基于cAMP/PKA/CREB/BDNF信号通路探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抗抑郁的作用机制

目的：该研究基于环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路探究柴胡加龙骨牡蛎汤对慢性不可预见性温和应激(CUMS)法制备的大鼠抑郁模型的干预作用。方法：随机数字表法将60只SD大鼠分为正常组、模型组、柴胡加龙骨牡蛎汤低、中、高剂量组和氟西汀组。除正常组外,其他各组进行49 d的CUMS制备大鼠抑郁模型。第29天开始给药,柴胡加龙骨牡蛎汤组低、中、高剂量组分别给予柴胡龙骨牡蛎汤颗粒剂2.89、5.78、11.56 g·kg^-1,氟西汀组给予盐酸氟西汀胶囊2.06 mg·kg^-1。旷场实验和强迫游泳实验观察大鼠行为学表现,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、cAMP水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠海马组织PKA、CREB、BDNF mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织PKA、BDNF蛋白表达水平;免疫组化法(IHC)检测CREB定位表达;...     

一种合成多肽——PLNG自由穿膜现象初探

目的 研究人工设计合成的多肽PLNG在不同作用环境条件下的跨膜运动现象。方法 体外培养不同组织来源的鼠细胞及CHO细胞、BEL细胞,用免疫荧光观察不同浓度、不同温度、不同反应时间条件下,PLNG的穿膜能力及PLNG对不同类型的细胞（CHO细胞、BEL细胞、成年大鼠肝细胞、幼大鼠肝细胞、成年大鼠心肌细胞、幼大鼠心肌细胞、成年大鼠神经细胞、幼大鼠神经细胞）的穿膜特性。结果 PLNG在不同作用环境条件下对细胞膜都有穿透作用,且进入细胞的量近乎相同。结论 实验观察到PLNG具有广谱的穿膜能力,这种穿膜能力在一定范围内对温度、时间及PLNG浓度不敏感;而且这种穿膜能力不受组织特异性的限制。     

3味山姜属中药黄酮类成分对大鼠环核苷酸水平及交感神经-肾上腺轴的影响

目的：观察高良姜、大高良姜、红豆蔻黄酮类成分对胃溃疡寒证大鼠环核苷酸水平及交感神经-肾上腺轴的影响,探讨3味山姜属中药温热药性的物质基础。方法：采用灌服冰知母水煎液与15%冰乙酸制备大鼠胃溃疡寒证模型,以干姜姜辣素为阳性对照,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定腺苷酸环化酶（AC）、磷酸二酯酶2（PDE2）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、多巴胺β羟化酶（D-β-H）含量。结果：与空白组比较,胃溃疡寒证模型组大鼠胃组织AC、cAMP含量及cAMP/cGMP比值显著降低,PDE2含量显著升高（P<0.01）。与模型组比较,高良姜、大高良姜、红豆蔻高低剂量组大鼠胃组织AC含量升高;高良姜、大高良姜、红豆蔻高低剂量组大鼠胃组织PDE2含量显著降低,cAMP含量、cAMP/cGMP比值显著升高（P<0.01或P<0.05）。结论：3味山姜属中药黄酮类成分通过调节胃溃疡寒证大鼠环核苷酸水平从而促进交感神经-肾上腺轴功能活动的作用,也体现出黄酮类成分药性温热。     

基于指纹图谱和多指标含量测定的蜜远志质量评价

目的 建立指纹图谱和多指标定量的蜜远志质量评价方法。方法 Kromasil 100-5-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）为固定相,以乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长318 nm。对16批蜜远志建立指纹图谱,确定共有峰并进行相似度分析结合化学计量学分析。采用Waters Xbridge Shiled RP C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）进行同时测定远志（口山）酮III、3,6''-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的含量。结果 在指纹图谱研究中,标定了27个共有峰,结合对照品和HPLC-Q-TOF-MS共指认8个成分,分别为西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志（口山）酮IX、远志（口山）酮III、3,6''-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元。聚类分析将16批样品分为3类;经主成分分析,主成分1～3是影响蜜远志质量评价的主要因子。多指标含量测定中远志（口山）酮III、3,6''-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的质量分数分别为0.027%～0.068%、0.074%～0.798%、1.1%～1.4%、0.15%～0.36%、0.15%～0.37%。经方法学验证,线性关系良好（r≥0.999 6）,平均加样回收率为97.15%～100.9%。结论 所建立的指纹图谱结合多指标含量测定方法准确、高效,特征性强,可为蜜远志饮片的质量评价和临床应用提供有效参考。     

2型糖尿病心血管病变的QT离散度分析

目的　探讨 2型糖尿病心血管病变的QT离散度变化的意义。方法　分析 40例 2型糖尿病心血管病变者体表 12导联同步心电图 ,并与 42例 2型糖尿病无心血管病变及 42例正常人作对照。结果　糖尿病心血管病变组QTd及QTcd均显著高于其余两组 (P <0 .0 1)。以QTd >46ms为异常 ,则诊断糖尿病心血管病变的敏感性、特异性及准确性分别为 82 .5 %、85 .7%及 84.1%。以QTcd >5 2ms判为异常 ,则诊断敏感性、特异性及准确性分别为 85 .0 %、83.3 %、84.1%。结论　QTd及QTcd延长可作为临床诊断 2型糖尿病患者伴心血管病变的一项指标。     

