鼻敏煎对变应性鼻炎模型小鼠T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨鼻敏煎治疗变应性鼻炎的可能作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、鼻敏煎低剂量组、鼻敏煎高剂量组、氯雷他定组,每组12只。除正常对照组外,其余小鼠均由卵清蛋白致敏和激发制备变应性鼻炎小鼠模型,每日激发前30min,鼻敏煎低、高剂量组小鼠分别给予120、600mg/(kg·d)鼻敏煎药液灌胃,氯雷他定组小鼠给予氯雷他定2mg/(kg·d)溶液灌胃,正常对照组及模型组小鼠给予0.2ml蒸馏水灌胃,共持续7天。末次激发后先进行小鼠过敏样症状评分并计算总积分,再检测各组小鼠外周血淋巴细胞因子水平、各淋巴细胞亚群比例及鼻黏膜淋巴细胞亚群转录因子或受体表达。结果模型组小鼠过敏样症状总积分高于正常对照组(P<0.01),而鼻敏煎高剂量组和氯雷他定组过敏样症状总积分较模型组显著降低(P<0.05)。鼻敏煎高剂量组小鼠外周血白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)、白细胞介素17(IL-17)、干扰素γ(IFN-γ)及转化生长因子β(TGF-β)水平,辅助性T细胞2(Th2)、辅助性T细胞17(Th17)、γδT细胞比例,以及鼻黏膜组织中转录因子GATA3、RORγt和γδT细胞受体(γδTCR)表达水平均显著低于模型组,白细胞介素10(IL-10)水平高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论鼻敏煎可调节变应性鼻炎小鼠外周血和鼻黏膜T淋巴细胞亚群比例,抑制Th2、Th17、γδT细胞的分化,相关细胞因子的释放及其介导的炎症反应。这可能是其治疗变应性鼻炎的部分作用机制。     

益气化痰通络方联合药物涂层球囊治疗气虚痰瘀阻络型冠心病的临床疗效研究

【目的】探究益气化痰通络方（由五爪龙、三七、法半夏、茯苓、荷叶、甘草等组成）联合药物涂层球囊（drug coated balloon,DCB）治疗冠心病的安全性、临床疗效及对低剪切力相关血清学指标的影响。【方法】将106例拟行经皮冠状动脉介入治疗的气虚痰瘀阻络型冠心病患者随机分为治疗组和对照组,每组各53例。对照组给予药物洗脱支架植入,治疗组给予药物涂层球囊治疗,并于术后口服益气化痰通络方12周。观察2组患者治疗前后低剪切力相关血清学指标血清单核细胞趋化因子1（MCP-1）、白细胞介素1β（IL-1β）、血管内皮生长因子（VEGF）水平的变化情况,并比较2组患者的中医证候疗效及术后1年不良事件发生率。【结果】（1）中医证候疗效方面：治疗12周后,治疗组的总有效率为88.68%（47/53）,对照组为75.47%（40/53）,组间比较（χ2检验）,治疗组的中医证候疗效明显优于对照组（P＜0.05）。（2）血流低剪切力内皮功能障碍相关指标方面：治疗后,对照组的血清MCP-1、IL-1β、VEGF水平均较治疗前无明显下降（P＞0.05）,而治疗组的血清MCP-1、IL-1β水平均较治疗前明显下降（P＜0.05）;组间比较,治疗组对血清MCP-1、IL-1β、VEGF水平的下降作用均明显优于对照组（P＜0.05）。（3）不良事件总发生率方面：术后随访1年,治疗组的不良事件总发生率为18.87%（10/53）,对照组为20.75%（11/53）,组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。【结论】对于气虚痰瘀阻络型冠心病患者,益气化痰通络方联合DCB可有效作用于冠脉血流低剪切力内皮功能障碍相关靶点,有利于减轻炎症反应,改善心绞痛症状,提高临床疗效,且术后1年不良事件发生率未见增加,具有良好的安全性和有效性。     

