.30). The frequency of GG genotype was higher in patients than in controls (28.00 %: 18.33%, x2=7.159, P<0.05, OR=2.75, 95% CI : 1.31 ～ 5.77). The frequency of TG + GG genotype was higher in pa-tients than in controls (82.40%:68.33%, x2=6.551, P<0.05, OR=2.17.95%CI: 1.20 ～3.93). Afterbeing stratified by onset age, the frequencies of the G allele and GG genotype were significantly higher in pa-tients with onset age over 50 years than those in controls respectively. On the other hand, the frequency was notsignificantly different between the younger onset PD patients and the controls. Conclusion The parkin promot-er-258T/G polymorphism might be a risk factor for PD in Guangxi Province, and the G allele was increasedwith increasing age.     

低强度脉冲电磁场对大鼠骨质疏松的影响

目的：观察低强度脉冲电磁场（pulsed electromagnetic fields，PEMFs）对去卵巢诱导骨质疏松症的大鼠生化指标和骨应力的影响。方法：雌性SD大鼠30只，随机等分为3组（n=10），分别为假手术组（Sham）、骨质疏松模型组（Model）、脉冲电磁场照射组（PEMFs）。经适应4wk后，在25mg·Kg^-1戊巴比妥钠腹腔麻醉下，Model组和PEMFs组摘除双侧卵巢．Sham组找到但不切除卵巢。各实验组均在相同环境下饲养，模型制备4wk后开始治疗，由GZY型低强度低频率脉冲电磁场发生仪产生低频脉冲磁场，根据实验要求，我们使用亥姆霍兹线圈形成均匀磁场，PEMFs组经照射刺激治疗，频率14．3Hz，场强2Gs．日照8h。Model组和Sham组正常饲养。治疗8wk后，对各组大鼠血清、尿液中ALP和Ca以及骨应力进行检测。结果：（1）ALP、Ca检测结果：与Model组相比，PEMFs组ALP值、Ca值差异均有统计学意义（P〈0．05）。其中，血清中ALP值，Model组为（275．16±228，57），PEMFs组为（179．30±87．68）；Ca值，Model组为（2，66±0，13），PEMFs组为（2．52±0．05）。（2）骨应力检测结果：Model组为（923．60±34．15Pa），PEMFs组为（1152．85±118，20Pa），组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：研究发现，PEMFs对于促进骨重建、提高Ca吸收和骨应力恢复具有积极作用。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝纤维化标志物的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者血清HBV复制水平和肝纤维化血清学标志物的关系。方法入选临床确诊为慢性乙型肝炎的157例患者，其中49例为早期肝硬化，采用荧光定量PCR检测血清HBVDNA水平，放射免疫法和酶免疫法检测肝纤维化血清标志物：透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原，对血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物的关系进行研究分析，并对49例早期肝硬化患者和108例无肝硬化患者的血清HBVDNA及肝纤维化血清标志物水平进行比较。结果慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性（P〉0．05），早期肝硬化患者的血清肝纤维化标志物水平显著高于无肝硬化的患者，而HBVDNA水平却低于无肝硬化的患者（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性。