MTT显色反应实验条件分析

目的 :检验分析MTT实验方法本底高、灵敏度低、稳定性差的影响因素 ,改进实验条件提高灵敏度和稳定性 ,降低本底。方法 :用MTT比色方法 ,细胞毒试验及细胞增殖实验 ,分析比较不同条件下MTT显色反应的性能特点。结果 :比较了 13种溶剂对Formazan的溶解性能。分析检验了琥珀酸脱氢酶在细胞上的分布特点、pH值对MTT反应体系的影响、酚红和牛血清对检验结果的影响 ,提出相应对策。检测了MTT反应时间曲线和细胞活力曲线。分析了改进后的MTT实验方法的灵敏度和稳定性。结论 :以MTT为底物的酶在细胞代谢中主要分布在细胞膜表面。MTT反应体系的pH值为 6 7,比较好的Formazan溶剂是正丙醇、异丙醇和乙二醇乙醚。去掉细胞培养上清 ,检测细胞上的酶 ,用溶剂使蛋白质变性 ,经沉淀去掉蛋白质影响 ,能使MTT实验方法的本底降低 ,灵敏度提高。通常情况下该方法检测K 5 62细胞和人淋巴细胞的灵敏度分别为 10 0 0和 10 0 0 0个细胞左右。     

葛根提取物对未成熟大鼠乳腺、子宫发育影响的研究

目的 :研究葛根提取物对大鼠乳腺、子宫发育的影响。方法 :正常Wistar雌性大鼠 4 0只 ,体重为 6 5～85g ,随机分为正常组、雌二醇组、葛根提取物低剂量组、葛根提取物高剂量组 ,每组 10只。各组给药 7d后 ,测血清中激素 ,剥离乳腺与子宫称重。结果 :①葛根提取物能显著提高未成熟大鼠乳腺和子宫重量 ;②葛根提取物能增加大鼠血清促卵泡生成素 (FSH)、促黄体生成素 (LH)、雌二醇 (E₂ )含量 ,降低泌乳素 (PRL)含量。结论 :葛根提取物能促进未成熟大鼠乳腺及子宫发育 ,为进一步开发促进青年女性乳腺及子宫发育的新药提供实验依据 ,同时为治疗先天性子宫发育不良患者提供基础资料。     

基于雌激素应答元件转录调节的药物筛选模型的建立

目的 :建立靶向雌激素应答元件 (ERE)的药物筛选模型 ,为筛选雌激素受体 (ER)配体奠定基础。方法 :构建重组报告基因载体 pERE-TAL-SEAP ,与对照载体 pCMVβ瞬时共转染表达人ERα或ERβ的Hela细胞株 ,观察化合物对SEAP报告基因表达活性的影响。结果 :雌二醇 (E₂ )诱导表达人ERα或ERβ的Hela细胞株SEAP的表达 ,EC₅₀分别为 (80.5 8± 8.51) pmol·L^-1和 (10 3.90± 5.29) pmol·L^-1,最大效应浓度为 10nmol·L^-1;金雀黄素 (Gen)也诱导表达人ERα和ERβHela细胞株SEAP的表达 ,EC₅₀ 分别为 (39.38±2.26)nmol·L^-1和 (10.86±0 .75 )nmol·L^-1;最大效应浓度为 1μmol·L^-1;E₂ 和Gen诱导SEAP表达的最大水平较对照孔细胞高 7～ 14倍。ER拮抗剂ICI182 ,780可完全抑制E₂ 和Gen对SEAP的诱导作用。结论 :利用此模型检测化合物诱导报告基因的表达水平可筛选和发现ER配体。     

重度妊高征血清尿酸及β_2-MG监测对评价围产期结局的临床意义

目的 :探讨尿酸 (UA)、β2-微球蛋白(β2-MG)对重度妊高征围产期结局的影响。方法 :测定51例重度妊高征患者血清UA、β2-MG、尿素氮 (BUN)、肌酐(Cr)水平和尿蛋白定量 ,统计孕期及新生儿情况 ,按围产儿存活与否分为死亡组与存活组进行分析。结果 :(1)死亡组前3个指标明显高于存活组 ,尿蛋白定量2组差异无统计学意义。(2)血清UA水平与BUN、β2-MG水平呈正相关 ,与新生儿体重呈负相关。结论 :监测重度妊高征患者血压、尿蛋白、尿素氮、肌酐的同时更应密切监测尿酸和β2-MG的变化 ,以指导临床诊治     

氨溴索对头孢哌酮/舒巴坦肺转运作用的临床研究

目的：研究氨溴索（沐舒坦）临床疗效及对头孢哌酮／舒巴坦（舒普深）肺转运的作用。方法：对106例老年肺炎患者进行随机开放平行对照试验。分为治疗组54例，采用生理氯化钠溶液100mL加头孢哌酮／舒巴坦3.0g，以30mg.min^-1静滴，bid，在滴注50mL时，静注氨溴索45mg，时间不少于5min,bid；对照除不用氨溴索外，其他同治疗组。结果：治疗组，对照组总有效率分别为87．04％和78．80％（P＜0．05），痊愈率分别为70．37％和57．24％（P＜0．01）；细菌清除率分别78．17％和68．18％（P＜0．05）。痰药浓度治疗组高于对照组（P＜0．01），血药浓度2组间无显著性差异。结论：氨溴索不仅有祛痰作用外，还增加头孢哌酮／舒巴坦向转内转运，增强其杀菌作用。