酒蒸王不留行工艺优化及其对脂溢性皮炎的药效评价

目的：优化酒蒸王不留行炮制工艺,初步研究酒蒸王不留行治疗脂溢性皮炎的作用机制。方法：建立王不留行黄酮苷和刺桐碱的高效液相色谱（HPLC）检测方法,使用响应曲面法考察料液比、闷润时间、蒸制时间对酒蒸王不留行的影响,优化炮制工艺。建立脂溢性皮炎大鼠模型,通过观察苏木精-伊红（HE）染色病理切片和检测大鼠血清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）含量,探讨酒蒸王不留行治疗脂溢性皮炎的可能机制。结果：经响应曲面试验,最优酒蒸王不留行炮制工艺为：料液比25 kg/100 kg（辅料/药材）,闷润时间2.4 h,蒸制时间2.4 h。药效方面：同模型组大鼠比较,阳性药物组和酒蒸组大鼠皮损评分差异有统计学意义（P<0.01）。HE染色病理切片发现,酒蒸王不留行可以修复并改善脂溢性皮炎模型表皮层和真皮层的细胞坏死,亦可以减缓由脂溢性皮炎引起的淋巴细胞浸润以及结缔组织增生的症状,阳性药物组在治疗时会引起表皮层增厚。此外,阳性药物组和酒蒸组均能提高模型大鼠血清中IL-2、IFN-γ水平的同时,降低血清中IL-4、IL-10的水平。结论：确定了酒蒸王不留行的最佳炮制工艺,且酒蒸王不留行能在一定程度上缓解脂溢性皮炎,其机制可能是通过影响辅助性T细胞1/辅助性T细胞2（Th1/Th2）平衡实现的。     

肠道粘膜免疫的构成与功能

正常生理状况下,肠道的细菌和毒素并不对机体产生危害,这与机体各系统之间的相互协调和肠道特有的完整屏障功能有关。其中,由肠上皮内淋巴细胞、固有层淋巴细胞、Peyer's淋巴结等肠相关性淋巴组织成的肠道粘膜免疫屏障．在防御和抵制细菌、病毒和毒素的入侵中起着举足轻重的作用。如何增强粘膜免疫功能,降低肠源性感染的发生具有重要的意义。     

透明质酸刺激因子对增生性瘢痕成纤维细胞生长增殖的影响

目的：了解兔源性透明质酸刺激因子（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ,ＨＡＳＦ）对人增生性产痕成纤维细胞生长增殖的影响。方法：将ＨＡＳＦ作用于体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,测定＾３Ｈ－ＴｄＲ参入量、ＭＴＴ反应Ａ值及上清液中有质酸（ＨＡ）的含量。结果：１×１０＾－３～１×１０＾－２ｇ／Ｌ值降低,ＨＡ含量明显增加（Ｐ〈０．０１）。结论：兔源性ＨＡＳＦ在体外能促进人增     

透明质酸刺激因子局部外用对兔耳缺血创面愈合的影响

目的： 实有质酸刺激因子（ＨＡＳＦ）对缺血创面愈合的促进作用,为临床应用提供理论及实验依据。方法：应用本科实验室提纯的ＨＡＳＦ,稀释成２５,５０,１００及２００ｍｇ／Ｌ４种不同浓度,并以生理盐水（ＮＳ）及有有质酸（ＨＡ）作,作用于兔耳缺血创面,进行大体观察及显微测量。结果：用药组创面愈合速度快于对照组,两者相比有显著差异（Ｐ〈０．０１）。结论：ＨＡＳＦ能够提高兔耳缺筹办面愈合速度,改善愈合质量。     

大鼠皮下植入新型生物可降解材料聚-β-羟基丁酯的生物相容性

目的：评价生物可降解材料聚－β－羟基丁酯（ｐｏｌｙ－３－ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｒａｔｅ,ＰＨＢ）的生物相容性．方法：８０只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下植入ＰＨＢ,分别在０．５,１,３,６ｍｏ取出,研究其周围的组织反应和ＰＨＢ的降解情况．结果：ＰＨＢ能被组织很好的相容,在其植入的临近部位无急性炎症反应,无脓肿形成及组织坏死发生．取材分别做ＨＥ染色,Ｖａｎ－Ｇｉｅｓｏｎ染色,在０．５,１,３,６ｍｏ比较纤维包膜的厚度及各种炎细胞浸润程度．在０．５ｍｏ组炎细胞以中性粒细胞为主,纤维包膜疏松相对较薄;在１ｍｏ,３ｍｏ组炎细胞总数下降,淋巴细胞比例高于中性粒细胞,纤维包膜致密,胶原纤维成分增多;６ｍｏ组炎细胞数进一步减少,成纤维细胞明显减少,纤维包膜变薄而致密．植入的ＰＨＢ在２ｗｋ内引起轻微的反应,在１ｍｏ～３ｍｏ后反应明显下降,６ｍｏ后ＰＨＢ出现部份降解．结论：ＰＨＢ植入引起的组织反应变化轻微,有较好的生物相容性,且有部分降解,是具有应用前景的生物可降解材料．     

Assessing the delivery of neutrophils to tissues in neutropenia

Studies of neutrophil kinetics in neutropenic individuals, as well as clinical observations of variability in the occurrence of infection among patients with neutropenia, have suggested that blood neutrophil counts may not uniformly reflect the effective delivery of neutrophils to extravascular tissues where the cells perform their principal host defense functions. To evaluate this possibility we developed a sensitive, reproducible method of measuring the extravascular delivery of neutrophils to a normal mucosal site of neutrophil turnover. This method is based upon the quantification of neutrophils recoverable from saline mouth wash specimens. Twenty-five mL specimens, obtained in a controlled manner from neutropenic patients and normal subjects, were centrifuged and the sediments resuspended in 1.0 mL Hank's buffer with 2 micrograms acridine orange, incubated at 37 degrees C for 15 minutes, and then examined in a hemocytometer chamber by fluorescence microscopy. Neutrophils could be clearly distinguished by their characteristic fluorescence and were counted. With this method as few as 1,500 neutrophils were detected reliably in mouth wash specimens. Mucosal neutrophil counts varied less than 10% with repeated sampling of individual subjects over 5-day periods and were consistently greater than 1.3 X 10(5)/specimen in non-neutropenic individuals. Although profound neutropenia was generally reflected by lower than normal oral mucosal neutrophil counts, these counts were significantly higher in individuals with chronic severe neutropenia (blood neutrophils less than 300/mm3) than in patients with acute neutropenia of comparable severity that had developed following chemotherapy. Also, in individuals recovering from profound neutropenia, neutrophils usually reappeared earlier in mouth wash specimens than in blood, and oral mucosal neutrophil counts attained recovery levels more rapidly than did blood counts. This phenomenon was particularly evident in an individual with cyclic neutropenia. Moreover, mucosal neutrophils could occasionally be detected in profoundly neutropenic patients when neutrophils were not present in blood samples. These findings indicate that mucosal neutrophil counts in individuals with neutropenia provide information about the delivery of neutrophils to tissues that may not be apparent from blood neutrophil counts alone.     

激素敏感脂酶基因高度表达对泡沫细胞形成的作用

中国仓鼠卵细胞在给予β－ＶＬＤＬ后，细胞内蓄积胆固醇酯，形成泡沫样细胞。以腺病毒基因转移方法书激素敏感脂酶基因转染到中国仓鼠卵细胞中，得到了来自激素敏感脂酶的胆固醇酯水解活性高度表达，此时，β－ＶＬＤＬ导致的胆固醇酯蓄积作用被阻断，提示增加胆固醇酯水解可以防止泡沫细胞形成。